Στόχευση συστήματος υαλουρονικού οξέος σε καρκινικά κύτταρα μαστού
O καρκίνος του μαστού είναι μια ασθένεια που χαρακτηρίζεται από μεγάλη ετερογένεια και αποτελεί τη δεύτερη κύρια αιτία θανάτου στις γυναίκες παγκοσμίως. Σημαντικός παράγοντας κατηγοριοποίησής του είναι η έκφραση του υποδοχέα οιστρογόνων-α (ERα). Μεταστατικοί καρκίνοι μαστού (όπως ο τριπλά αρνητικός...
| Κύριος συγγραφέας: | |
|---|---|
| Άλλοι συγγραφείς: | |
| Γλώσσα: | Greek |
| Έκδοση: |
2021
|
| Θέματα: | |
| Διαθέσιμο Online: | http://hdl.handle.net/10889/14606 |
| id |
nemertes-10889-14606 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| institution |
UPatras |
| collection |
Nemertes |
| language |
Greek |
| topic |
Καρκίνος του μαστού Εξωκυττάριος χώρος Υαλουρονικό οξύ Σαλικυλικό οξύ Ενεργά είδη οξυγόνου Breast cancer Extracellular matrix Hyaluronic acid 4-MU Salicylic acid Reactive oxygen species |
| spellingShingle |
Καρκίνος του μαστού Εξωκυττάριος χώρος Υαλουρονικό οξύ Σαλικυλικό οξύ Ενεργά είδη οξυγόνου Breast cancer Extracellular matrix Hyaluronic acid 4-MU Salicylic acid Reactive oxygen species Κονδύλη, Αικατερίνη Στόχευση συστήματος υαλουρονικού οξέος σε καρκινικά κύτταρα μαστού |
| description |
O καρκίνος του μαστού είναι μια ασθένεια που χαρακτηρίζεται από μεγάλη ετερογένεια και αποτελεί τη δεύτερη κύρια αιτία θανάτου στις γυναίκες παγκοσμίως. Σημαντικός παράγοντας κατηγοριοποίησής του είναι η έκφραση του υποδοχέα οιστρογόνων-α (ERα). Μεταστατικοί καρκίνοι μαστού (όπως ο τριπλά αρνητικός καρκίνος του μαστού, TNBC) έχουν τη χειρότερη πρόγνωση εξαιτίας της έλλειψης αποτελεσματικής στοχευμένης θεραπείας τους. Για το λόγο αυτό κρίνεται επιτακτική η ανάγκη για την εύρεση νέων θεραπειών, οι οποίες θα μπορούν απόλυτα και εκλεκτικά να στοχεύουν τα μεταστατικά καρκινικά κύτταρα μαστού χωρίς παρενέργειες.
Το υαλουρονικό (HA), ένας γραμμικός ετεροπολυσακχαρίτης, είναι ένα από τα κύρια συστατικά του εξωκυττάριου χώρου (ECM). Η αυξημένη βιοσύνθεση και συσσώρευση ΗΑ, που οφείλονται στην απορρύθμιση των ενζύμων που το συνθέτουν (κυρίως της HAS2), έχουν συσχετισθεί με κακή πρόγνωση σε ασθενείς με μεταστατικό καρκίνο μαστού. Το γεγονός ότι η σίγαση ή αναστολή της HAS2 καταστέλλει τον κακοήθη φαινότυπο των διηθητικών καρκινικών κυττάρων μαστού μας οδήγησε στη μελέτη στρατηγικών, οι οποίες στοχεύουν το σύστημα του ΗΑ. Αυτό μπορεί να επιτευχθεί σε επίπεδο σύνθεσης, με τη χρήση φαρμάκων όπως το 4-MU και τo σαλικυλικό οξύ (SA), τα οποία καταστέλλουν τη δράση της HAS2, μειώνοντας έτσι την ποσότητα του παραγόμενου ΗΑ.
Στην παρούσα διπλωματική εργασία χρησιμοποιήθηκαν ERα-αρνητικά μεταστατικά καρκινικά κύτταρα μαστού MDA-MB-231 και Hs578T στα οποία πραγματοποιήθηκε καταστολή βιοσύνθεσης υαλουρονικού οξέος, με τη χρήση 4-MU και SA. Αρχικά, μελετήθηκε η επίδραση των αναστολέων αυτών στη βιωσιμότητα και την κινητικότητα των μεταστατικών καρκινικών κυττάρων μαστού. Προκειμένου να διερευνηθεί περαιτέρω ο υποκείμενος μοριακός μηχανισμός δράσης των αναστολέων στις λειτουργικές ιδιότητες των μεταστατικών καρκινικών κυττάρων μαστού, πραγματοποιήθηκε μελέτη της πιθανής εμπλοκής των ενδοκυττάριων ROS με τη προσθήκη Ν-ακετυλο-κυστεΐνης (NAC), ενός συλλέκτη (scavenger) ενδοκυττάριων ROS.
