| Summary: | Η Geminin, ένας αναστολέας της αδειοδότησης της αντιγραφής του DNA, μαζί με την αλληλεπιδρούσα πρωτεΐνη Cdt1, εξασφαλίζουν την σωστή αντιγραφή του DNA στα σπονδυλωτά. Αρκετές μελέτες έχουν δείξει ότι η υπερέκφραση της Cdt1 ή η απαλοιφή της Geminin in vitro οδηγεί σε επαναντιγραφή και βλάβες στο DNA, ενώ αυξημένη έκφραση της Geminin έχει παρατηρηθεί σε διάφορους καρκίνους στον άνθρωπο. Προκειμένου να εξετάσουμε το ρόλο της Geminin in vivo, αποσιωποιήσαμε το γονίδιο της Geminin στο παχύ έντερο και τον πνεύμονα των μυών και προκαλέσαμε χημική καρκινογένεση. Σε αυτή την διατριβή δείχνουμε ότι οι μύες που στερούνται την έκφραση της πρωτεΐνης Geminin αναπτύσσουν σημαντικά υψηλότερο αριθμό όγκων και φέρουν μεγαλύτερο φορτίο όγκου σε σύγκριση με τους μύες ελέγχου, κατά τη διάρκεια της χημικής καρκινογένεσης. Πιο συγκεκριμένα, κατά τη διάρκεια της πνευμονικής καρκινογένεσης όλοι οι μύες υποβλήθηκαν σε ενέσεις ουρεθάνης ενώ για την επαγωγή της καρκινογένεσης του παχέως εντέρου, οι μύες υποβλήθηκαν στα χημικά AOM και DSS. Η επιβίωση μειώνεται επίσης σημαντικά σε μύες που δεν εκφράζουν Geminin κατά τη διάρκεια της πνευμονικής καρκινογένεσης. Στατιστικά σημαντική αύξηση του συνολικού αριθμού και του βαθμού των αλλοιώσεων (υπερπλασίες, αδενώματα και καρκινώματα) παρατηρήθηκε μετά από χρώση με αιματοξυλίνη-ηωσίνη. Επιπλέον, ανιχνεύθηκε αυξημένη γονιδιωματική αστάθεια, μέσω αυξημένης έκφρασης των πρωτεϊνών ATR και γΗ2ΑΧ. Στη συνέχεια, αναλύσαμε περαιτέρω την έκφραση της Geminin στον καρκίνο του ανθρώπινου παχέως εντέρου και βρήκαμε αυξημένη έκφραση, καθώς και μια θετική συσχέτιση με τα επίπεδα ΑΤΜ/ATR και μια μη-μονοτονική συσχέτιση με τα επίπεδα της γΗ2ΑΧ. Τα δεδομένα αυτά υποστηρίζουν έναν ογκοκατασταλτικό ρόλο για την Geminin, που δρα προστατεύοντας τη σταθερότητα του γονιδιώματος, ενώ ταυτόχρονα η υπερέκφραση της σχετίζεται επίσης με τη γονιδιωματική αστάθεια. Επιπλέον, προκειμένου να εκτιμηθεί ο ρόλος της Cdt1 στην καρκινογένεση in vivo, δημιουργήσαμε ποντίκια που υπερεκφράζουν υπό όρους το γονίδιο Cdt1.
|
|---|
