Δημιουργία μοντέλου επαγωγής του καρκίνου του παχέος εντέρου σε διαγονιδιακούς μύες με ιστοειδική αποσιώπηση του ρόλου της Geminin : μακροσκοπική και μοριακή μελέτη και ιστολογική ανάλυση των αρχικών σταδίων της ογκογένεσης
Ο καρκίνος του παχέος εντέρου είναι o τρίτος σε συχνότητα πιο συνήθης καρκίνος, στο δυτικό κόσμο, για άντρες και γυναίκες. Η πρωτεΐνη Geminin έχει συσχετιστεί πολλές φορές στο παρελθόν με την καρκινογένεση κι έχει διερευνηθεί ο ρόλος της στην κακοήθη εξαλλαγή, λόγω του κεντρικού της ρόλου στο συντον...
| Κύριος συγγραφέας: | |
|---|---|
| Άλλοι συγγραφείς: | |
| Μορφή: | Thesis |
| Γλώσσα: | Greek |
| Έκδοση: |
2017
|
| Θέματα: | |
| Διαθέσιμο Online: | http://hdl.handle.net/10889/10796 |
| id |
nemertes-10889-10796 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| institution |
UPatras |
| collection |
Nemertes |
| language |
Greek |
| topic |
Καρκίνος παχέος εντέρου Διαγονιδιακοί μύες Oγκογένεση 616.994 347 Colorectal cancer Geminin Τrangenic mice Oncogenesis |
| spellingShingle |
Καρκίνος παχέος εντέρου Διαγονιδιακοί μύες Oγκογένεση 616.994 347 Colorectal cancer Geminin Τrangenic mice Oncogenesis Βίλλιου, Μαρία Δημιουργία μοντέλου επαγωγής του καρκίνου του παχέος εντέρου σε διαγονιδιακούς μύες με ιστοειδική αποσιώπηση του ρόλου της Geminin : μακροσκοπική και μοριακή μελέτη και ιστολογική ανάλυση των αρχικών σταδίων της ογκογένεσης |
| description |
Ο καρκίνος του παχέος εντέρου είναι o τρίτος σε συχνότητα πιο συνήθης καρκίνος, στο δυτικό κόσμο, για άντρες και γυναίκες. Η πρωτεΐνη Geminin έχει συσχετιστεί πολλές φορές στο παρελθόν με την καρκινογένεση κι έχει διερευνηθεί ο ρόλος της στην κακοήθη εξαλλαγή, λόγω του κεντρικού της ρόλου στο συντονισμό της αντιγραφής του DNA και της κυτταρικής διαίρεσης. Μέχρι σήμερα, έχει αποδειχθεί ότι η αποσιώπηση της Geminin έχει ως αποτέλεσμα την εκτοπική επαναντιγραφή του DNA, τον υπερδιπλασιαμό του γονιδιώματος, και κατά συνέπεια την πρόκληση γενωμικής αστάθειας και την πρόκληση κακοήθης εξαλλαγής.
Στη συγκεκριμένη μελέτη επιτεύχθηκε η ιστοειδική αδρανοποίηση του γονιδίου της Geminin σε διαγονιδιακούς μύες, με τη χρήση του συστήματος ανασυνδυασμού Cre/loxP και έπειτα από επιθυμητές διασταυρώσεις μυών. Για την αποσιώπηση του γονιδίου της Geminin ειδικά στα κύτταρα του παχέος εντέρου, χρησιμοποιήθηκαν μύες, τους οποίους προμηθευτήκαμε από το Jackson Laboratory, στους οποίους η έκφραση της Cre ρεκομπινάσης ελέγχεται από τα ρυθμιστικά στοιχεία είτε του γονιδίου της πρωτεΐνης Βιλλίνης, είτε του γονιδίου Lgr5. Η επαγωγή της καρκινογένεσης του παχέος εντέρου αφορούσε το συνδυασμό ενός ισχυρού γονοτοξικού καρκινογόνου, το azoxymethane (ΑΟΜ), με το φλεγμονώδη παράγοντα dextran sulfate sodium (DSS).
