Μελέτη του ρόλου της σεργλυκίνης σε καρκινικά κύτταρα μαστού
Ο καρκίνος του μαστού είναι μια πολύ συχνή κακοήθεια στις γυναίκες. Το σηματοδοτικό μονοπάτι της 17β-εστραδιόλης (E2) / οιστρογονουποδοχέα α (ERα) είναι ένα από τα σημαντικότερα μονοπάτια στον καρκίνο του μαστού δεδομένου ότι περίπου το 70% αυτών των κακοηθειών ανιχνεύονται ως ERα θετικοί. Το επι...
| Κύριος συγγραφέας: | |
|---|---|
| Άλλοι συγγραφείς: | |
| Μορφή: | Thesis |
| Γλώσσα: | Greek |
| Έκδοση: |
2018
|
| Θέματα: | |
| Διαθέσιμο Online: | http://hdl.handle.net/10889/11142 |
| id |
nemertes-10889-11142 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| institution |
UPatras |
| collection |
Nemertes |
| language |
Greek |
| topic |
Καρκίνος του μαστού Οιστρογονουποδοχέας α Σεργλυκίνη Εξωκυττάριος χώρος Μετάβαση επιθηλίου-μεσεγχύματος Χημειοκίνες Ιντερλευκίνες Breast cancer Estrogen receptor α Serglycin Extracellular matrix Epithelial-mesenchymal transition Chemokines Interleukins 616.994 490 71 |
| spellingShingle |
Καρκίνος του μαστού Οιστρογονουποδοχέας α Σεργλυκίνη Εξωκυττάριος χώρος Μετάβαση επιθηλίου-μεσεγχύματος Χημειοκίνες Ιντερλευκίνες Breast cancer Estrogen receptor α Serglycin Extracellular matrix Epithelial-mesenchymal transition Chemokines Interleukins 616.994 490 71 Κολοκοτρώνη, Ανθή Μελέτη του ρόλου της σεργλυκίνης σε καρκινικά κύτταρα μαστού |
| description |
Ο καρκίνος του μαστού είναι μια πολύ συχνή κακοήθεια στις γυναίκες. Το σηματοδοτικό
μονοπάτι της 17β-εστραδιόλης (E2) / οιστρογονουποδοχέα α (ERα) είναι ένα από τα
σημαντικότερα μονοπάτια στον καρκίνο του μαστού δεδομένου ότι περίπου το 70% αυτών
των κακοηθειών ανιχνεύονται ως ERα θετικοί. Το επιστημονικό ενδιαφέρον της μελέτης του
ERα έγκειται στο γεγονός ότι η σηματοδότηση του προωθεί την ανάπτυξη του πρώιμου
καρκίνου όμως μπορεί να λειτουργήσει και ανταγωνιστικά προς σηματοδοτικά μονοπάτια
που οδηγούν σε μετάπτωση επιθηλίου-μεσεγχύματος (ΕΜΤ). Μεγάλη σημασία στην εξέλιξη
του όγκου του μαστού παίζει το μικροπεριβάλλον των καρκινικών κυττάρων όπου η μη
φυσιολογική διαμόρφωση και λειτουργία του ECM, που οφείλεται και στην μη φυσιολογική
έκφραση και συσσώρευση σημαντικών μορίων όπως είναι οι πρωτεογλυκάνες (PGs), προάγει
τον κυτταρικό μετασχηματισμό, τη μετάσταση και τη διείσδυση. Η σεργλυκίνη είναι
ενδοκυττάρια πρωτεογλυκάνη με 17 kDa πρωτεϊνικό κορμό με περιοχή πλούσια σε
επαναλήψεις σερίνης/γλυκίνης που χρησιμεύουν ως θέσεις δέσμευσης των
γλυκοζαμινογλυκανικών αλυσίδων (GAG). Όλα τα φλεγμονώδη κύτταρα εκφράζουν
σημαντικά την σεργλυκίνη και την αποθηκεύουν σε κοκκία όπου αλληλεπιδρά με
φλεγμονώδεις μεσολαβητές, όπως πρωτεάσες, χημειοκίνες και αυξητικούς παράγοντες
επιδρώντας στη βιοδιαθεσιμότητα τους καθώς και στη μεταγωγή σήματος. Έχει δειχθεί ότι η
σεργλυκίνη εκφράζεται σε καρκινικά κύτταρα μαστού προωθώντας τον επιθετικό τους
φαινότυπο. Στόχος της παρούσας εργασίας ήταν να κατανοηθεί εάν και πώς η σεργλυκίνη
συμβάλει σε σημαντικές κυτταρικές λειτουργίες και στην έκφραση εξωκυττάριων μορίων.
