Μελέτη παρασκευής και τοξικότητας σε κυτταρικές σειρές νανοσωματιδίων που προέρχονται από κύτταρα
Στόχος της εργασίας είναι η παρασκευή βιο-εμπνευσμένων νανοσωματιδίων για επιλεκτική-στοχευμένη χορήγηση φαρμάκων και η διερεύνηση της χρήσης των τεχνικών λιποσωμικής τεχνολογίας για την παρασκευή κυστιδίων από κυτταρικό υλικό που θα εγκλωβίζουν φάρμακα (που θα μπορεί σε επόμενη φάση να αντικατασταθ...
| Κύριος συγγραφέας: | |
|---|---|
| Άλλοι συγγραφείς: | |
| Μορφή: | Thesis |
| Γλώσσα: | Greek |
| Έκδοση: |
2018
|
| Θέματα: | |
| Διαθέσιμο Online: | http://hdl.handle.net/10889/11424 |
| id |
nemertes-10889-11424 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
nemertes-10889-114242022-09-05T14:01:15Z Μελέτη παρασκευής και τοξικότητας σε κυτταρικές σειρές νανοσωματιδίων που προέρχονται από κύτταρα Engineered cell vesicles for drug delivery Μπάστα, Αναστασία Αντιμησιάρη, Σοφία Κλεπετσάνης, Παύλος Σωτηροπούλου, Γεωργία Basta, Anastasia Κύτταρα Λιποσώματα Κυστίδια Νανοσωματίδια Cells Liposomes Vesicles Nanoparticles 615.7 Στόχος της εργασίας είναι η παρασκευή βιο-εμπνευσμένων νανοσωματιδίων για επιλεκτική-στοχευμένη χορήγηση φαρμάκων και η διερεύνηση της χρήσης των τεχνικών λιποσωμικής τεχνολογίας για την παρασκευή κυστιδίων από κυτταρικό υλικό που θα εγκλωβίζουν φάρμακα (που θα μπορεί σε επόμενη φάση να αντικατασταθεί από τεχνητά-εξωσώματα). Για το σκοπό αυτό, καλλιεργήθηκαν κυτταρικές σειρές και με τη χρήση των τεχνικών λιποσωμικής τεχνολογίας παρήχθησαν κυτταρικά κυστιδια που εγκλωβιζουν φθορίζουσα ουσία η οποία χρησιμοποιήθηκε ως μοντέλο υδατοδιαλυτού φαρμάκου. Τα engineered vesicles (EVs) χαρακτηρίστηκαν ως προς το μέγεθός τους, το ζ-δυναμικό, τη σταθερότητα και ως προς τηη ικανότητα φόρτωσης και συγκράτησης της εγκλωβισμένης ουσίας παρουσία ή μη πρωτεϊνών ορού. Επιπλέον εκτιμήθηκε και η κυτταροτοξικότητά τους. Όλα τα παραγόμενα σωματίδια αποδείχθηκαν ότι έχουν διαστάσεις στην περιοχή νάνο (μερικών εκτοντάδων νανομέτρων), και ότι μπορούν να εγκλωβίζουν και να συγκρατούν καλά την εγκλωβισμένη ουσία – ιδιαίτερα παρουσία πρωτεϊνών ορού-. Επιπλέον, δεν παρουσιάζουν κυτταροτοξικότητα, γεγονός που με πρώτη εκτίμηση τα καθιστά υποσχόμενα οχήματα μεταφοράς ουσιών (για χορήγηση φαρμάκων –drug delivery). Είναι λοιπόν ενδιαφέρον να συνεχιστεί η έρευνα προς την κατέυθυνση της εκτίμησης των δυνατοτοτήτων παρασκευής κυστιδίων για ενεργητική στόχευση φαρμάκων, σε επόμενο στάδιο. Engineered cell vesicles (CVs) (encapsulating FITC-dextran or Calcein as an aqueous space probe), were prepared following isolation of Human Embryonic Kidney (HEK) cells and B16 melanoma cells. The cell material was engineered to prepare vesicles of nanosize which encapsulate a fluorescent aqueous compartment probe, such as FITC-dextran or calcein, by applying a number of consecutive freeze- thawing cycles. The CVs produced were characterized for their size distribution and surface charge by DLS, and for their content by measuring Fluorescent Intensity (FI). The lipid concentration was measured by the Stewart assay. Calcein integrity of HEK and B16 CVs in absence and presence of serum proteins was evaluated, as a method to evaluate their applicability for Drug Delivery applications, by measuring the latency of entrapped calcein during incubation in buffer or FCS at 370C, for 24h. Finally, the cytotoxicity of the two CV-types towards B16 and HEK cells after 4h of incubation of 200 and 400 nmoles of lipid (from each formulation)/106 cells, was measured by the MTT assay. Results: CV mean hydrodynamic diameters were between 200-300nm with negative charge (-15mV). The retention of calcein in EVs, was stable during 8h