Χημική σύνθεση νανοσωμάτων (nanobodies). Μελέτη σύνθεσης του τμήματος 96-123 του νανοσώματος της μπεβασιζουμάμπης (Avastin)
Τα νανοσώματα είναι μία νέα γενιά θεραπευτικών πρωτεϊνών που βασίζονται στα φυσικά αντισώματα. Αποτελούν θραύσματα της βαριάς αλυσίδας φυσικών αντισωμάτων και είναι πλήρως λειτουργικά απουσία της ελαφριάς αλυσίδας. Το Bevacizumab, με εμπορική ονομασία Avastin, είναι ένα εξανθρωπισμένο μονοκλωνικό αν...
| Κύριος συγγραφέας: | |
|---|---|
| Άλλοι συγγραφείς: | |
| Γλώσσα: | Greek |
| Έκδοση: |
2021
|
| Θέματα: | |
| Διαθέσιμο Online: | http://hdl.handle.net/10889/15524 |
| id |
nemertes-10889-15524 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| spelling |
nemertes-10889-155242022-09-05T05:00:38Z Χημική σύνθεση νανοσωμάτων (nanobodies). Μελέτη σύνθεσης του τμήματος 96-123 του νανοσώματος της μπεβασιζουμάμπης (Avastin) Chemical synthesis of nanobodies. Composition study of section 96-123 of bevacizumab (Avastin) nanobody Ξεπλάτη, Ευθυμία Xeplati, Efthymia 2-χλωροτρίτυλο χλωρίδιο ρητίνη (CLTR-Cl) Πεπτιδική σύνθεση σε στερεή φάση (SPPS) Νανοσώματα 2-chlorotrityl chloride resin (CLTR-Cl) Solid phase peptide synthesis (SPPS) Nanobodies Bevacizumab Τα νανοσώματα είναι μία νέα γενιά θεραπευτικών πρωτεϊνών που βασίζονται στα φυσικά αντισώματα. Αποτελούν θραύσματα της βαριάς αλυσίδας φυσικών αντισωμάτων και είναι πλήρως λειτουργικά απουσία της ελαφριάς αλυσίδας. Το Bevacizumab, με εμπορική ονομασία Avastin, είναι ένα εξανθρωπισμένο μονοκλωνικό αντίσωμα, το οποίο συνδέεται με τον αυξητικό παράγοντα του αγγειακού ενδοθηλίου VEGF (Vascular Endothelial Growth Factor) με αποτέλεσμα να αναστέλλει τη σύνδεση του VEGF με τους υποδοχείς του, Flt-1 (VEGFR 1) και KDR (VEGFR 2), στην επιφάνεια των ενδοθηλιακών κυττάρων. Η εξουδετέρωση της βιολογικής δραστηριότητας του VEGF μειώνει την αγγειοποίηση των όγκων και έτσι αναστέλλει την ανάπτυξή τους. Χορηγείται σε τύπους καρκίνου που οδηγούνται από την αγγειογένεση. Η παρούσα μεταπτυχιακή διπλωματική εργασία εξέτασε τη μελέτη σύνθεσης του τμήματος Cys (96) - Ser (123) του νανοσώματος του Avastin. H πεπτιδική αλυσίδα συντέθηκε με συνδυασμό μεθόδων πεπτιδικής σύνθεσης, όπως είναι η σύνθεση σε στερεή φάση, η σύνθεση κατά στάδια και η συμπύκνωση πεπτιδικών τμημάτων σε στερεή και υγρή φάση. Η σύνθεση δοκιμάστηκε να επιτευχθεί με διάφορες προσεγγίσεις, ώστε το πεπτίδιο να παραλειφθεί με την καλύτερη δυνατή απόδοση και καθαρότητα. Η πεπτιδική σύνθεση έγινε επί της 2-χλωροτρίτυλο χλωρίδιο ρητίνης (CLTR-Cl), με την Fmoc/tBu μεθοδολογία. Ο έλεγχος της πορείας της σύνθεσης και της καθαρότητας του συντιθέμενου πεπτιδίου πραγματοποιήθηκε με τη μέθοδο της Υγρής Χρωματογραφίας Υψηλής Επίδοσης Ανάστροφης Φάσης (RP-HPLC) και η ταυτοποίηση των προϊόντων με τη φασματομετρία μάζας ιονισμού από ηλεκτρικό πεδίο με ψεκασμό (ESI-MS). Nanobodies are a new generation of therapeutic proteins based on natural antibodies. They