| Περίληψη: | Οι μικροσυστοιχίες συμπληρωματικού DNA (cDNA) αποτελούν αποδοτικά και αποτελεσματικά μέσα για την ταυτόχρονη ανάλυση της λειτουργίας δεκάδων χιλιάδων γονιδίων. Μια τυπική cDNA εικόνα μικροσυστοιχιών αποτελεί μια συλλογή πράσινων και κόκκινων κηλίδων (spots) που περιέχουν DNA. Κάθε κηλίδα καταλαμβάνει ένα μικρό τμήμα της εικόνας, με τη μέση τιμή της έντασης της κηλίδας να είναι στενά συνδεδεμένη με το επίπεδο έκφρασης του αντίστοιχου γονιδου. Η κύρια διαδικασία υπολογισμού της έντασης περιλαμβάνει τρία στάδια: Διευθυνσιοδότηση ή κατασκευή πλέγματος (gridding), κατάτμηση (Segmentation) και τέλος η διαδικασία εξαγωγής έντασης.
Στη παρούσα εργασία, η διευθυνσιοδότηση πραγματοποιήθηκε χρησιμοποιώντας μια αυτόματη τεχνική κατασκευής πλέγματος στηριζόμενη στον συνεχή μετασχηματισμό κυματιδίων (CWT). Ποιο συγκεκριμένα,, υπολογίστηκαν τα προφίλ του χ και y άξονα της εικόνας. Δεύτερον, εφαρμόστηκε, σε κάθε προφίλ, ο CWT μετασχηματισμός εώς το 15 επίπεδο, χρησιμοποιώντας daubechies 4 (db4) ως μητρικό κυματίδιο. Τρίτον, υπολογίστηκε το άθροισμα των 15 επιπέδων για κάθε ένα από τα δύο σήματα x και y. Τέταρτον, εφαρμόστηκε στα δύο νέα σήματα τεχνική καταστολής θορύβου με χρήση μετασχηματισμού Wavelet. Τελικά, το κέντρο και όρια της κάθε κηλίδας καθορίστηκαν μέσω του υπολογισμού των τοπικών ελαχίστων και μέγιστων του κάθε σήματος.
Για την κατάτμηση της εικόνας, μια νέα μέθοδος προτάθηκε, η οποία διακρίνεται σε τρία βασικά βήματα: Πρώτον, ο à trous μετασχηματισμός κυματιδίων (AWT) εφαρμόστηκε έως το δεύτερο επίπεδο στην αρχική εικόνα. Δεύτερον, στις λεπτομέρειες (details coefficients) του κάθε επιπέδου εφαρμόστηκε φίλτρο καταστολής θορύβου, προκειμένου να υποβαθμιστεί ο θόρυβος. Τρίτον, η αρχική εικόνα μαζί με τις προσεγγίσεις (approximations) και τις λεπτομέρειες (details) του κάθε επιπέδου εφαρμόστηκαν σε ένα συλλογικό σχήμα (ensemble scheme) στηριζόμενο στο MRF μοντέλο κατάτμησης. Ως τελεστές του σχήματος χρησιμοποιήθηκαν οι: Majority Vote , Min, Product και Probabilistic Product.
Η αξιολόγηση των προτεινόμενων αλγορίθμων πραγματοποιήθηκε με τη χρήση υψηλής ποιότητας εικόνας προσομοίωσης αποτελούμενη από 1040 κηλίδες (spots) με ρεαλιστικά μορφολογικά χαρακτηριστικά, η οποία δημιουργήθηκε σύμφωνα με το μοντέλο προσημείωσης μικροσυστοιχιών του Matlab καθώς και 14 πραγματικές εικόνες, επτά 16-bit grayscale TIFF εικόνες από κάθε κανάλι (κόκκινο και πράσινο), οι οποίες αποκτήθηκαν από την ευρέως διαδεδομένη βάση δεδομένων DERICI. Επιπλέον, προκειμένου να παρατηρηθεί η συμπεριφορά των αλγορίθμων στη παρουσία θορύβου, η απομιμούμενη εικόνα υποβαθμίστηκε με τη προσθήκη λευκού Gaussian θορύβου.
Η ακρίβεια της ακολουθούμενης διαδικασίας κατάτμησης, στη περίπτωση της εικόνας προσομοίωσης, προσδιορίστηκε μέσω του segmentation matching factor (SMF), probability of error (PE) και coefficient of determination (CD) με σεβασμό στη πραγματική κλάση στην οποία ανήκουν (φόντο-υπόβαθρο). Στη περίπτωση των πραγματικών εικόνων η αξιοπιστία των αλγορίθμων προσδιορίστηκε έμμεσα μετρώντας την ένταση κάθε κηλίδας, μέσω του Mean Absolute Error (MAE).
Το σύνολο των αλγορίθμων, εφαρμοσμένο στην απομιμούμενη εικόνα, κατάφερε να οδηγήσει σε καλύτερο προσδιορισμό των κηλίδων σε σχέση με το απλό MRF μοντέλο κατάτμησης. Επιπλέον, ο τελεστής Majority Vote επέτυχε το υψηλότερο ποσοστό σε όλες τις περιπτώσεις, ειδικά σε κελία (cells) με υψηλή παρουσία θορύβου (SMF: 82.69%, PE: 6.60% and CV:0.809 ), ενώ το απλό μοντέλο περιορίστηκε στο χαμηλότερο ποσοστό (SMF:94.87%-82.69%, PE:3.03%-9.85%, CV:0.961-0.729). Στη περίπτωση των πραγματικών εικόνων ο min τελεστής επέτυχε το χαμηλότερο ποσοστό (MAE: 803.96 and Normalized MAE: 0.0738), σε αντίθεση με τον τελεστή Majority Vote, ο οποίος κατάφερε να επιτύχει το υψηλότερο ποσοστό ανάμεσα στους χρησιμοποιούμενους τελεστές (MAE 990.49 and Normalized MAE 0.0738).Επιπλέον όλοι οι προτεινόμενοι αλγόριθμοι κατάφεραν να μειώσουν τη μέση τιμή MAE σε σχέση με το απλό μοντέλο MRF (MAE 1183.50 and Normalized MAE 0,0859).
|
|---|