Επίσης αξιολογήθηκε η επίδραση της σεργλυκίνης στην κυτταρική σηματοδότηση και
διερευνήθηκε η επίδρασή της στην χημειοανθεκτικότητα των καρκινικών κυττάρων. Γι’ αυτό
το λόγο, δημιουργήθηκαν στο εργαστήριο σταθερά διαμολυσμένα MCF-7 καρκινικά κύτταρα
μαστού τα οποία υπερεκφράζουν σεργλυκίνη (MCF-7VSG) όπως επίσης προκλήθηκε
καταστολή της έκφρασης της σεργλυκίνης (SP10+SGsh) σε καρκινικά κύτταρα μαστού στα
οποία είχε προηγηθεί καταστολή του γονιδίου του ERα (SP10+). Τα δεδομένα της έρευνας
μας έδειξαν ότι η υπερέκφραση της σεργλυκίνης ενισχύει την ικανότητα των MCF-7VSG
κυττάρων να πολλαπλασιάζονται, να μεταναστεύουν και να διεισδύουν σε σύγκριση με τα
κύτταρα αναφοράς MCF-7V, ενώ η καταστολή της σεργλυκίνης προκαλεί τα αντίθετα
αποτελέσματα στην μετανάστευση αλλά όχι στον πολλαπλασιασμό στα SP10+SGsh κύτταρα.
Επίσης δείχθηκε αυξημένη έκφραση των μεσεγχυματικών δεικτών και μείωση των
επιθηλιακών, στα MCF-7VSG κύτταρα. Επιπλέον, τα MCF-7VSG κύτταρα εμφανίζουν
x
αυξημένη έκφραση των εξωκυττάριων μεταλλοπρωτεινασών (MMPs) και των ιντερλευκινών
συγκριτικά με τα κύτταρα αναφοράς, ενώ η έκφραση αυτών των μορίων στα SP10+SGsh
κύτταρα είναι μειωμένη σε σύγκριση με τα SP10+. Επίσης, χρησιμοποιώντας συγκεκριμένους
ενδοκυττάριους αναστολείς αποδεικνύεται ότι σηματοδοτικά μονοπάτια όπως αυτά των IL-8
/CXCR2 και PI3K εμπλέκονται στην επιθετικότητα των καρκινικών κυττάρων μαστού που
υπερεκφράζουν την σεργλυκίνη. Τέλος, η υπερέκφραση της σεργλυκίνης προσδίδει
ανθεκτικότητα στα καρκινικά κύτταρα έναντι των χημειοθεραπευτικών φαρμάκων.
Συμπερασματικά, αυτή η μελέτη δείχνει ότι η σεργλυκίνη προωθεί έναν πιο επιθετικό
φαινότυπο σε καρκινικά κύτταρα μαστού, ενεργώντας ως ογκογόνος παράγοντας,
υποστηρίζοντας την επιβίωση και την επέκτασή τους. |
| author2 |
Θεοχάρης, Αχιλλέας |
| author_facet |
Θεοχάρης, Αχιλλέας Κολοκοτρώνη, Ανθή |
| format |
Thesis |
| author |
Κολοκοτρώνη, Ανθή |
| author_sort |
Κολοκοτρώνη, Ανθή |
| title |
Μελέτη του ρόλου της σεργλυκίνης σε καρκινικά κύτταρα μαστού |
| title_short |
Μελέτη του ρόλου της σεργλυκίνης σε καρκινικά κύτταρα μαστού |
| title_full |
Μελέτη του ρόλου της σεργλυκίνης σε καρκινικά κύτταρα μαστού |
| title_fullStr |
Μελέτη του ρόλου της σεργλυκίνης σε καρκινικά κύτταρα μαστού |
| title_full_unstemmed |
Μελέτη του ρόλου της σεργλυκίνης σε καρκινικά κύτταρα μαστού |
| title_sort |
μελέτη του ρόλου της σεργλυκίνης σε καρκινικά κύτταρα μαστού |
| publishDate |
2018 |
| url |
http://hdl.handle.net/10889/11142 |
| work_keys_str_mv |
AT kolokotrōnēanthē meletētouroloutēsserglykinēssekarkinikakyttaramastou AT kolokotrōnēanthē studyoftheroleofserglysininbreastcancercells |
| _version_ |
1771297347441000448 |
| spelling |
nemertes-10889-111422022-09-05T20:14:33Z Μελέτη του ρόλου της σεργλυκίνης σε καρκινικά κύτταρα μαστού Study of the role of serglysin in breast cancer cells Κολοκοτρώνη, Ανθή Θεοχάρης, Αχιλλέας Αλετράς, Αλέξιος Θεοχάρης, Αχιλλέας Σκανδάλης, Σπυρίδων Kolokotroni, Anthi Καρκίνος του μαστού Οιστρογονουποδοχέας α Σεργλυκίνη Εξωκυττάριος χώρος Μετάβαση επιθηλίου-μεσεγχύματος Χημειοκίνες Ιντερλευκίνες Breast cancer Estrogen receptor α Serglycin Extracellular matrix Epithelial-mesenchymal transition Chemokines Interleukins 616.994 490 71 Ο καρκίνος του μαστού είναι μια πολύ συχνή κακοήθεια στις γυναίκες. Το σηματοδοτικό μονοπάτι της 17β-εστραδιόλης (E2) / οιστρογονουποδοχέα α (ERα) είναι ένα από τα σημαντικότερα μονοπάτια στον καρκίνο του μαστού δεδομένου