are fragments of the heavy chain of natural antibodies and they are fully functional in the absence of the light chain. Bevacizumab, under the brand name Avastin, is a humanized monoclonal antibody that binds to VEGF (Vascular Endothelial Growth Factor) to block the binding of VEGF to its receptors, Flt-1 (VEGFR 1) and KDR (VEGFR 2), on the surface of endothelial cells. Neutralization of VEGF biological activity reduces the vascularization of tumors and thus inhibits their growth. It is used to treat types of cancer that are caused by angiogenesis. In this postgraduate thesis we studied the synthesis of the Cys (96) - Ser (123) section of the Avastin’s nanobody. The peptide chain was synthesized by a combination of peptide synthesis methods, such as solid phase synthesis, step by step synthesis and condensation of the peptide fragments in solid and liquid phase. The synthesis was tested to be achieved by various approaches, in order to receive the peptide with the high yield and purity. The peptide synthesis was performed on 2-chlorotrityl chloride resin (CLTR-Cl), using the Fmoc / tBu methodology. The control of the synthesis procedure and the purity of the synthesized peptide were achieved by the method of Reversed Phase High Performance Liquid Chromatography (RP-HPLC) and the identification of the product by Electrospray Ionization Mass Spectroscopy (ESI-MS). 2021-11-04T12:38:01Z 2021-11-04T12:38:01Z 2021-11-04 http://hdl.handle.net/10889/15524 gr application/pdf |
| institution |
UPatras |
| collection |
Nemertes |
| language |
Greek |
| topic |
2-χλωροτρίτυλο χλωρίδιο ρητίνη (CLTR-Cl) Πεπτιδική σύνθεση σε στερεή φάση (SPPS) Νανοσώματα 2-chlorotrityl chloride resin (CLTR-Cl) Solid phase peptide synthesis (SPPS) Nanobodies Bevacizumab |
| spellingShingle |
2-χλωροτρίτυλο χλωρίδιο ρητίνη (CLTR-Cl) Πεπτιδική σύνθεση σε στερεή φάση (SPPS) Νανοσώματα 2-chlorotrityl chloride resin (CLTR-Cl) Solid phase peptide synthesis (SPPS) Nanobodies Bevacizumab Ξεπλάτη, Ευθυμία Χημική σύνθεση νανοσωμάτων (nanobodies). Μελέτη σύνθεσης του τμήματος 96-123 του νανοσώματος της μπεβασιζουμάμπης (Avastin) |
| description |
Τα νανοσώματα είναι μία νέα γενιά θεραπευτικών πρωτεϊνών που βασίζονται στα φυσικά αντισώματα. Αποτελούν θραύσματα της βαριάς αλυσίδας φυσικών αντισωμάτων και είναι πλήρως λειτουργικά απουσία της ελαφριάς αλυσίδας. Το Bevacizumab, με εμπορική ονομασία Avastin, είναι ένα εξανθρωπισμένο μονοκλωνικό αντίσωμα, το οποίο συνδέεται με τον αυξητικό παράγοντα του αγγειακού ενδοθηλίου VEGF (Vascular Endothelial Growth Factor) με αποτέλεσμα να αναστέλλει τη σύνδεση του VEGF με τους υποδοχείς του, Flt-1 (VEGFR 1) και KDR (VEGFR 2), στην επιφάνεια των ενδοθηλιακών κυττάρων. Η εξουδετέρωση της βιολογικής δραστηριότητας του VEGF μειώνει την αγγειοποίηση των όγκων και έτσι αναστέλλει την ανάπτυξή τους. Χορηγείται σε τύπους καρκίνου που οδηγούνται από την αγγειογένεση.
