Συμβολή στον προσδιορισμό της ωχρατοξίνης Α (ΟΤΑ) σε ζωικό ιστό με υγρή χρωματογραφία υψηλής επίδοσης (H.P.L.C)

• Κύριος συγγραφέας: Τζιαμουράνη, Ελένη
• Άλλοι συγγραφείς: Τσεγενίδης, Θεόδωρος
• Μορφή: Thesis
• Γλώσσα: Greek
• Έκδοση: 2020
• Θέματα: Ωχρατοξίνη Α; Υγρή χρωματογραφία υψηλής επίδοσης; Εκχύλιση στερεάς φάσης; Ήπαρ; Ochratoxin A; High performance liquid chromatography; Solid phase extraction; Liver; 543.84

Η πρόσληψη μολυσμένων ζωοτροφών με ωχρατοξίνη Α (ΟΤΑ) αντιπροσωπεύει δυνητικό κίνδυνο για την υγεία των ζώων και ζήτημα ασφάλειας των τροφίμων λόγω της μεταφοράς της τοξίνης μέσω της τροφικής αλυσίδας στον άνθρωπο. Στη παρούσα διπλωματική εργασία έγινε βελτιστοποίηση της μεθόδου απομόνωσης της ΟΤΑ από διαλύματα που την περιέχουν με τη μέθοδο της εκχύλισης σε στερεά φάση. Η ανάλυση της τοξίνης επιτεύχθηκε με Υγρή Χρωματογραφία Υψηλής Επίδοσης σε συνδυασμό με ανιχνευτή φθορισμού. Μελετήθηκε η συγκράτηση της ΟΤΑ σε φύσιγγες ανάστροφης φάσης OASIS® HLB και ιονανταλλαγής OASIS® MCX μετά από κατεργασία της πρώτης με θειικό δωδεκυλικό νάτριο (SDS) και FeCl3 και της δεύτερης με FeCl3, ώστε να υπάρχουν ακινητοποιημένα ιόντα Fe3+ στο πληρωτικό υλικό τους για το σχηματισμό «συμπλόκου» με τη τοξίνη. Η ανάκτηση της ΟΤΑ έγινε με διάλυμα 0.05 ή 0.2 Μ ΝαΟΗ - ακετονιτρίλιο (20:80, v/v), αντίστοιχα και κυμάνθηκε από 76 έως 85% για τη φύσιγγα OASIS® HLB/SDS-FeCl3 και από 92 έως 108% για την φύσιγγα OASIS® MCX/FeCl3. Η μέθοδος εφαρμόστηκε στην απομόνωση της ΟΤΑ από εμβολιασμένο εκχύλισμα ζωικού ιστού (ήπαρ όρνιθας) ή απευθείας από τον εμβολιασμένο ιστό. Η ανάκτηση από το εμβολιασμένο εκχύλισμα ήπατος με 10 ng ΟΤΑ /g ιστού κυμάνθηκε από 63 έως 71% και από τον απευθείας επιμολυσμένο ιστό από 59 έως 85%. Παρατηρήθηκε ελάττωση της ανάκτησης στην περίπτωση που η ποσότητα του εμβολιασμού ήταν μικρότερη.