Ποσοτικοποίηση πεπτιδίου συζευγμένου με πολυσακχαρίτη
Στα πλαίσια της παρούσας διπλωματικής εργασίας μελετήθηκε σύζευγμα του πεπτιδικού αναλόγου [KG]5-MOG35-55 με τον πολυσακχαρίτη μαννάνη στην οξειδωμένη μορφή της. Το εν λόγω σύζευγμα έχει μελετηθεί εκτενώς στο εργαστήριο και έχει βρεθεί να αναστέλλει την εμφάνιση των συμπτωμάτων της Σκλήρυνσης Κατά Π...
| Κύριος συγγραφέας: | |
|---|---|
| Άλλοι συγγραφείς: | |
| Μορφή: | Thesis |
| Γλώσσα: | Greek |
| Έκδοση: |
2019
|
| Θέματα: | |
| Διαθέσιμο Online: | http://hdl.handle.net/10889/12254 |
| id |
nemertes-10889-12254 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
nemertes-10889-122542022-09-05T20:47:09Z Ποσοτικοποίηση πεπτιδίου συζευγμένου με πολυσακχαρίτη Quantification of peptide conjugated with polysaccharide Γκίκα, Αρετή Τσέλιος, Θεόδωρος Βλάμης, Αλέξης Τσιβγούλης, Γεράσιμος Τσέλιος, Θεόδωρος Gkika, Areti Σκλήρυνση κατά πλάκας Θρυψίνη Ηλεκτροφόρηση SDS-PAGE Απομυελίνωση Multiple sclerosis Trypsin Electrophoresis SDS-PAGE Demyelination 572.654 Στα πλαίσια της παρούσας διπλωματικής εργασίας μελετήθηκε σύζευγμα του πεπτιδικού αναλόγου [KG]5-MOG35-55 με τον πολυσακχαρίτη μαννάνη στην οξειδωμένη μορφή της. Το εν λόγω σύζευγμα έχει μελετηθεί εκτενώς στο εργαστήριο και έχει βρεθεί να αναστέλλει την εμφάνιση των συμπτωμάτων της Σκλήρυνσης Κατά Πλάκας στο χρόνιο ζωικό μοντέλο της Πειραματικής Αυτοάνοσης Εγκεφαλομυελίτιδας (ΕΑΕ, Experimental Autoimmune Encephalomyelitis). Διερευνήθηκε η σύζευξη του πεπτιδίου με τον πολυσακχαρίτη μαννάνη σε υδατικό διάλυμα και τα αποτελέσματα έδειξαν ότι μπορεί να επιτευχθεί δίνοντας την δυνατότητα εύρεσης καλύτερης φαρμακοτεχνικής μορφής στο σύζευγμα. Στην συνέχεια πραγματοποιήθηκαν πειράματα με στόχο την αποκόλληση του πεπτιδικού αναλόγου από τον πολυσακχαρίτη μαννάνη. Έγινε προσπάθεια αποκόλλησης ολόκληρης της πεπτιδικής αλληλουχίας καθώς και στοχευμένων τμημάτων αυτής. Για τον σκοπό αυτό χρησιμοποιήθηκαν χημικοί μέθοδοι σε διαλύματα διαφορετικής οξύτητας καθώς και πρωτεολυτική διάσπαση του πεπτιδίου με χρήση του ενζύμου θρυψίνη. Τέλος αναπτύχθηκε μέθοδος με ηλεκτροφόρηση (tricine SDS-PAGE) για τον ποσοτικό προσδιορισμό του ελεύθερου πεπτιδικού αναλόγου που δύναται να μείνει ασύζευκτο μετά από ατελή αντίδραση σύζευξης με τον πολυσακχαρίτη μαννάνη. In this thesis, we have studied the conjugate of the peptide analogue [KG]5-MOG35-55 bounded into mannan polysaccharide in its oxidised form. This particular conjugate has been extensively studied in our lab, since it was shown to ameliorate the symptoms of MS, using the most commonly used experimental model for the human inflammatory demyelinating disease, Experimental Autoimmune Encephalomyelitis (EAE). The conjugation reaction of the peptide analogue with oxidised mannan was monitored in aqueous solution and the results lead tοthe conclusion this reaction could occur in H2O aiming to achieve a better solvent / formulation at the end of this reaction. Moreover, experiments were carried out in order to cleave the bound peptide from mannan polysaccharide. Chemical and enzymatic methods were used trying to cleave the total sequence of the peptide analogue or part of the sequence, respectively. Finally, a method was developed for the quantification of the free, unbounded peptide that could possibly remain in the conjugation reaction via tricine SDS Page. 2019-06-30T11:17:14Z 2019-06-30T11:17:14Z 2018-06-20 Thesis http://hdl.handle.net/10889/12254 gr 12 application/pdf |
