| Περίληψη: | Η Ddx5 ανήκει στην DEAD BOX οικογένεια των RNA ελικασών. Ο ρόλος της στην έναρξη και εξέλιξη του αδενοκαρκινώματος του πνεύμονα δεν έχει διερευνηθεί εκτενώς. Για τον σκοπό αυτό χρησιμοποιήσαμε πληθώρα in vitro και in vivo πειραμάτων. In vitro, εξετάστηκε ο ρυθμός ανάπτυξης σταθερών κλώνων MC38(Αδενοκαρκίνωμα παχέος εντέρου ποντικού) που είχαν διαμολυνθεί με πλασμίδια που εκφράζουν τις πρωτεΐνες Ddx5-GFP και Ddx5 mutant-GFP. Η υπερέκφραση της πρωτεΐνης Ddx5 mutant δρα κατασταλτικά για την λειτουργία της φυσιολογικής. Ο ρυθμός ανάπτυξης των σταθερών κλώνων αξιολογήθηκε με MTT assay και παρατηρήθηκε αυξημένος στον κλώνο που υπερέκφραζε την Ddx5. Σε μια σειρά in vivo πειραμάτων, χορηγήθηκε σε ποντίκια στελέχους FVB το καρκινογόνο του καπνού ουρεθάνη και απομονώθηκαν πνεύμονες ή όγκοι σε διάφορα χρονικά σημεία. Από τα δείγματα αυτά απομονώθηκε πρωτεϊνικό εκχύλισμα και εξετάσθηκαν τα πρότυπα έκφρασης για τρεις πρωτεΐνες(Ddx5, Kras, PCNA) με ανοσοστύπωμα Western. Επιπλέον, σε ποντίκια στελέχους C57BL/6 που επιτρέπουν την ιστοειδική απαλοιφή του γονιδίου της Ddx5 (Ddx5 fl/fl), αποσιωπήθηκε από το πνευμονικό επιθήλιο η Ddx5 από ενδοτραχειακή χορήγηση αδενοϊού που εκφράζει την Cre ρεκομπινάση και ακολούθησε χορήγηση ουρεθάνης. Η επίδραση της παρεμβολής αυτής στην καρκινογένεση του πνεύμονα εξετάστηκε και παρατηρήθηκε στατιστικά σημαντική μείωση στον αριθμό των όγκων που αναπτύχθηκαν στα ποντίκια που δεν εξέφραζαν Ddx5 στο πνευμονικό επιθήλιο. Από τους όγκους που βρέθηκαν, απομονώθηκε DNA για μελέτη μεταλλάξεων και απώλειας του γονιδίου DDX5.
Συνοπτικά, παρατηρήθηκε πως η υπερέκφραση της Ddx5 οδηγεί σε αύξηση του ρυθμού ανάπτυξης των καρκινικών κυττάρων, η οποία σχετίζεται με την δράση ελικάσης. Επιπλέον, σε χημικά-επαγόμενο μοντέλο αδενοκαρκινώματος, η Ddx5 εμφανίζεται αυξημένη τόσο στα αρχικά στάδια της καρκινογένεσης όσο και στους ήδη σχηματισμένους όγκους. Η αποσιώπηση της πρωτεΐνης από το πνευμονικό επιθήλιο οδηγεί σε κάποιες περιπτώσεις στην μη δημιουργία αδενοκαρκινώματος και την καθυστέρηση της βλάβης στο στάδιο της φλεγμονής.
|
|---|
