Διερεύνηση των παραγόντων αδειοδότησης της αντιγραφής CDT1 ΚΑΙ Geminin στα καρκινικά βλαστικά κύτταρα και την καρκινογένεση
Η Geminin, ένας αναστολέας της αδειοδότησης της αντιγραφής του DNA, μαζί με την αλληλεπιδρούσα πρωτεΐνη Cdt1, εξασφαλίζουν την σωστή αντιγραφή του DNA στα σπονδυλωτά. Αρκετές μελέτες έχουν δείξει ότι η υπερέκφραση της Cdt1 ή η απαλοιφή της Geminin in vitro οδηγεί σε επαναντιγραφή και βλάβες στο DNA,...
| Κύριος συγγραφέας: | |
|---|---|
| Άλλοι συγγραφείς: | |
| Μορφή: | Thesis |
| Γλώσσα: | Greek |
| Έκδοση: |
2018
|
| Θέματα: | |
| Διαθέσιμο Online: | http://hdl.handle.net/10889/11038 |
| id |
nemertes-10889-11038 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| institution |
UPatras |
| collection |
Nemertes |
| language |
Greek |
| topic |
Γονιδιωματική αστάθεια Genomic instability Geminin Cdt1 H2AX ATM ATR 616.994 07 |
| spellingShingle |
Γονιδιωματική αστάθεια Genomic instability Geminin Cdt1 H2AX ATM ATR 616.994 07 Χαμπέρης-Τσανίρας, Σπυρίδων Διερεύνηση των παραγόντων αδειοδότησης της αντιγραφής CDT1 ΚΑΙ Geminin στα καρκινικά βλαστικά κύτταρα και την καρκινογένεση |
| description |
Η Geminin, ένας αναστολέας της αδειοδότησης της αντιγραφής του DNA, μαζί με την αλληλεπιδρούσα πρωτεΐνη Cdt1, εξασφαλίζουν την σωστή αντιγραφή του DNA στα σπονδυλωτά. Αρκετές μελέτες έχουν δείξει ότι η υπερέκφραση της Cdt1 ή η απαλοιφή της Geminin in vitro οδηγεί σε επαναντιγραφή και βλάβες στο DNA, ενώ αυξημένη έκφραση της Geminin έχει παρατηρηθεί σε διάφορους καρκίνους στον άνθρωπο. Προκειμένου να εξετάσουμε το ρόλο της Geminin in vivo, αποσιωποιήσαμε το γονίδιο της Geminin στο παχύ έντερο και τον πνεύμονα των μυών και προκαλέσαμε χημική καρκινογένεση. Σε αυτή την διατριβή δείχνουμε ότι οι μύες που στερούνται την έκφραση της πρωτεΐνης Geminin αναπτύσσουν σημαντικά υψηλότερο αριθμό όγκων και φέρουν μεγαλύτερο φορτίο όγκου σε σύγκριση με τους μύες ελέγχου, κατά τη διάρκεια της χημικής καρκινογένεσης. Πιο συγκεκριμένα, κατά τη διάρκεια της πνευμονικής καρκινογένεσης όλοι οι μύες υποβλήθηκαν σε ενέσεις ουρεθάνης ενώ για την επαγωγή της καρκινογένεσης του παχέως εντέρου, οι μύες υποβλήθηκαν στα χημικά AOM και DSS. Η επιβίωση μειώνεται επίσης σημαντικά σε μύες που δεν εκφράζουν Geminin κατά τη διάρκεια της πνευμονικής καρκινογένεσης. Στατιστικά σημαντική αύξηση του συνολικού αριθμού και του βαθμού των αλλοιώσεων (υπερπλασίες, αδενώματα και καρκινώματα) παρατηρήθηκε μετά από χρώση με αιματοξυλίνη-ηωσίνη. Επιπλέον, ανιχνεύθηκε αυξημένη γονιδιωματική αστάθεια, μέσω αυξημένης έκφρασης των πρωτεϊνών ATR και γΗ2ΑΧ. Στη συνέχεια, αναλύσαμε περαιτέρω την έκφραση της Geminin στον καρκίνο του ανθρώπινου παχέως εντέρου και βρήκαμε αυξημένη έκφραση, καθώς και μια θετική συσχέτιση με τα επίπεδα ΑΤΜ/ATR και μια μη-μονοτονική συσχέτιση με τα επίπεδα της γΗ2ΑΧ. Τα δεδομένα αυτά υποστηρίζουν έναν ογκοκατασταλτικό ρόλο για την Geminin, που δρα προστατεύοντας τη σταθερότητα του γονιδιώματος, ενώ ταυτόχρονα η υπερέκφραση της σχετίζεται επίσης με τη γονιδιωματική αστάθεια. Επιπλέον, προκειμένου να εκτιμηθεί ο ρόλος της Cdt1 στην καρκινογένεση in vivo, δημιουργήσαμε ποντίκια που υπερεκφράζουν υπό όρους το γονίδιο Cdt1. |
