| Περίληψη: | Η πρωτεΐνη Geminin εμπλέκεται στη ρύθμιση της κυτταρικής διαίρεσης και διαφοροποίησης αλληλοεπιδρώντας με πληθώρα μορίων επηρεάζοντας σημαντικά την κυτταρική λειτουργία. Βασικός ρόλος της Geminin είναι η αναστολή της δράσης της πρωτεΐνης CDT1 που αποτελεί ρυθμιστικό παράγοντα στην αδειοδότηση της αντιγραφής του DNA. Πρόσδεση της Geminin στο CDT1, αναστέλλει το σχηματισμό του προαντιγραφικού συμπλόκου που συγκροτείται στα σημεία έναρξης της αντιγραφής κατά την αδειοδότησή της. Ωστόσο, απορρύθμιση του συστήματος αδειοδότησης μπορεί να οδηγήσει σε γενωμική αστάθεια, ένα από τα κύρια χαρακτηριστικά του καρκίνου. Είναι πλέον γνωστό ότι η απαλοιφή της Geminin in vivo οδηγεί σε επαναντιγραφή και αυξημένη ογκογένεση, ενώ in vitro μελέτες αναφέρουν την υπερέκφραση του CDT1 ως κύριο αίτιο επαναντιγραφής.
Η παρούσα μελέτη εστιάζει στη διερεύνηση της αλληλεπίδρασης των πρωτεϊνών Geminin και CDT1 στην καρκινογένεση, καθώς και τη διερεύνηση του πρωτεϊνικού συμπλόκου ως πιθανό μοριακό στόχο της δράσης αντικαρκινικών ενώσεων. Προκειμένου να εξεταστεί ο ρόλος της αλληλεπίδρασής των δυο πρωτεϊνών in vivo, έγινε αποσιώπηση του γονιδίου της geminin και υπερέκφραση του CDT1 στα βλαστικά κύτταρα του παχέος εντέρου μυών και ακολούθησε χημική επαγωγή καρκίνου. Επιπλέον, ως εργαλείο μελέτης γενωμικής αστάθειας παρασκευάστηκαν πρωτογενείς καλλιέργειες εμβρυικών ινοβλαστών μυών, που υπερεκφράζουν τον παράγοντα CDT1 παρουσία ή απουσία Geminin, κατόπιν διαμόλυνσής τους με λεντι-ιούς ( Cre-LoxP σύστημα).
Λαμβάνοντας υπόψιν τόσο την απουσία ελέγχου κατά την αντιγραφή όσο και τη δυσλειτουργία των αντικαρκινικών κυτταρικών μηχανισμών ως κύρια χαρακτηριστικά του καρκίνου, πραγματοποιήθηκε σχεδιασμός και σύνθεση χημικών ενώσεων με στόχο την διατάραξη του συμπλόκου Geminin/CDT1. Ακολούθησε έλεγχος της δραστικότητας των παραπάνω ενώσεων με τη μέθοδο του Alphascreen προκειμένου να προσδιοριστεί η επίδρασή τους στο σύμπλοκο.
|
|---|