Η παρούσα μεταπτυχιακή διπλωματική εργασία εξέτασε τη μελέτη σύνθεσης του τμήματος Cys (96) - Ser (123) του νανοσώματος του Avastin. H πεπτιδική αλυσίδα συντέθηκε με συνδυασμό μεθόδων πεπτιδικής σύνθεσης, όπως είναι η σύνθεση σε στερεή φάση, η σύνθεση κατά στάδια και η συμπύκνωση πεπτιδικών τμημάτων σε στερεή και υγρή φάση. Η σύνθεση δοκιμάστηκε να επιτευχθεί με διάφορες προσεγγίσεις, ώστε το πεπτίδιο να παραλειφθεί με την καλύτερη δυνατή απόδοση και καθαρότητα.
Η πεπτιδική σύνθεση έγινε επί της 2-χλωροτρίτυλο χλωρίδιο ρητίνης (CLTR-Cl), με την Fmoc/tBu μεθοδολογία. Ο έλεγχος της πορείας της σύνθεσης και της καθαρότητας του συντιθέμενου πεπτιδίου πραγματοποιήθηκε με τη μέθοδο της Υγρής Χρωματογραφίας Υψηλής Επίδοσης Ανάστροφης Φάσης (RP-HPLC) και η ταυτοποίηση των προϊόντων με τη φασματομετρία μάζας ιονισμού από ηλεκτρικό πεδίο με ψεκασμό (ESI-MS). |
| author2 |
Xeplati, Efthymia |
| author_facet |
Xeplati, Efthymia Ξεπλάτη, Ευθυμία |
| author |
Ξεπλάτη, Ευθυμία |
| author_sort |
Ξεπλάτη, Ευθυμία |
| title |
Χημική σύνθεση νανοσωμάτων (nanobodies). Μελέτη σύνθεσης του τμήματος 96-123 του νανοσώματος της μπεβασιζουμάμπης (Avastin) |
| title_short |
Χημική σύνθεση νανοσωμάτων (nanobodies). Μελέτη σύνθεσης του τμήματος 96-123 του νανοσώματος της μπεβασιζουμάμπης (Avastin) |
| title_full |
Χημική σύνθεση νανοσωμάτων (nanobodies). Μελέτη σύνθεσης του τμήματος 96-123 του νανοσώματος της μπεβασιζουμάμπης (Avastin) |
| title_fullStr |
Χημική σύνθεση νανοσωμάτων (nanobodies). Μελέτη σύνθεσης του τμήματος 96-123 του νανοσώματος της μπεβασιζουμάμπης (Avastin) |
| title_full_unstemmed |
Χημική σύνθεση νανοσωμάτων (nanobodies). Μελέτη σύνθεσης του τμήματος 96-123 του νανοσώματος της μπεβασιζουμάμπης (Avastin) |
| title_sort |
χημική σύνθεση νανοσωμάτων (nanobodies). μελέτη σύνθεσης του τμήματος 96-123 του νανοσώματος της μπεβασιζουμάμπης (avastin) |
| publishDate |
2021 |
| url |
http://hdl.handle.net/10889/15524 |
| work_keys_str_mv |
AT xeplatēeuthymia chēmikēsynthesēnanosōmatōnnanobodiesmeletēsynthesēstoutmēmatos96123tounanosōmatostēsmpebasizoumampēsavastin AT xeplatēeuthymia chemicalsynthesisofnanobodiescompositionstudyofsection96123ofbevacizumabavastinnanobody |
| _version_ |
1771297129519644672 |
