Μελέτη του μηχανισμού αδειοδότησης της αντιγραφής του DNA σε νευρικά βλαστικά κύτταρα κατά την πρώιμη και μέση φλοιογένεση ελλειμματικών για το γονίδιο της Geminin μυών
Ο εγκεφαλικός φλοιός αποτελεί μια πολύπλοκη δομή, η δημιουργία της οποίας περιλαμβάνει την κατανομή των διάφορων κυτταρικών τύπων στις αντίστοιχες νεοσχηματιζόμενες στιβάδες του εγκεφάλου. Η διαδικασία της φλοιογένεσης ξεκινά κατά την εμβρυογένεση με κατεύθυνση από το εσωτερικό προς το εξωτερικό τμή...
| Κύριος συγγραφέας: | |
|---|---|
| Άλλοι συγγραφείς: | |
| Μορφή: | Thesis |
| Γλώσσα: | Greek |
| Έκδοση: |
2021
|
| Θέματα: | |
| Διαθέσιμο Online: | http://hdl.handle.net/10889/14478 |
| id |
nemertes-10889-14478 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| institution |
UPatras |
| collection |
Nemertes |
| language |
Greek |
| topic |
Φλοιογένεση Νευροεπιθηλιακά κύτταρα Κύτταρα ακτινωτής γλοίας Αδειοδότηση της αντιγραφής Αντιγραφικό στρες Geminin Corticogenesis |
| spellingShingle |
Φλοιογένεση Νευροεπιθηλιακά κύτταρα Κύτταρα ακτινωτής γλοίας Αδειοδότηση της αντιγραφής Αντιγραφικό στρες Geminin Corticogenesis Μουγκογιάννη, Μαρία Μελέτη του μηχανισμού αδειοδότησης της αντιγραφής του DNA σε νευρικά βλαστικά κύτταρα κατά την πρώιμη και μέση φλοιογένεση ελλειμματικών για το γονίδιο της Geminin μυών |
| description |
Ο εγκεφαλικός φλοιός αποτελεί μια πολύπλοκη δομή, η δημιουργία της οποίας περιλαμβάνει την κατανομή των διάφορων κυτταρικών τύπων στις αντίστοιχες νεοσχηματιζόμενες στιβάδες του εγκεφάλου. Η διαδικασία της φλοιογένεσης ξεκινά κατά την εμβρυογένεση με κατεύθυνση από το εσωτερικό προς το εξωτερικό τμήμα του εγκεφάλου καθώς τα πρόδρομα κύτταρα του πρόσθιου εγκεφάλου διαιρούνται και δίνουν γένεση σε διάμεσους και τους προβάλλοντες νευρώνες. Αρχικά, τα νευροεπιθηλιακά κύτταρα δίνουν γένεση στα κύτταρα ακτινωτής γλοίας και αυτά με τη σειρά τους μέσω διαιρέσεων αυτοανανέωσης κατά την εξέλιξη της φλοιογένεσης επεκτείνουν τον πληθυσμό τους. Μετέπειτα, μέσω ασύμμετρων διαιρέσεων διαφοροποίησης σταδιακά δίνουν γένεση σε νευρώνες μέσω της παραγωγής διάμεσων νευρώνων και της επακόλουθης δημιουργίας των νευρικών κυττάρων. Η όλη διαδικασία της φλοιογένεσης υπόκειται σε αυστηρό έλεγχο με τη βοήθεια εξωτερικών σημάτων και έκφρασης ενδογενών μεταγραφικών παραγόντων. Ένας τέτοιος μηχανισμός ελέγχου, είναι η Geminin, η οποία αποτελεί βασικό ρυθμιστή του κυτταρικού κύκλου καθώς και των διαδικασιών κυτταρικής διαφοροποίησης και έχει μελετηθεί εκτενώς σε προηγούμενες μελέτες του εργαστηρίου.