ότι περίπου το 70% αυτών των κακοηθειών ανιχνεύονται ως ERα θετικοί. Το επιστημονικό ενδιαφέρον της μελέτης του ERα έγκειται στο γεγονός ότι η σηματοδότηση του προωθεί την ανάπτυξη του πρώιμου καρκίνου όμως μπορεί να λειτουργήσει και ανταγωνιστικά προς σηματοδοτικά μονοπάτια που οδηγούν σε μετάπτωση επιθηλίου-μεσεγχύματος (ΕΜΤ). Μεγάλη σημασία στην εξέλιξη του όγκου του μαστού παίζει το μικροπεριβάλλον των καρκινικών κυττάρων όπου η μη φυσιολογική διαμόρφωση και λειτουργία του ECM, που οφείλεται και στην μη φυσιολογική έκφραση και συσσώρευση σημαντικών μορίων όπως είναι οι πρωτεογλυκάνες (PGs), προάγει τον κυτταρικό μετασχηματισμό, τη μετάσταση και τη διείσδυση. Η σεργλυκίνη είναι ενδοκυττάρια πρωτεογλυκάνη με 17 kDa πρωτεϊνικό κορμό με περιοχή πλούσια σε επαναλήψεις σερίνης/γλυκίνης που χρησιμεύουν ως θέσεις δέσμευσης των γλυκοζαμινογλυκανικών αλυσίδων (GAG). Όλα τα φλεγμονώδη κύτταρα εκφράζουν σημαντικά την σεργλυκίνη και την αποθηκεύουν σε κοκκία όπου αλληλεπιδρά με φλεγμονώδεις μεσολαβητές, όπως πρωτεάσες, χημειοκίνες και αυξητικούς παράγοντες επιδρώντας στη βιοδιαθεσιμότητα τους καθώς και στη μεταγωγή σήματος. Έχει δειχθεί ότι η σεργλυκίνη εκφράζεται σε καρκινικά κύτταρα μαστού προωθώντας τον επιθετικό τους φαινότυπο. Στόχος της παρούσας εργασίας ήταν να κατανοηθεί εάν και πώς η σεργλυκίνη συμβάλει σε σημαντικές κυτταρικές λειτουργίες και στην έκφραση εξωκυττάριων μορίων. Επίσης αξιολογήθηκε η επίδραση της σεργλυκίνης στην κυτταρική σηματοδότηση και διερευνήθηκε η επίδρασή της στην χημειοανθεκτικότητα των καρκινικών κυττάρων. Γι’ αυτό το λόγο, δημιουργήθηκαν στο εργαστήριο σταθερά διαμολυσμένα MCF-7 καρκινικά κύτταρα μαστού τα οποία υπερεκφράζουν σεργλυκίνη (MCF-7VSG) όπως επίσης προκλήθηκε καταστολή της έκφρασης της σεργλυκίνης (SP10+SGsh) σε καρκινικά κύτταρα μαστού στα οποία είχε προηγηθεί καταστολή του γονιδίου του ERα (SP10+). Τα δεδομένα της έρευνας μας έδειξαν ότι η υπερέκφραση της σεργλυκίνης ενισχύει την ικανότητα των MCF-7VSG κυττάρων να πολλαπλασιάζονται, να μεταναστεύουν και να διεισδύουν σε σύγκριση με τα κύτταρα αναφοράς MCF-7V, ενώ η καταστολή της σεργλυκίνης προκαλεί τα αντίθετα αποτελέσματα στην μετανάστευση αλλά όχι στον πολλαπλασιασμό στα SP10+SGsh κύτταρα. Επίσης δείχθηκε αυξημένη έκφραση των μεσεγχυματικών δεικτών και μείωση των επιθηλιακών, στα MCF-7VSG κύτταρα. Επιπλέον, τα MCF-7VSG κύτταρα εμφανίζουν x αυξημένη έκφραση των εξωκυττάριων μεταλλοπρωτεινασών (MMPs) και των ιντερλευκινών συγκριτικά με τα κύτταρα αναφοράς, ενώ η έκφραση αυτών των μορίων στα SP10+SGsh κύτταρα είναι μειωμένη σε σύγκριση με τα SP10+. Επίσης, χρησιμοποιώντας συγκεκριμένους ενδοκυττάριους αναστολείς αποδεικνύεται ότι σηματοδοτικά μονοπάτια όπως αυτά των IL-8 /CXCR2 και PI3K εμπλέκονται στην επιθετικότητα των καρκινικών κυττάρων μαστού που υπερεκφράζουν την σεργλυκίνη. Τέλος, η υπερέκφραση της σεργλυκίνης προσδίδει ανθεκτικότητα στα καρκινικά κύτταρα έναντι των χημειοθεραπευτικών φαρμάκων. Συμπερασματικά, αυτή η μελέτη δείχνει ότι η σεργλυκίνη προωθεί έναν πιο επιθετικό φαινότυπο σε καρκινικά κύτταρα μαστού, ενεργώντας ως ογκογόνος παράγοντας, υποστηρίζοντας την επιβίωση και την επέκτασή τους. Cancer and heart diseases are the main causes of death in humans in the developed countries. Breast cancer is the most common type diagnosed in women. It is influenced by both environmental and genetic factors. It is caused by uncontrolled proliferation of abnormal cells in the tissues