Υπερέκφραση, καθαρισμός και εύρεση αναστολέων της αναγωγάσης της θειορεδοξίνης
Το φυσιολογικό περιβάλλον του κυτοσολίου είναι αναγωγικό από την δράση αντιοξειδωτικών συστημάτων όπως αυτά των θειορεδοξινών και γλουταρεδοξινών. Στο σύστημα των θειορεδοξινών, ηλεκτρόνια μεταφέρονται από το NADPH στην αναγωγάση της θειορεδοξίνης (TrxR), στη θειορεδοξίνη (Trx) και από εκεί σε άλλα...
| Κύριος συγγραφέας: | |
|---|---|
| Άλλοι συγγραφείς: | |
| Μορφή: | Thesis |
| Γλώσσα: | Greek |
| Έκδοση: |
2018
|
| Θέματα: | |
| Διαθέσιμο Online: | http://hdl.handle.net/10889/11135 |
| id |
nemertes-10889-11135 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
nemertes-10889-111352022-09-05T20:18:43Z Υπερέκφραση, καθαρισμός και εύρεση αναστολέων της αναγωγάσης της θειορεδοξίνης Overexpression, purification and quest for inhibitors of thioredoxin reductase Παπαδημητρίου, Σταυρούλα Βλάµης, Αλέξιος Λάμαρη, Φωτεινή Σπυρούλιας, Γεώργιος Papademetriou, Stavroula Αναγωγάση θειορεδοξίνης Ενζυμική αναστολή Θειορεδοξίνη Thioredoxin reductase Enzymatic inhibition Thioredoxin 612.015 75 Το φυσιολογικό περιβάλλον του κυτοσολίου είναι αναγωγικό από την δράση αντιοξειδωτικών συστημάτων όπως αυτά των θειορεδοξινών και γλουταρεδοξινών. Στο σύστημα των θειορεδοξινών, ηλεκτρόνια μεταφέρονται από το NADPH στην αναγωγάση της θειορεδοξίνης (TrxR), στη θειορεδοξίνη (Trx) και από εκεί σε άλλα υποστρώματα, όπως στην αναγωγάση σουλφοξειδίων μεθειονίνης, στην αναγωγάση των ριβονουκλεοτιδίων, στην αναγωγάση του 3’ φωσφοαδενόσινο 5΄φωσφοθειικού κ.α. To σύστημα των θειορεδοξινών διαφοροποιείται στα θηλαστικά, έντομα και βακτήρια καθότι η κοινή συνιστώσα TrxR έχει διαφορετική εξειδίκευση υποστρώματος. Το φαινόμενο αυτό εξηγείται από διαφορές των ενζύμων στο μέγεθος, την ακολουθία ενεργού κέντρου και την διαφασική επιφάνεια επαφής (η TrxR είναι διμερές ένζυμο). Στην παρούσα εργασία έγινε υπερέκφραση και καθαρισμός ανασυνδιασμένων TrxR και Trx από βακτήρια (Escherichia coli), μύκητες (Saccharomyces cerevisiae) και έντομα (Drosophila melanogaster) και εξετάστηκε η αναστολή τους από εκχυλίσματα ελαιολάδου και αρωματικών φυτών καθώς και από απομονωμένες ουσίες φυτικής προελεύσεως. Αποτέλεσμα: ανακαλύφθηκαν παρασκευάσματα με επιλεκτική αναστολή για τις διαφορετικού τύπου TrxR. The natural environment of the cytosol is reducing by the action of antioxidant systems such as the thioredoxin and glutaredoxin systems. In the thioredoxin system, electrons are sequentially transferred from NADPH to thioredoxin reductase (TrxR), to thioredoxin (Trx) and from there to other targets such as methionine sulfoxide reductase, ribonucleotide reductase, 3'-phosphoadenosine-5'-phosphosulfate reductase etc. The reducing pathway of the thioredoxin system differentiates at the point of TrxRs which may have quite altered specificities among the known domains of living organisms. This is explained in view of differences in size, sequence of the active site and contact domains between the two subunits of the enzyme (TrxR are homodimeric molecules). The purpose of this study was the overexpression and purification of recombinant TrxRs and Trxs from bacteria, fungi and insects and the quest for specific inhibitors. Result: Specific inhibitors were identified for each category of TrxRs. 2018-03-02T12:31:05Z 2018-03-02T12:31:05Z 2017-02 Thesis http://hdl.handle.net/10889/11135 gr 12 application/pdf |
