Μελέτη της ποιότητας μηριαίων οστών μυών με φασματοσκοπία Raman και τεχνικές στοιχειακής και θερμικής ανάλυσης

Στην παρούσα εργασία μελετήθηκε η ποιότητα μηριαίων οστών μυών απουσία του γονιδίου ApoA-1, το οποίο συνδέεται με το μεταβολισμό των λιπιδίων. Χρησιμοποιήθηκε η φασματοσκοπία Raman η οποία είναι μη-καταστροφική αναλυτική τεχνική με δυνατότητα in-vivo εφαρμογής, κατάλληλη για το χημικό χαρακτηρισμό β...

Πλήρης περιγραφή

Λεπτομέρειες βιβλιογραφικής εγγραφής
Κύριος συγγραφέας: Φερτάκη, Στεφανί
Άλλοι συγγραφείς: Όρκουλα, Μαλβίνα
Μορφή: Thesis
Γλώσσα:Greek
Έκδοση: 2018
Θέματα:
Διαθέσιμο Online:http://hdl.handle.net/10889/11553
id nemertes-10889-11553
record_format dspace
institution UPatras
collection Nemertes
language Greek
topic Οστά
Φασματοσκοπία Raman
Bones
Raman spectroscopy
612.751 045
spellingShingle Οστά
Φασματοσκοπία Raman
Bones
Raman spectroscopy
612.751 045
Φερτάκη, Στεφανί
Μελέτη της ποιότητας μηριαίων οστών μυών με φασματοσκοπία Raman και τεχνικές στοιχειακής και θερμικής ανάλυσης
description Στην παρούσα εργασία μελετήθηκε η ποιότητα μηριαίων οστών μυών απουσία του γονιδίου ApoA-1, το οποίο συνδέεται με το μεταβολισμό των λιπιδίων. Χρησιμοποιήθηκε η φασματοσκοπία Raman η οποία είναι μη-καταστροφική αναλυτική τεχνική με δυνατότητα in-vivo εφαρμογής, κατάλληλη για το χημικό χαρακτηρισμό βιολογικών ιστών σε μοριακό επίπεδο. Η μελέτη έδειξε ότι η έλλειψη του γονιδίου ApoA-1 επηρεάζει σημαντικά το δίκτυο του κολλαγόνου όπως αυτό αποτυπώνεται στην αναλογία των κορυφών 1668 cm-1 / 1690 cm-1 (λόγος μη-αναγώγιμων προς αναγώγιμους σταυροδεσμούς μεταξύ των ινών) στα φάσματα Raman των τροποποιημένων επίμυων σε σχέση με τους μάρτυρες. Αντίθετα, παράμετροι που αφορούν την ασβεστοποίηση του οστού, δηλαδή η αναλογία βιοαπατίτη προς κολλαγόνο καθώς και τα χαρακτηριστικά του βιοαπατίτη, όπως η αναλογία των ανθρακικών υποκαταστατών, παράμετροι δηλαδή που είναι γνωστό ότι αλλοιώνονται σε παθολογικές καταστάσεις όπως η οστεοπόρωση, παρέμειναν αμετάβλητες. Μέτρηση της πυκνότητας των μηριαίων οστών, που έγινε με βάση την Αρχή του Αρχιμήδη, δεν έδειξε κάποια στατιστικά σημαντική διαφοροποίηση μεταξύ των δύο μελετούμενων ομάδων πειραματοζώων, ενώ και η περιεκτικότητα των οστών σε ασβέστιο, η οποία μετρήθηκε με φασματομετρία Ατομικής Απορρόφησης, έδειξε πρακτικά ταύτιση μεταξύ τους. Η μελέτη της περιεκτικότητας του κολλαγόνου πραγματοποιήθηκε με τη μέθοδο της θερμοσταθμικής ανάλυσης και ομοίως δεν φάνηκε να επηρεάζεται, με στατιστικά σημαντικό τρόπο, από την αποσιώπηση του ApoA-1. Τα αποτελέσματα αυτά συγκλίνουν στο συμπέρασμα ότι η έλλειψη του γονιδίου παρεμποδίζει την ωρίμανση του δικτύου του κολλαγόνου του οστού αλλά όχι και την ασβεστοποίηση αυτού, τον εγκιβωτισμό δηλαδή των κρυστάλλων του βιοαπατίτη ανάμεσα στις ίνες του κολλαγόνου. Μελέτες έχουν δείξει ότι μέχρι την ενηλικίωση του οστού ο λόγος των μη-αναγώγιμων προς αναγώγιμους σταυροδεσμούς αυξάνεται μέχρι να σταθεροποιηθεί. Εφόσον ο λόγος των τρισθενών προς τους δισθενείς σταυροδεσμούς παρουσιάζεται μειωμένος σε σχέση με τον μάρτυρα, συμπεραίνεται ότι το οστό με έλλειψη γονιδίου δεν έχει προλάβει να ωριμάσει σωστά. Σύμφωνα με τη βιβλιογραφία, η μείωση του λόγου αυτού συνδέεται με μειωμένη ελαστικότητα των οστών το οποίο επιβεβαιώνεται με μετρήσεις μηχανικής αντοχής που έχουν πραγματοποιηθεί σε οστά με έλλειψη του ίδιου γονιδίου. Έτσι, το οστό απουσία του γονιδίου ApoA-1 αναμένεται να έχει μικρότερη αντοχή στο κάταγμα σε σχέση με το φυσιολογικό.