| author2 |
Ταραβήρας, Σταύρος |
| author_facet |
Ταραβήρας, Σταύρος Χαμπέρης-Τσανίρας, Σπυρίδων |
| format |
Thesis |
| author |
Χαμπέρης-Τσανίρας, Σπυρίδων |
| author_sort |
Χαμπέρης-Τσανίρας, Σπυρίδων |
| title |
Διερεύνηση των παραγόντων αδειοδότησης της αντιγραφής CDT1 ΚΑΙ Geminin στα καρκινικά βλαστικά κύτταρα και την καρκινογένεση |
| title_short |
Διερεύνηση των παραγόντων αδειοδότησης της αντιγραφής CDT1 ΚΑΙ Geminin στα καρκινικά βλαστικά κύτταρα και την καρκινογένεση |
| title_full |
Διερεύνηση των παραγόντων αδειοδότησης της αντιγραφής CDT1 ΚΑΙ Geminin στα καρκινικά βλαστικά κύτταρα και την καρκινογένεση |
| title_fullStr |
Διερεύνηση των παραγόντων αδειοδότησης της αντιγραφής CDT1 ΚΑΙ Geminin στα καρκινικά βλαστικά κύτταρα και την καρκινογένεση |
| title_full_unstemmed |
Διερεύνηση των παραγόντων αδειοδότησης της αντιγραφής CDT1 ΚΑΙ Geminin στα καρκινικά βλαστικά κύτταρα και την καρκινογένεση |
| title_sort |
διερεύνηση των παραγόντων αδειοδότησης της αντιγραφής cdt1 και geminin στα καρκινικά βλαστικά κύτταρα και την καρκινογένεση |
| publishDate |
2018 |
| url |
http://hdl.handle.net/10889/11038 |
| work_keys_str_mv |
AT champerēstsanirasspyridōn diereunēsētōnparagontōnadeiodotēsēstēsantigraphēscdt1kaigemininstakarkinikablastikakyttarakaitēnkarkinogenesē AT champerēstsanirasspyridōn assessingtheroleoflicensingfactorscdt1andgemininincarcinogenesisandcancerstemcells |
| _version_ |
1771297287985692672 |
| spelling |
nemertes-10889-110382022-09-05T20:52:59Z Διερεύνηση των παραγόντων αδειοδότησης της αντιγραφής CDT1 ΚΑΙ Geminin στα καρκινικά βλαστικά κύτταρα και την καρκινογένεση Assessing the role of licensing factors, CDT1 and Geminin, in carcinogenesis and cancer stem cells Χαμπέρης-Τσανίρας, Σπυρίδων Ταραβήρας, Σταύρος Ταραβήρας, Σταύρος Λυγερού, Ζωή Γεωργάτος, Σπυρίδων Μπράβου, Βασιλική Σταθόπουλος, Γεώργιος Αδαμαντία, Μητσάκου Ζαρκάδης, Ιωάννης Champeris Tsaniras, Spyridon Γονιδιωματική αστάθεια Genomic instability Geminin Cdt1 H2AX ATM ATR 616.994 07 Η Geminin, ένας αναστολέας της αδειοδότησης της αντιγραφής του DNA, μαζί με την αλληλεπιδρούσα πρωτεΐνη Cdt1, εξασφαλίζουν την σωστή αντιγραφή του DNA στα σπονδυλωτά. Αρκετές μελέτες έχουν δείξει ότι η υπερέκφραση της Cdt1 ή η απαλοιφή της Geminin in vitro οδηγεί σε επαναντιγραφή και βλάβες στο DNA, ενώ αυξημένη έκφραση της Geminin έχει παρατηρηθεί σε διάφορους καρκίνους στον άνθρωπο. Προκειμένου να εξετάσουμε το ρόλο της Geminin in vivo, αποσιωποιήσαμε το γονίδιο της Geminin στο παχύ έντερο και τον πνεύμονα των μυών και προκαλέσαμε χημική καρκινογένεση. Σε αυτή την διατριβή δείχνουμε ότι οι μύες που στερούνται την έκφραση της πρωτεΐνης Geminin αναπτύσσουν σημαντικά υψηλότερο αριθμό όγκων και φέρουν μεγαλύτερο φορτίο όγκου σε σύγκριση με τους μύες ελέγχου, κατά τη διάρκεια της χημικής καρκινογένεσης. Πιο συγκεκριμένα, κατά τη διάρκεια της πνευμονικής