Δημιουργήθηκε ένα χημικώς επαγόμενο μοντέλο καρκινογένεσης του παχέος εντέρου σε διαγονιδιακούς μύες με ιστοειδική αδρανοποίηση του γονιδίου της Geminin και πραγματοποιήθηκε μακροσκοπική, μοριακή και ιστοπαθολογική ανάλυση των σταδίων της ογκογένεσης. Με αυτή τη διπλωματική εργασία, μελετάται για πρώτη φορά in vivo, ο ρόλος της πρωτεΐνης Geminin στην καρκινογένεση του παχέος εντέρου. |
| author2 |
Ταραβήρας, Σταύρος |
| author_facet |
Ταραβήρας, Σταύρος Βίλλιου, Μαρία |
| format |
Thesis |
| author |
Βίλλιου, Μαρία |
| author_sort |
Βίλλιου, Μαρία |
| title |
Δημιουργία μοντέλου επαγωγής του καρκίνου του παχέος εντέρου σε διαγονιδιακούς μύες με ιστοειδική αποσιώπηση του ρόλου της Geminin : μακροσκοπική και μοριακή μελέτη και ιστολογική ανάλυση των αρχικών σταδίων της ογκογένεσης |
| title_short |
Δημιουργία μοντέλου επαγωγής του καρκίνου του παχέος εντέρου σε διαγονιδιακούς μύες με ιστοειδική αποσιώπηση του ρόλου της Geminin : μακροσκοπική και μοριακή μελέτη και ιστολογική ανάλυση των αρχικών σταδίων της ογκογένεσης |
| title_full |
Δημιουργία μοντέλου επαγωγής του καρκίνου του παχέος εντέρου σε διαγονιδιακούς μύες με ιστοειδική αποσιώπηση του ρόλου της Geminin : μακροσκοπική και μοριακή μελέτη και ιστολογική ανάλυση των αρχικών σταδίων της ογκογένεσης |
| title_fullStr |
Δημιουργία μοντέλου επαγωγής του καρκίνου του παχέος εντέρου σε διαγονιδιακούς μύες με ιστοειδική αποσιώπηση του ρόλου της Geminin : μακροσκοπική και μοριακή μελέτη και ιστολογική ανάλυση των αρχικών σταδίων της ογκογένεσης |
| title_full_unstemmed |
Δημιουργία μοντέλου επαγωγής του καρκίνου του παχέος εντέρου σε διαγονιδιακούς μύες με ιστοειδική αποσιώπηση του ρόλου της Geminin : μακροσκοπική και μοριακή μελέτη και ιστολογική ανάλυση των αρχικών σταδίων της ογκογένεσης |
| title_sort |
δημιουργία μοντέλου επαγωγής του καρκίνου του παχέος εντέρου σε διαγονιδιακούς μύες με ιστοειδική αποσιώπηση του ρόλου της geminin : μακροσκοπική και μοριακή μελέτη και ιστολογική ανάλυση των αρχικών σταδίων της ογκογένεσης |
| publishDate |
2017 |
| url |
http://hdl.handle.net/10889/10796 |
| work_keys_str_mv |
AT billioumaria dēmiourgiamontelouepagōgēstoukarkinoutoupacheosenterousediagonidiakousmyesmeistoeidikēaposiōpēsētouroloutēsgemininmakroskopikēkaimoriakēmeletēkaiistologikēanalysētōnarchikōnstadiōntēsonkogenesēs AT billioumaria theinvestigationoftheroleofnovelproteincalledgemininincolorectalcancerinductionandincancerintestinalstemcellscreationofachemicalinduciblemousemodelofcoloncarcinogenesiswithectopicinactivationofgeminingeneintransgenicmicemacroscopicmicroscopicandhistologic |
| _version_ |
1799945011341557760 |
| spelling |
nemertes-10889-107962022-09-06T05:13:20Z Δημιουργία μοντέλου επαγωγής του καρκίνου του παχέος εντέρου σε διαγονιδιακούς μύες με ιστοειδική αποσιώπηση του ρόλου της Geminin : μακροσκοπική και μοριακή μελέτη και ιστολογική ανάλυση των αρχικών σταδίων της ογκογένεσης The investigation of the role of novel protein, called Geminin, in colorectal cancer induction and in cancer intestinal stem cells : creation of a chemical inducible mouse model of colon carcinogenesis, with ectopic inactivation of Geminin gene in transgenic mice. Μacroscopic, microscopic and histological analysis of the initial stages of oncogenesis was held Βίλλιου, Μαρία Ταραβήρας, Σταύρος Villiou, Maria Λυγερού, Ζωή Μπράβου, Βασιλική Ταραβήρας, Σταύρος Καρκίνος παχέος εντέρου Διαγονιδιακοί μύες Oγκογένεση 616.994 347 Colorectal cancer Geminin Τrangenic mice Oncogenesis Ο καρκίνος του παχέος εντέρου είναι o τρίτος σε συχνότητα πιο συνήθης καρκίνος, στο δυτικό κόσμο, για άντρες και γυναίκες. Η πρωτεΐνη Geminin έχει συσχετιστεί πολλές φορές στο παρελθόν με την καρκινογένεση κι έχει διερευνηθεί ο ρόλος της στην κακοήθη εξαλλαγή, λόγω του κεντρικού της ρόλου στο συντονισμό της αντιγραφής του DNA και της