author2 Όρκουλα, Μαλβίνα
author_facet Όρκουλα, Μαλβίνα
Φερτάκη, Στεφανί
format Thesis
author Φερτάκη, Στεφανί
author_sort Φερτάκη, Στεφανί
title Μελέτη της ποιότητας μηριαίων οστών μυών με φασματοσκοπία Raman και τεχνικές στοιχειακής και θερμικής ανάλυσης
title_short Μελέτη της ποιότητας μηριαίων οστών μυών με φασματοσκοπία Raman και τεχνικές στοιχειακής και θερμικής ανάλυσης
title_full Μελέτη της ποιότητας μηριαίων οστών μυών με φασματοσκοπία Raman και τεχνικές στοιχειακής και θερμικής ανάλυσης
title_fullStr Μελέτη της ποιότητας μηριαίων οστών μυών με φασματοσκοπία Raman και τεχνικές στοιχειακής και θερμικής ανάλυσης
title_full_unstemmed Μελέτη της ποιότητας μηριαίων οστών μυών με φασματοσκοπία Raman και τεχνικές στοιχειακής και θερμικής ανάλυσης
title_sort μελέτη της ποιότητας μηριαίων οστών μυών με φασματοσκοπία raman και τεχνικές στοιχειακής και θερμικής ανάλυσης
publishDate 2018
url http://hdl.handle.net/10889/11553
work_keys_str_mv AT phertakēstephani meletētēspoiotētasmēriaiōnostōnmyōnmephasmatoskopiaramankaitechnikesstoicheiakēskaithermikēsanalysēs
AT phertakēstephani studyoffemoralbonequalitylackingapoa1genewithramanspectroscopythermalandelementalanalysis
_version_ 1771297185681375232
spelling nemertes-10889-115532022-09-05T09:40:18Z Μελέτη της ποιότητας μηριαίων οστών μυών με φασματοσκοπία Raman και τεχνικές στοιχειακής και θερμικής ανάλυσης Study of femoral bonequality lacking ApoA-1 gene with Raman spectroscopy, thermal and elemental analysis Φερτάκη, Στεφανί Όρκουλα, Μαλβίνα Κοντογιάννης, Χρίστος Κουτσούκος, Πέτρος Fertaki, Stefani Οστά Φασματοσκοπία Raman Bones Raman spectroscopy 612.751 045 Στην παρούσα εργασία μελετήθηκε η ποιότητα μηριαίων οστών μυών απουσία του γονιδίου ApoA-1, το οποίο συνδέεται με το μεταβολισμό των λιπιδίων. Χρησιμοποιήθηκε η φασματοσκοπία Raman η οποία είναι μη-καταστροφική αναλυτική τεχνική με δυνατότητα in-vivo εφαρμογής, κατάλληλη για το χημικό χαρακτηρισμό βιολογικών ιστών σε μοριακό επίπεδο. Η μελέτη έδειξε ότι η έλλειψη του γονιδίου ApoA-1 επηρεάζει σημαντικά το δίκτυο του κολλαγόνου όπως αυτό αποτυπώνεται στην αναλογία των κορυφών 1668 cm-1 / 1690 cm-1 (λόγος μη-αναγώγιμων προς αναγώγιμους σταυροδεσμούς μεταξύ των ινών) στα φάσματα Raman των τροποποιημένων επίμυων σε σχέση με τους μάρτυρες. Αντίθετα, παράμετροι που αφορούν την ασβεστοποίηση του οστού, δηλαδή η αναλογία βιοαπατίτη προς κολλαγόνο καθώς και τα χαρακτηριστικά του βιοαπατίτη, όπως η αναλογία των ανθρακικών υποκαταστατών, παράμετροι δηλαδή που είναι γνωστό ότι αλλοιώνονται σε παθολογικές καταστάσεις όπως η οστεοπόρωση, παρέμειναν αμετάβλητες. Μέτρηση της πυκνότητας των μηριαίων οστών, που έγινε με βάση την Αρχή του Αρχιμήδη, δεν έδειξε κάποια στατιστικά σημαντική διαφοροποίηση μεταξύ των δύο μελετούμενων ομάδων πειραματοζώων, ενώ και η περιεκτικότητα των οστών σε ασβέστιο, η οποία μετρήθηκε με φασματομετρία Ατομικής Απορρόφησης, έδειξε πρακτικά ταύτιση μεταξύ τους. Η μελέτη της περιεκτικότητας του κολλαγόνου πραγματοποιήθηκε με τη μέθοδο της θερμοσταθμικής ανάλυσης και ομοίως δεν φάνηκε να επηρεάζεται, με στατιστικά σημαντικό τρόπο, από την αποσιώπηση του ApoA-1. Τα αποτελέσματα αυτά συγκλίνουν στο συμπέρασμα ότι η έλλειψη του γονιδίου παρεμποδίζει την ωρίμανση του δικτύου του κολλαγόνου