| Περίληψη: | Το πρωτεάσωμα είναι ένα πρωτεϊνικό σύμπλοκο που είναι υπεύθυνο για την αποικοδόμηση πολλών ενδοκυτταρικών πρωτεϊνών όλων των ευκαρυωτικών κυττάρων. Η δράση χυμοθρυψίνης (chymotryptic-like (ChT-L) activity) είναι μια από τις τρείς που διαθέτει το πρωτεάσωμα και περιορίζεται στην αποικοδόμηση ενδοκυτταρικών πρωτεϊνών, όπως πρωτεϊνών μη φυσιολογικά αναδιπλωμένων, οξειδωμένων, μεταλλαγμένων ή κατεστραμμένων, όπως επίσης και πολλών βραχύβιων πρωτεϊνών όπως οι κυκλίνες. Είναι γνωστό ότι τα μυελοδυσπλαστικά σύνδρομα (ΜΔΣ) συνδέονται με την παρουσία αυξημένου οξειδωτικού στρες, δηλαδή οξειδωμένων πρωτεϊνών μέσα στο κύτταρο. Μη αποτελεσματική πρωτεασωμική δραστηριότητα προκαλεί τη συσσώρευση οξειδωτικά τροποποιημένων πρωτεϊνών, κάτι που μπορεί να οδηγήσει σε απορρύθμιση της κυτταρικής ομοιόστασης. Επιπλέον, ο ρόλος του πρωτεασώματος έχει καταγραφεί στην παθογένεση πολλών ασθενειών, ενώ πολλές μελέτες προηγουμένων ετών δείχνουν την εμπλοκή του πρωτεασώματος σε διάφορες αιματολογικές κακοήθειες.
Ασθενείς και μέθοδοι: Σε αυτή τη μελέτη εξετάζεται η δραστικότητα και η ποσοτική έκφραση της 20s υπομονάδας του πρωτεασώματος των μονοπύρηνων κυττάρων είτε σε περιφερικό αίμα είτε σε μυελό ασθενών με ΜΔΣ (υψηλού και χαμηλού κινδύνου) και συγκρίνεται με τις αντίστοιχες παραμέτρους φυσιολογικών ατόμων. Καρκινικά κύτταρα προστάτη της σειράς PC3 χρησιμοποιήθηκαν ως θετικός μάρτυρας για τη δραστικότητα πρωτεασώματος. Για τον υπολογισμό της δραστικότητας, η λύση των κυττάρων γίνεται με διάλυμα διθειοθρεϊτόλης (DTT) και ακολουθεί επώαση με το φθορίζον πεπτίδιο: Suc-LLVY-AMC. Η ένταση του φθορισμού είναι ανάλογη της δράσης χυμοθρυψίνης στα κύτταρα. Ο αναστολέας MG-132 του πρωτεασώματος χρησιμοποιείται ως αρνητικός μάρτυρας. Εξετάζεται επίσης η ποσότητα της β5 υπομονάδας του πρωτεασώματος στα ίδια κύτταρα ΜΔΣ ασθενών με ανάλυση western. Η δραστικότητα και η ποσότητα του πρωτεασώματος παρουσιάζει στατιστικά σημαντικές διαφορές στους ΜΔΣ ασθενείς σε σχέση με τα φυσιολογικά άτομα.
|
|---|