κυτταρικής διαίρεσης. Μέχρι σήμερα, έχει αποδειχθεί ότι η αποσιώπηση της Geminin έχει ως αποτέλεσμα την εκτοπική επαναντιγραφή του DNA, τον υπερδιπλασιαμό του γονιδιώματος, και κατά συνέπεια την πρόκληση γενωμικής αστάθειας και την πρόκληση κακοήθης εξαλλαγής. Στη συγκεκριμένη μελέτη επιτεύχθηκε η ιστοειδική αδρανοποίηση του γονιδίου της Geminin σε διαγονιδιακούς μύες, με τη χρήση του συστήματος ανασυνδυασμού Cre/loxP και έπειτα από επιθυμητές διασταυρώσεις μυών. Για την αποσιώπηση του γονιδίου της Geminin ειδικά στα κύτταρα του παχέος εντέρου, χρησιμοποιήθηκαν μύες, τους οποίους προμηθευτήκαμε από το Jackson Laboratory, στους οποίους η έκφραση της Cre ρεκομπινάσης ελέγχεται από τα ρυθμιστικά στοιχεία είτε του γονιδίου της πρωτεΐνης Βιλλίνης, είτε του γονιδίου Lgr5. Η επαγωγή της καρκινογένεσης του παχέος εντέρου αφορούσε το συνδυασμό ενός ισχυρού γονοτοξικού καρκινογόνου, το azoxymethane (ΑΟΜ), με το φλεγμονώδη παράγοντα dextran sulfate sodium (DSS). Δημιουργήθηκε ένα χημικώς επαγόμενο μοντέλο καρκινογένεσης του παχέος εντέρου σε διαγονιδιακούς μύες με ιστοειδική αδρανοποίηση του γονιδίου της Geminin και πραγματοποιήθηκε μακροσκοπική, μοριακή και ιστοπαθολογική ανάλυση των σταδίων της ογκογένεσης. Με αυτή τη διπλωματική εργασία, μελετάται για πρώτη φορά in vivo, ο ρόλος της πρωτεΐνης Geminin στην καρκινογένεση του παχέος εντέρου. Colorectal cancer is a malignancy arising from the inner wall of the large intestine and is considered the third leading cause of cancer-related deaths in the western world. Colorectal cancer can begin as a small adenomatous polyp. Over time some of these polyps become colon cancers. Genomic instability is a hallmark of cancer and occurs early in carcinogenesis as a result of the loss of control mechanisms present in the normal cell cycle. In our study, we have focused on the role of Geminin, a small protein that inhibits formation of the pre-replicative complex (pre-RC) at origins of DNA replication and, therefore, cell cycle progression. Geminin, by binding to and inhibiting Cdt1, prevents premature loading of the MCM2-7 helicases complex, thus regulating the fidelity of DNA replication, which occurs once per cell cycle. Studies on various cell lines have shown that Geminin ablation results in genome over-replication and DNA damage, while its downregulation has been associated with centrosome overduplication and abnormal chromosome segregation. In order to provide in vivo evidence of the role of Geminin in tumor initiation, we created an induction model of colorectal cancer, with conditionally inactivation of Geminin in the murine large intestine, using the Cre-LoxP system. Geminin FL/FL mice were crossed with GemKO/WT; Lgr5-EGFP- IRES-CreERT2 and GemKO/WT ; Villin-Cre transgenic mice, to inactivate the gene in intestinal stem cells and epithelial cells, respectively. The experimental mice were administered azoxymethane (AOM) intraperitoneally and were exposed to the inflammatory agent dextran sodium sulphate (DSS) to develop efficient murine models for colorectal carcinogenesis. Study of macroscopic, histological and molecular analysis of the stages of carcinogenesis was held. We show that we have a specific action of Cre- recombinase only in the murine intestine of mice, so we can conditionally inactivate Geminin in intestinal cells. We developed an efficient animal model of colitis-related carcinogenesis and we show that mice lacking Geminin develop more and higher diameters of tumors and have a larger tumor burden compared to sham-treated controls. Also, the inactivation of Geminin promotes the rapid development of cancer. This is evidenced by the histological and molecular examinations of tumors. 2017-12-11T11:22:52Z 2017-12-11T11:22:52Z 2016-11-02 Thesis http://hdl.handle.net/10889/10796 gr 0 application/pdf |