| institution |
UPatras |
| collection |
Nemertes |
| language |
Greek |
| topic |
Σκλήρυνση κατά πλάκας Θρυψίνη Ηλεκτροφόρηση SDS-PAGE Απομυελίνωση Multiple sclerosis Trypsin Electrophoresis SDS-PAGE Demyelination 572.654 |
| spellingShingle |
Σκλήρυνση κατά πλάκας Θρυψίνη Ηλεκτροφόρηση SDS-PAGE Απομυελίνωση Multiple sclerosis Trypsin Electrophoresis SDS-PAGE Demyelination 572.654 Γκίκα, Αρετή Ποσοτικοποίηση πεπτιδίου συζευγμένου με πολυσακχαρίτη |
| description |
Στα πλαίσια της παρούσας διπλωματικής εργασίας μελετήθηκε σύζευγμα του πεπτιδικού αναλόγου [KG]5-MOG35-55 με τον πολυσακχαρίτη μαννάνη στην οξειδωμένη μορφή της. Το εν λόγω σύζευγμα έχει μελετηθεί εκτενώς στο εργαστήριο και έχει βρεθεί να αναστέλλει την εμφάνιση των συμπτωμάτων της Σκλήρυνσης Κατά Πλάκας στο χρόνιο ζωικό μοντέλο της Πειραματικής Αυτοάνοσης Εγκεφαλομυελίτιδας (ΕΑΕ, Experimental Autoimmune Encephalomyelitis).
Διερευνήθηκε η σύζευξη του πεπτιδίου με τον πολυσακχαρίτη μαννάνη σε υδατικό διάλυμα και τα αποτελέσματα έδειξαν ότι μπορεί να επιτευχθεί δίνοντας την δυνατότητα εύρεσης καλύτερης φαρμακοτεχνικής μορφής στο σύζευγμα.
Στην συνέχεια πραγματοποιήθηκαν πειράματα με στόχο την αποκόλληση του πεπτιδικού αναλόγου από τον πολυσακχαρίτη μαννάνη. Έγινε προσπάθεια αποκόλλησης ολόκληρης της πεπτιδικής αλληλουχίας καθώς και στοχευμένων τμημάτων αυτής. Για τον σκοπό αυτό χρησιμοποιήθηκαν χημικοί μέθοδοι σε διαλύματα διαφορετικής οξύτητας καθώς και πρωτεολυτική διάσπαση του πεπτιδίου με χρήση του ενζύμου θρυψίνη.
Τέλος αναπτύχθηκε μέθοδος με ηλεκτροφόρηση (tricine SDS-PAGE) για τον ποσοτικό προσδιορισμό του ελεύθερου πεπτιδικού αναλόγου που δύναται να μείνει ασύζευκτο μετά από ατελή αντίδραση σύζευξης με τον πολυσακχαρίτη μαννάνη. |
| author2 |
Τσέλιος, Θεόδωρος |
| author_facet |
Τσέλιος, Θεόδωρος Γκίκα, Αρετή |
| format |
Thesis |
| author |
Γκίκα, Αρετή |
| author_sort |
Γκίκα, Αρετή |
| title |
Ποσοτικοποίηση πεπτιδίου συζευγμένου με πολυσακχαρίτη |
| title_short |
Ποσοτικοποίηση πεπτιδίου συζευγμένου με πολυσακχαρίτη |
| title_full |
Ποσοτικοποίηση πεπτιδίου συζευγμένου με πολυσακχαρίτη |
| title_fullStr |
Ποσοτικοποίηση πεπτιδίου συζευγμένου με πολυσακχαρίτη |
| title_full_unstemmed |
Ποσοτικοποίηση πεπτιδίου συζευγμένου με πολυσακχαρίτη |
| title_sort |
ποσοτικοποίηση πεπτιδίου συζευγμένου με πολυσακχαρίτη |
| publishDate |
2019 |
| url |
http://hdl.handle.net/10889/12254 |
| work_keys_str_mv |
AT nkikaaretē posotikopoiēsēpeptidiousyzeugmenoumepolysakcharitē AT nkikaaretē quantificationofpeptideconjugatedwithpolysaccharide |
| _version_ |
1771297343890522112 |