Η παρούσα εργασία μελετά τις ενδογενείς διαφορές των νευροεπιθηλιακών και των κυττάρων ακτινωτής γλοίας και πιο συγκεκριμένα, η έρευνα εστιάζεται στη διερεύνηση της διαφορετικής ρύθμισης της αντιγραφής του DNA των δύο αυτών κυτταρικών πληθυσμών σε in vivo πειραματικό ζωϊκό μοντέλο. Σύμφωνα με τα ευρήματα αυτά, αναδεικνύεται η αυξημένη αδειοδότηση των αφετηριών της αντιγραφής στην περίπτωση των νευροεπιθηλιακών κυττάρων σε σύγκριση με τα κύτταρα ακτινωτής γλοίας. Το γεγονός αυτό συνάδει, μεταξύ άλλων, με τον αυξημένο αριθμό ανενεργών αδειοδοτημένων αφετηριών της αντιγραφής των νευροεπιθηλιακών κυττάρων σε σύγκριση με τα κύτταρα ακτινωτής γλοίας, καθώς λειτουργεί ως μηχανισμός προστασίας τους σε συνθήκες αντιγραφικού στρες, στο οποίο ο πρώτος πληθυσμός εμφανίζει αυξημένη ευαισθησία.
Επιπλέον, στα πλαίσια της συγκεκριμένης διπλωματικής διεξάγεται in vivo και in vitro μελέτη της επίδρασης που προκαλεί το αντιγραφικό στρες που αναπτύσσεται έπειτα από αποσιώπηση της έκφρασης της Geminin (όπως υποδηλώνουν προηγούμενες εργασίες του εργαστηρίου) σε δύο διαφορετικά πειραματικά συστήματα. Τα αποτελέσματα υποστηρίζουν πως το αντιγραφικό αυτό στρες οδηγεί σε μειωμένη αδειοδότηση των αφετηριών της αντιγραφής και στα δύο πειραματικά μοντέλα που εξετάζονται. Αυτό ενδέχεται να οφείλεται είτε σε επαγόμενη διακοπή του κυτταρικού κύκλου στην G2 φάση και από-αδειοδότηση των αφετηριών της αντιγραφής είτε στο ρόλο που διαδραματίζει σε ορισμένες περιπτώσεις η Geminin ως θετικός ρυθμιστής της αδειοδότησης της αντιγραφής και συνεπώς σε συνθήκες αποσιώπησής της η αδειοδότηση της αντιγραφής περιορίζεται. |
| author2 |
Ταραβήρας, Σταύρος |
| author_facet |
Ταραβήρας, Σταύρος Μουγκογιάννη, Μαρία |
| format |
Thesis |
| author |
Μουγκογιάννη, Μαρία |
| author_sort |
Μουγκογιάννη, Μαρία |
| title |
Μελέτη του μηχανισμού αδειοδότησης της αντιγραφής του DNA σε νευρικά βλαστικά κύτταρα κατά την πρώιμη και μέση φλοιογένεση ελλειμματικών για το γονίδιο της Geminin μυών |
| title_short |
Μελέτη του μηχανισμού αδειοδότησης της αντιγραφής του DNA σε νευρικά βλαστικά κύτταρα κατά την πρώιμη και μέση φλοιογένεση ελλειμματικών για το γονίδιο της Geminin μυών |
| title_full |
Μελέτη του μηχανισμού αδειοδότησης της αντιγραφής του DNA σε νευρικά βλαστικά κύτταρα κατά την πρώιμη και μέση φλοιογένεση ελλειμματικών για το γονίδιο της Geminin μυών |
| title_fullStr |
Μελέτη του μηχανισμού αδειοδότησης της αντιγραφής του DNA σε νευρικά βλαστικά κύτταρα κατά την πρώιμη και μέση φλοιογένεση ελλειμματικών για το γονίδιο της Geminin μυών |
| title_full_unstemmed |
Μελέτη του μηχανισμού αδειοδότησης της αντιγραφής του DNA σε νευρικά βλαστικά κύτταρα κατά την πρώιμη και μέση φλοιογένεση ελλειμματικών για το γονίδιο της Geminin μυών |
| title_sort |
μελέτη του μηχανισμού αδειοδότησης της αντιγραφής του dna σε νευρικά βλαστικά κύτταρα κατά την πρώιμη και μέση φλοιογένεση ελλειμματικών για το γονίδιο της geminin μυών |
| publishDate |
2021 |
| url |
http://hdl.handle.net/10889/14478 |