καρκινογένεσης όλοι οι μύες υποβλήθηκαν σε ενέσεις ουρεθάνης ενώ για την επαγωγή της καρκινογένεσης του παχέως εντέρου, οι μύες υποβλήθηκαν στα χημικά AOM και DSS. Η επιβίωση μειώνεται επίσης σημαντικά σε μύες που δεν εκφράζουν Geminin κατά τη διάρκεια της πνευμονικής καρκινογένεσης. Στατιστικά σημαντική αύξηση του συνολικού αριθμού και του βαθμού των αλλοιώσεων (υπερπλασίες, αδενώματα και καρκινώματα) παρατηρήθηκε μετά από χρώση με αιματοξυλίνη-ηωσίνη. Επιπλέον, ανιχνεύθηκε αυξημένη γονιδιωματική αστάθεια, μέσω αυξημένης έκφρασης των πρωτεϊνών ATR και γΗ2ΑΧ. Στη συνέχεια, αναλύσαμε περαιτέρω την έκφραση της Geminin στον καρκίνο του ανθρώπινου παχέως εντέρου και βρήκαμε αυξημένη έκφραση, καθώς και μια θετική συσχέτιση με τα επίπεδα ΑΤΜ/ATR και μια μη-μονοτονική συσχέτιση με τα επίπεδα της γΗ2ΑΧ. Τα δεδομένα αυτά υποστηρίζουν έναν ογκοκατασταλτικό ρόλο για την Geminin, που δρα προστατεύοντας τη σταθερότητα του γονιδιώματος, ενώ ταυτόχρονα η υπερέκφραση της σχετίζεται επίσης με τη γονιδιωματική αστάθεια. Επιπλέον, προκειμένου να εκτιμηθεί ο ρόλος της Cdt1 στην καρκινογένεση in vivo, δημιουργήσαμε ποντίκια που υπερεκφράζουν υπό όρους το γονίδιο Cdt1. Geminin, a DNA replication licensing inhibitor, together with its interacting partner Cdt1, ensure faithful DNA replication in vertebrates. Several studies have shown that Cdt1 overexpression or Geminin depletion in vitro results in rereplication and DNA damage, while increased expression of Geminin has been observed in human cancers. In order to examine its role in vivo, we conditionally inactivated Geminin in the murine colon and lung and assessed chemically induced carcinogenesis. We show here that mice lacking Geminin develop a significantly higher number of tumors and bear a larger tumor burden compared to sham-treated controls, in urethane-induced lung and AOM/DSS-induced colon carcinogenesis. Survival is also significantly reduced in mice lacking Geminin during lung carcinogenesis. A significant increase in the total number and grade of lesions (hyperplasias, adenomas and carcinomas) was also confirmed by H&E. Moreover, increased genomic instability, identified by increased ATR and γH2AX expression, was detected through immunohistochemistry analysis. In addition, we further analysed Geminin expression in human colon cancer and found increased expression, as well as positive correlation with ATM/ATR levels and a non-monotonic association with γH2AX. As a result, our data demonstrate that Geminin acts as a tumor suppressor by safeguarding genome stability, while its overexpression is also associated with genomic instability. Furthermore, in order to assess Cdt1's role in tumorigenesis in vivo, we generated mice conditionally overexpressing the Cdt1 gene. 2018-02-15T10:42:40Z 2018-02-15T10:42:40Z 2017-12-15 Thesis http://hdl.handle.net/10889/11038 gr Η ΒΚΠ διαθέτει αντίτυπο της διατριβής σε έντυπη μορφή στο βιβλιοστάσιο διδακτορικών διατριβών που βρίσκεται στο ισόγειο του κτιρίου της. 12 application/pdf |