Συμπερασματικά, τα αποτελέσματα της παρούσας μεταπτυχιακής εργασίας, καταδεικνύουν ότι παρά την εξουδετέρωση των παραγόμενων ROS που επάγονται από 4-MU και SA, η NAC δεν ήταν ικανή να αναστρέψει τις αλλαγές στις λειτουργικές ιδιότητες των κυττάρων μετά από κατεργασία τους με τους δύο παράγοντες. Το γεγονός αυτό υποδηλώνει ότι τα ROS δεν φαίνεται να συμμετέχουν δραστικά σε αυτές τις διεργασίες. |
| author2 |
Kondyli, Aikaterini |
| author_facet |
Kondyli, Aikaterini Κονδύλη, Αικατερίνη |
| author |
Κονδύλη, Αικατερίνη |
| author_sort |
Κονδύλη, Αικατερίνη |
| title |
Στόχευση συστήματος υαλουρονικού οξέος σε καρκινικά κύτταρα μαστού |
| title_short |
Στόχευση συστήματος υαλουρονικού οξέος σε καρκινικά κύτταρα μαστού |
| title_full |
Στόχευση συστήματος υαλουρονικού οξέος σε καρκινικά κύτταρα μαστού |
| title_fullStr |
Στόχευση συστήματος υαλουρονικού οξέος σε καρκινικά κύτταρα μαστού |
| title_full_unstemmed |
Στόχευση συστήματος υαλουρονικού οξέος σε καρκινικά κύτταρα μαστού |
| title_sort |
στόχευση συστήματος υαλουρονικού οξέος σε καρκινικά κύτταρα μαστού |
| publishDate |
2021 |
| url |
http://hdl.handle.net/10889/14606 |
| work_keys_str_mv |
AT kondylēaikaterinē stocheusēsystēmatosyalouronikouoxeossekarkinikakyttaramastou AT kondylēaikaterinē targetingofthehyaluronicacidsysteminbreastcancercells |
| _version_ |
1771297188331126784 |
| spelling |
nemertes-10889-146062022-09-05T09:40:41Z Στόχευση συστήματος υαλουρονικού οξέος σε καρκινικά κύτταρα μαστού Targeting of the hyaluronic acid system in breast cancer cells Κονδύλη, Αικατερίνη Kondyli, Aikaterini Καρκίνος του μαστού Εξωκυττάριος χώρος Υαλουρονικό οξύ Σαλικυλικό οξύ Ενεργά είδη οξυγόνου Breast cancer Extracellular matrix Hyaluronic acid 4-MU Salicylic acid Reactive oxygen species O καρκίνος του μαστού είναι μια ασθένεια που χαρακτηρίζεται από μεγάλη ετερογένεια και αποτελεί τη δεύτερη κύρια αιτία θανάτου στις γυναίκες παγκοσμίως. Σημαντικός παράγοντας κατηγοριοποίησής του είναι η έκφραση του υποδοχέα οιστρογόνων-α (ERα). Μεταστατικοί καρκίνοι μαστού (όπως ο τριπλά αρνητικός καρκίνος του μαστού, TNBC) έχουν τη χειρότερη πρόγνωση εξαιτίας της έλλειψης αποτελεσματικής στοχευμένης θεραπείας τους. Για το λόγο αυτό κρίνεται επιτακτική η ανάγκη για την εύρεση νέων θεραπειών, οι οποίες θα μπορούν απόλυτα και εκλεκτικά να στοχεύουν τα μεταστατικά καρκινικά κύτταρα μαστού χωρίς παρενέργειες. Το υαλουρονικό (HA), ένας γραμμικός ετεροπολυσακχαρίτης, είναι ένα από τα κύρια συστατικά του εξωκυττάριου χώρου (ECM). Η αυξημένη βιοσύνθεση και συσσώρευση ΗΑ, που οφείλονται στην απορρύθμιση των ενζύμων που το συνθέτουν (κυρίως της HAS2), έχουν συσχετισθεί με κακή πρόγνωση σε ασθενείς με μεταστατικό καρκίνο μαστού. Το γεγονός ότι η σίγαση ή αναστολή της HAS2 καταστέλλει τον κακοήθη φαινότυπο των διηθητικών καρκινικών κυττάρων μαστού μας οδήγησε στη μελέτη στρατηγικών, οι οποίες στοχεύουν το σύστημα του ΗΑ. Αυτό μπορεί να επιτευχθεί σε επίπεδο σύνθεσης, με τη χρήση φαρμάκων όπως το 4-MU και τo σαλικυλικό οξύ (SA), τα οποία καταστέλλουν τη δράση της HAS2, μειώνοντας έτσι την ποσότητα του παραγόμενου ΗΑ. Στην παρούσα διπλωματική εργασία χρησιμοποιήθηκαν ERα-αρνητικά μεταστατικά καρκινικά κύτταρα μαστού