of the body, which consequently cause the formation of malignant tumor in the breast area. The signal pathway of 17b-estradiol (E2) / and oistrogen receptor a (ERa) is one of the major pathways in human breast cancer given the fact that about 70% of breast cancers are detected as ERa positive. The ERa plays an important role in growth, development and treatment of cancer. The scientific interest of ERa’s study is that the signaling promotes growth of early cancer, but it can operate competitively with signaling pathways which lead to epithelial-mesenchymal transition (EMT). The microenvironment of the tumor plays a significant role in the development of breast cancer as the abnormal configuration and operation of the ECM, which is due to abnormal expression and accumulation of significant molecules such as proteoglycans (PGs), promotes cell transformation, metastasis, and infiltration. Serglycin is an intracellular proteoglycan (PG) with a 17 kDa core protein containing a characteristic domain rich in serine/glycine repeats, which serves as the attachment site for up to eight glycosaminoglycan (GAG) chains. All inflammatory cells highly synthesize serglycin and store it in granules, where it interacts with numerous inflammatory mediators, such as proteases, chemokines, cytokines, and growth factors, affecting their bioavailability as well as signal transduction. Serglycin is expressed by hematopoietic cells, and recent studies report that it is highly expressed by tumor cells, including breast cancer cells, promoting their aggressive phenotype, conferring resistance against drugs and complement system attack. The aim of this study was to understand if and how serglycin contributes in crucial cell functions and on the expression of extracellular matrix molecules, as well as to evaluate the connection between serglycin and various signaling pathways, and finally to investigate the effect of serglycin’s overexpression on the resistance against common anticancer drugs. For this reason, we created in the laboratory stably transfected MCF-7 breast cancer cells overexpressing serglycin (MCF-7VSG) as well as we have suppressed the expression levels of serglycin (SP10+SGsh) in ERα silenced MCF- 7 breast cancer cells (SP10+). Our data showed that the overexpression of serglycin enhances the ability of MCF-7VSG cells to proliferate, migrate and invade, while the suppression of serglycin causes the opposite effects in SP10+SGsh cells. EMT study showed increased expression of mesenchymal markers besides with decreased expression of epithelial marker, xii E-cadherin. Moreover, MCF-7VSG cells exhibited elevated expression of MMPs and interleukins comparatively with MCF-7V cells, while the expression of those molecules in SP10+SGsh cells is significantly reduced instead of SP10+ cells. Furthermore, using specific intracellular inhibitors in MCF-7V and MCF-7VSG, we demonstrated that the signaling pathways as IL-8/CXCR2, PI3K and Src are implicated in breast cancer cell aggressiveness. Finally, the overexpression of serglycin imparts resistance against commercially available anticancer treatment. Conclusively, this study suggests that serglycin promotes a more aggressive phenotype in breast cancer cells, acting as a tumorgenic factor, supporting their survival and expansion. 2018-03-05T06:20:23Z 2018-03-05T06:20:23Z 2017-03-03 Thesis http://hdl.handle.net/10889/11142 gr 12 application/pdf |