| work_keys_str_mv |
AT mounkogiannēmaria meletētoumēchanismouadeiodotēsēstēsantigraphēstoudnaseneurikablastikakyttarakatatēnprōimēkaimesēphloiogenesēelleimmatikōngiatogonidiotēsgemininmyōn |
| _version_ |
1771297315137519616 |
| spelling |
nemertes-10889-144782022-09-05T20:34:11Z Μελέτη του μηχανισμού αδειοδότησης της αντιγραφής του DNA σε νευρικά βλαστικά κύτταρα κατά την πρώιμη και μέση φλοιογένεση ελλειμματικών για το γονίδιο της Geminin μυών Μουγκογιάννη, Μαρία Ταραβήρας, Σταύρος Λυγερού, Ζωή Καζάνης, Ηλίας Mougkogianni, Maria Φλοιογένεση Νευροεπιθηλιακά κύτταρα Κύτταρα ακτινωτής γλοίας Αδειοδότηση της αντιγραφής Αντιγραφικό στρες Geminin Corticogenesis Ο εγκεφαλικός φλοιός αποτελεί μια πολύπλοκη δομή, η δημιουργία της οποίας περιλαμβάνει την κατανομή των διάφορων κυτταρικών τύπων στις αντίστοιχες νεοσχηματιζόμενες στιβάδες του εγκεφάλου. Η διαδικασία της φλοιογένεσης ξεκινά κατά την εμβρυογένεση με κατεύθυνση από το εσωτερικό προς το εξωτερικό τμήμα του εγκεφάλου καθώς τα πρόδρομα κύτταρα του πρόσθιου εγκεφάλου διαιρούνται και δίνουν γένεση σε διάμεσους και τους προβάλλοντες νευρώνες. Αρχικά, τα νευροεπιθηλιακά κύτταρα δίνουν γένεση στα κύτταρα ακτινωτής γλοίας και αυτά με τη σειρά τους μέσω διαιρέσεων αυτοανανέωσης κατά την εξέλιξη της φλοιογένεσης επεκτείνουν τον πληθυσμό τους. Μετέπειτα, μέσω ασύμμετρων διαιρέσεων διαφοροποίησης σταδιακά δίνουν γένεση σε νευρώνες μέσω της παραγωγής διάμεσων νευρώνων και της επακόλουθης δημιουργίας των νευρικών κυττάρων. Η όλη διαδικασία της φλοιογένεσης υπόκειται σε αυστηρό έλεγχο με τη βοήθεια εξωτερικών σημάτων και έκφρασης ενδογενών μεταγραφικών παραγόντων. Ένας τέτοιος μηχανισμός ελέγχου, είναι η Geminin, η οποία αποτελεί βασικό ρυθμιστή του κυτταρικού κύκλου καθώς και των διαδικασιών κυτταρικής διαφοροποίησης και έχει μελετηθεί εκτενώς σε προηγούμενες μελέτες του εργαστηρίου. Η παρούσα εργασία μελετά τις ενδογενείς διαφορές των νευροεπιθηλιακών και των κυττάρων ακτινωτής γλοίας και πιο συγκεκριμένα, η έρευνα εστιάζεται στη διερεύνηση της διαφορετικής ρύθμισης της αντιγραφής του DNA των δύο αυτών κυτταρικών πληθυσμών σε in vivo πειραματικό ζωϊκό μοντέλο. Σύμφωνα με τα ευρήματα αυτά, αναδεικνύεται η αυξημένη αδειοδότηση των αφετηριών της αντιγραφής στην περίπτωση των νευροεπιθηλιακών κυττάρων σε σύγκριση με τα κύτταρα ακτινωτής γλοίας. Το γεγονός αυτό συνάδει, μεταξύ άλλων, με τον αυξημένο αριθμό ανενεργών αδειοδοτημένων αφετηριών της αντιγραφής των νευροεπιθηλιακών κυττάρων σε σύγκριση με τα κύτταρα ακτινωτής γλοίας, καθώς λειτουργεί ως μηχανισμός προστασίας τους σε συνθήκες αντιγραφικού στρες, στο οποίο ο πρώτος πληθυσμός εμφανίζει αυξημένη ευαισθησία. Επιπλέον, στα πλαίσια της συγκεκριμένης διπλωματικής διεξάγεται in vivo και in vitro μελέτη της επίδρασης που προκαλεί το αντιγραφικό στρες που αναπτύσσεται έπειτα από αποσιώπηση της έκφρασης της Geminin (όπως υποδηλώνουν προηγούμενες εργασίες του εργαστηρίου) σε δύο διαφορετικά πειραματικά συστήματα. Τα αποτελέσματα