MDA-MB-231 και Hs578T στα οποία πραγματοποιήθηκε καταστολή βιοσύνθεσης υαλουρονικού οξέος, με τη χρήση 4-MU και SA. Αρχικά, μελετήθηκε η επίδραση των αναστολέων αυτών στη βιωσιμότητα και την κινητικότητα των μεταστατικών καρκινικών κυττάρων μαστού. Προκειμένου να διερευνηθεί περαιτέρω ο υποκείμενος μοριακός μηχανισμός δράσης των αναστολέων στις λειτουργικές ιδιότητες των μεταστατικών καρκινικών κυττάρων μαστού, πραγματοποιήθηκε μελέτη της πιθανής εμπλοκής των ενδοκυττάριων ROS με τη προσθήκη Ν-ακετυλο-κυστεΐνης (NAC), ενός συλλέκτη (scavenger) ενδοκυττάριων ROS. Συμπερασματικά, τα αποτελέσματα της παρούσας μεταπτυχιακής εργασίας, καταδεικνύουν ότι παρά την εξουδετέρωση των παραγόμενων ROS που επάγονται από 4-MU και SA, η NAC δεν ήταν ικανή να αναστρέψει τις αλλαγές στις λειτουργικές ιδιότητες των κυττάρων μετά από κατεργασία τους με τους δύο παράγοντες. Το γεγονός αυτό υποδηλώνει ότι τα ROS δεν φαίνεται να συμμετέχουν δραστικά σε αυτές τις διεργασίες. Breast cancer is a disease which is characterized by high heterogeneity and it is the second leading cause of death among women worldwide. Important factor of its classification is the expression of the Estrogen receptor α (ERα). Metastatic breast cancers (such as triple negative breast cancer, TNBC), have the worst prognosis due to the lack of effective targeted therapies. Therefore, there is an urgent need for new treatments that can completely and selectively target metastatic breast cancer cells with no side effects. Hyaluronic acid (HA), a linear heteropolysaccharide, is one of the principal constituents of extracellular Matrix (ECM). Increased biosynthesis and accumulation of HA, due to the deregulation of hyaluronan-synthesizing enzymes (mainly HAS2), have correlated with poor prognosis of patients with metastatic breast cancer. The fact that silencing or inhibiting HAS2 suppresses the malignant phenotype of invasive breast cancer cells led us to study strategies that target the HA system. This can be achieved at the synthetic level, using drugs such as 4-MU and salicylic acid (SA), which suppress the action of HAS2, thus reducing the amount of HA produced. In the present master thesis MDA-MB-231 and Hs578T metastatic breast cancer cells were used, in which we suppressed HA synthesis, after treatment with 4-MU and SA. Initially, the effect of these inhibitors on the viability and motility of metastatic breast cancer cells was studied. In order to further investigate the underlying molecular mechanism of action of inhibitors on the functional properties of metastatic breast cancer cells, a study of the possible involvement of ROS intracellular cells was performed by the addition of N-acetyl-cysteine (NAC), a scavenger of intracellular ROS . In conclusion, the results of the present postgraduate thesis show that despite the neutralization of the produced ROS, induced by 4-MU and SA, NAC was not able to reverse the changes in the functional properties of the cells after treatment with both agents. This suggests that ROS do not appear to be efficiently involved in these processes. 2021-03-05T13:06:09Z 2021-03-05T13:06:09Z 2021-03-01 http://hdl.handle.net/10889/14606 gr application/pdf |