του οστού αλλά όχι και την ασβεστοποίηση αυτού, τον εγκιβωτισμό δηλαδή των κρυστάλλων του βιοαπατίτη ανάμεσα στις ίνες του κολλαγόνου. Μελέτες έχουν δείξει ότι μέχρι την ενηλικίωση του οστού ο λόγος των μη-αναγώγιμων προς αναγώγιμους σταυροδεσμούς αυξάνεται μέχρι να σταθεροποιηθεί. Εφόσον ο λόγος των τρισθενών προς τους δισθενείς σταυροδεσμούς παρουσιάζεται μειωμένος σε σχέση με τον μάρτυρα, συμπεραίνεται ότι το οστό με έλλειψη γονιδίου δεν έχει προλάβει να ωριμάσει σωστά. Σύμφωνα με τη βιβλιογραφία, η μείωση του λόγου αυτού συνδέεται με μειωμένη ελαστικότητα των οστών το οποίο επιβεβαιώνεται με μετρήσεις μηχανικής αντοχής που έχουν πραγματοποιηθεί σε οστά με έλλειψη του ίδιου γονιδίου. Έτσι, το οστό απουσία του γονιδίου ApoA-1 αναμένεται να έχει μικρότερη αντοχή στο κάταγμα σε σχέση με το φυσιολογικό. In the current study, the quality of femoral bones lacking ApoA-1 gene (a gene associated with lipid metabolism) was investigated. Raman spectroscopy, a non-destructive analytical technique, capable of in-vivo application and suitable for molecular characterization of biological tissues, was used. The study showed that the absence of the ApoA-1 gene significantly affects the collagen network as impressed by the calculation of the band area ratio [1668 cm-1 non-reducible/ 1690 cm-1 reducible cross-links], since it revealed a substantial decrease (20%) for the knock-out mice compared to the wild-type ratio. On the other hand, parameters related to bone calcification, i.e. the ratio of biopatite to collagen did not change. Characteristics of the biopatite, such as the ratio of carbonate substituents, known to be altered in pathological conditions like osteoporosis, remained stable as well. Measurement of femoral bone density by hydrostatic weighing based on the Archimedes principle, showed no statistically significant differentiation between the two experimental animal groups studied. The average calcium content of knock-out femurs, measured by atomic absorption spectrometry, didn’t differ to the wild type. The study of the collagen content was performed by thermogravimetric analysis and the thermograms of wild type and knock-out femurs showed no significant difference either in accordance with the AAS and Raman results. In conclusion, the lack of ApoA-1 gene inhibits the maturation of the bone collagen network while its calcification i.e. the encapsulation of the biopatite crystals between the collagen fibers, remains stable. Studies have shown that reducible cross-links in bone collagen decrease steeply in content between birth and 25 years, but persist in significant amounts throughout adult life. Since the ratio of trivalent to bivalent crosslinks appears to be reduced in the ApoA-1 lacking femora, it can be safely concluded that the respective bones have not been able to mature properly. According to the literature, the reduction of this ratio is also associated with reduced bone elasticity which is confirmed by mechanical strength measurements performed on bones lacking the same gene. Thus, the knock-out bones are expected to have less fracture resistance than the wild-type. 2018-09-18T07:39:46Z 2018-09-18T07:39:46Z 2018-06-18 Thesis http://hdl.handle.net/10889/11553 gr 0 application/pdf