of incubation in buffer and FCS, however there was a gradual release of the vesicle-entrapped dye between 8 and 24h. Interestingly, there was no difference of CV integrity in buffer and in presence of proteins (FBS). The cytotoxicity results indicated that both CV types are non-toxic towards the cells evaluated. Conclusions: The CVs produced are nano-sized, encapsulate good amounts of calcein and FITC, are non-cytotoxic and are considerably stable in presence of proteins, which prove that such engineered cellular vesicles have potential for drug delivery applications. 2018-07-11T05:10:38Z 2018-07-11T05:10:38Z 2017-06-23 Thesis http://hdl.handle.net/10889/11424 gr 12 application/pdf |
| institution |
UPatras |
| collection |
Nemertes |
| language |
Greek |
| topic |
Κύτταρα Λιποσώματα Κυστίδια Νανοσωματίδια Cells Liposomes Vesicles Nanoparticles 615.7 |
| spellingShingle |
Κύτταρα Λιποσώματα Κυστίδια Νανοσωματίδια Cells Liposomes Vesicles Nanoparticles 615.7 Μπάστα, Αναστασία Μελέτη παρασκευής και τοξικότητας σε κυτταρικές σειρές νανοσωματιδίων που προέρχονται από κύτταρα |
| description |
Στόχος της εργασίας είναι η παρασκευή βιο-εμπνευσμένων νανοσωματιδίων για επιλεκτική-στοχευμένη χορήγηση φαρμάκων και η διερεύνηση της χρήσης των τεχνικών λιποσωμικής τεχνολογίας για την παρασκευή κυστιδίων από κυτταρικό υλικό που θα εγκλωβίζουν φάρμακα (που θα μπορεί σε επόμενη φάση να αντικατασταθεί από τεχνητά-εξωσώματα).
Για το σκοπό αυτό, καλλιεργήθηκαν κυτταρικές σειρές και με τη χρήση των τεχνικών λιποσωμικής τεχνολογίας παρήχθησαν κυτταρικά κυστιδια που εγκλωβιζουν φθορίζουσα ουσία η οποία χρησιμοποιήθηκε ως μοντέλο υδατοδιαλυτού φαρμάκου. Τα engineered vesicles (EVs) χαρακτηρίστηκαν ως προς το μέγεθός τους, το ζ-δυναμικό, τη σταθερότητα και ως προς τηη ικανότητα φόρτωσης και συγκράτησης της εγκλωβισμένης ουσίας παρουσία ή μη πρωτεϊνών ορού. Επιπλέον εκτιμήθηκε και η κυτταροτοξικότητά τους.
Όλα τα παραγόμενα σωματίδια αποδείχθηκαν ότι έχουν διαστάσεις στην περιοχή νάνο (μερικών εκτοντάδων νανομέτρων), και ότι μπορούν να εγκλωβίζουν και να συγκρατούν καλά την εγκλωβισμένη ουσία – ιδιαίτερα παρουσία πρωτεϊνών ορού-. Επιπλέον, δεν παρουσιάζουν κυτταροτοξικότητα, γεγονός που με πρώτη εκτίμηση τα καθιστά υποσχόμενα οχήματα μεταφοράς ουσιών (για χορήγηση φαρμάκων –drug delivery). Είναι λοιπόν ενδιαφέρον να συνεχιστεί η έρευνα προς την κατέυθυνση της εκτίμησης των δυνατοτοτήτων παρασκευής κυστιδίων για ενεργητική στόχευση φαρμάκων, σε επόμενο στάδιο. |
| author2 |
Αντιμησιάρη, Σοφία |
| author_facet |
Αντιμησιάρη, Σοφία Μπάστα, Αναστασία |
| format |
Thesis |
| author |
Μπάστα, Αναστασία |
| author_sort |
Μπάστα, Αναστασία |
| title |
Μελέτη παρασκευής και τοξικότητας σε κυτταρικές σειρές νανοσωματιδίων που προέρχονται από κύτταρα |
| title_short |
Μελέτη παρασκευής και τοξικότητας σε κυτταρικές σειρές νανοσωματιδίων που προέρχονται από κύτταρα |
| title_full |
Μελέτη παρασκευής και τοξικότητας σε κυτταρικές σειρές νανοσωματιδίων που προέρχονται από κύτταρα |
| title_fullStr |
Μελέτη παρασκευής και τοξικότητας σε κυτταρικές σειρές νανοσωματιδίων που προέρχονται από κύτταρα |
| title_full_unstemmed |
Μελέτη παρασκευής και τοξικότητας σε κυτταρικές σειρές νανοσωματιδίων που προέρχονται από κύτταρα |
| title_sort |
μελέτη παρασκευής και τοξικότητας σε κυτταρικές σειρές νανοσωματιδίων που προέρχονται από κύτταρα |
| publishDate |
2018 |
| url |
http://hdl.handle.net/10889/11424 |
| work_keys_str_mv |
AT mpastaanastasia meletēparaskeuēskaitoxikotētassekyttarikesseiresnanosōmatidiōnpouproerchontaiapokyttara AT mpastaanastasia engineeredcellvesiclesfordrugdelivery |
| _version_ |
1771297262749614080 |