υποστηρίζουν πως το αντιγραφικό αυτό στρες οδηγεί σε μειωμένη αδειοδότηση των αφετηριών της αντιγραφής και στα δύο πειραματικά μοντέλα που εξετάζονται. Αυτό ενδέχεται να οφείλεται είτε σε επαγόμενη διακοπή του κυτταρικού κύκλου στην G2 φάση και από-αδειοδότηση των αφετηριών της αντιγραφής είτε στο ρόλο που διαδραματίζει σε ορισμένες περιπτώσεις η Geminin ως θετικός ρυθμιστής της αδειοδότησης της αντιγραφής και συνεπώς σε συνθήκες αποσιώπησής της η αδειοδότηση της αντιγραφής περιορίζεται. The cerebral cortex is a complex structure, the development of which includes the distribution of different cell types to the corresponding newly formed layers of the brain. The process of corticogenesis begins during embryogenesis with an inner-outer direction in the brain, while the neural precursors of the forebrain divide and give rise to intermediate and projection neurons. Neuroepithelial cells, initially, generate radial glial cells and the latter expand their population through self-renewal divisions during corticogenesis. Afterwards, through asymmetric differentiation divisions, radial glial cells gradually give rise to neurons by the production of intermediate neurons and the generation of neural cells. Corticogenesis is subject to strict control of external signals and expression of endogenous transcription factors. Geminin consists a principal control mechanism regulating the cell cycle, as well as the procedures of cell differentiation, and has been widely studied in previous works of our laboratory. The present work aims to study the endogenous differences between neuroepithelial and radial glial cells and especially here, we focus on the investigation of different DNA replication regulation between these cell populations by using an in vivo experimental animal model. According to our findings, we show an increased licensing of origins of replication in the case of neuroepithelial cells when compared to radial glial cells. This is in accordance with the increased number of inactivated licensed origins of neuroepithelial cells in contrast to radial glial cells, since they function as a protection mechanism in conditions of replication stress to which the former population is more susceptible. In addition, in the context of this work, an in vivo and in vitro study of replication stress developed after silencing of Geminin expression (as it is indicated by previous work of our lab) takes place in two different experimental systems. These results imply that replication stress causes a decrease in licensing of origins of replication in both systems studied. This is likely to be provoked either by induced cell cycle arrest in G2 phase and subsequent delicensing of origins of replication or by the role of Geminin as a positive regulator of replication licensing resulting in limited licensing after Geminin deletion. 2021-02-15T11:33:19Z 2021-02-15T11:33:19Z 2020-01 Thesis http://hdl.handle.net/10889/14478 gr 12 application/pdf |