| institution |
UPatras |
| collection |
Nemertes |
| language |
Greek |
| topic |
Αναγωγάση θειορεδοξίνης Ενζυμική αναστολή Θειορεδοξίνη Thioredoxin reductase Enzymatic inhibition Thioredoxin 612.015 75 |
| spellingShingle |
Αναγωγάση θειορεδοξίνης Ενζυμική αναστολή Θειορεδοξίνη Thioredoxin reductase Enzymatic inhibition Thioredoxin 612.015 75 Παπαδημητρίου, Σταυρούλα Υπερέκφραση, καθαρισμός και εύρεση αναστολέων της αναγωγάσης της θειορεδοξίνης |
| description |
Το φυσιολογικό περιβάλλον του κυτοσολίου είναι αναγωγικό από την δράση αντιοξειδωτικών συστημάτων όπως αυτά των θειορεδοξινών και γλουταρεδοξινών. Στο σύστημα των θειορεδοξινών, ηλεκτρόνια μεταφέρονται από το NADPH στην αναγωγάση της θειορεδοξίνης (TrxR), στη θειορεδοξίνη (Trx) και από εκεί σε άλλα υποστρώματα, όπως στην αναγωγάση σουλφοξειδίων μεθειονίνης, στην αναγωγάση των ριβονουκλεοτιδίων, στην αναγωγάση του 3’ φωσφοαδενόσινο 5΄φωσφοθειικού κ.α. To σύστημα των θειορεδοξινών διαφοροποιείται στα θηλαστικά, έντομα και βακτήρια καθότι η κοινή συνιστώσα TrxR έχει διαφορετική εξειδίκευση υποστρώματος. Το φαινόμενο αυτό εξηγείται από διαφορές των ενζύμων στο μέγεθος, την ακολουθία ενεργού κέντρου και την διαφασική επιφάνεια επαφής (η TrxR είναι διμερές ένζυμο).
Στην παρούσα εργασία έγινε υπερέκφραση και καθαρισμός ανασυνδιασμένων TrxR και Trx από βακτήρια (Escherichia coli), μύκητες (Saccharomyces cerevisiae) και έντομα (Drosophila melanogaster) και εξετάστηκε η αναστολή τους από εκχυλίσματα ελαιολάδου και αρωματικών φυτών καθώς και από απομονωμένες ουσίες φυτικής προελεύσεως.
Αποτέλεσμα: ανακαλύφθηκαν παρασκευάσματα με επιλεκτική αναστολή για τις διαφορετικού τύπου TrxR. |
| author2 |
Βλάµης, Αλέξιος |
| author_facet |
Βλάµης, Αλέξιος Παπαδημητρίου, Σταυρούλα |
| format |
Thesis |
| author |
Παπαδημητρίου, Σταυρούλα |
| author_sort |
Παπαδημητρίου, Σταυρούλα |
| title |
Υπερέκφραση, καθαρισμός και εύρεση αναστολέων της αναγωγάσης της θειορεδοξίνης |
| title_short |
Υπερέκφραση, καθαρισμός και εύρεση αναστολέων της αναγωγάσης της θειορεδοξίνης |
| title_full |
Υπερέκφραση, καθαρισμός και εύρεση αναστολέων της αναγωγάσης της θειορεδοξίνης |
| title_fullStr |
Υπερέκφραση, καθαρισμός και εύρεση αναστολέων της αναγωγάσης της θειορεδοξίνης |
| title_full_unstemmed |
Υπερέκφραση, καθαρισμός και εύρεση αναστολέων της αναγωγάσης της θειορεδοξίνης |
| title_sort |
υπερέκφραση, καθαρισμός και εύρεση αναστολέων της αναγωγάσης της θειορεδοξίνης |
| publishDate |
2018 |
| url |
http://hdl.handle.net/10889/11135 |
| work_keys_str_mv |
AT papadēmētrioustauroula yperekphrasēkatharismoskaieuresēanastoleōntēsanagōgasēstēstheioredoxinēs AT papadēmētrioustauroula overexpressionpurificationandquestforinhibitorsofthioredoxinreductase |
| _version_ |
1771297351007207424 |
