| Περίληψη: | Το Κακοήθες Υπεζωκοτικό Μεσοθηλίωμα (ΚΥΜ) είναι ένα επιθετικό νεόπλασμα του υπεζωκότα του ανθρώπου. Ο μέσος όρος επιβίωσης αγγίζει τους 9-18 μήνες. Η ανάπτυξή του σχετίζεται κυρίως με την έκθεση σε ίνες αμιάντου και συνοδεύεται με Κακοήθη Υπεζωκοτική Συλλογή (ΚΥΣ). Ο πυρηνικός παράγοντας -κB (NF–κΒ), ενεργοποιημένος, εμπλέκεται στην παθογένεια πολλών κακοηθειών, ωστόσο η πρόσφατη στόχευσή του σε κύτταρα ΚΥΜ με τον αναστολέα πρωτεασώματος Bortezomib, δεν ήταν αρκετή για να αποσαφηνιστεί ο ρόλος του στην ανάπτυξη της νόσου. Η παρούσα εργασία στοχεύει στον προσδιορισμό του ρόλου των κινασών IKKα και IKKβ που εμπλέκονται ενεργά στην ενεργοποίηση του μεταγραφικού παράγοντα -κB χρησιμοποιώντας μοντέλα in vitro γονιδιακής αποσιώπησης και in vivo πρόκλησης ΚΥΜ. Αρχικά, μελετήθηκε το προφίλ έκφρασης του NF–κΒ σε κυτταρικές σειρές ΚΥΜ ανθρώπου και ποντικού με ανοσοαποτύπωση κατά Western. Στη συνέχεια, προσδιορίστηκε η έκφραση των κινασών IKKα και IKKβ με ανοσοϊστοχημεία σε ιστολογικές τομές οι οποίες απομονώθηκαν από ποντικούς C57BL/6 και BALB/c μετά από εμφύτευση ενδοϋπεζωκοτικά των κυτταρικών σειρών ΚΥΜ (AB2, KPM). Κατόπιν, πραγματοποιήθηκε shRNA αποσιώπηση για κάθε κινάση στις 2 καρκινικές κυτταρικές σειρές. Για να προσδιοριστεί ο ρόλος των κινασών στις σειρές AB2&KPM, ελέγχθησαν ο ρυθμός κυτταρικού πολλαπλασιασμού και η ικανότητα δημιουργίας κυτταρικών αποικιών. Τέλος, για να μελετηθεί η συμμετοχή τους στην δημιουργία πρωτοπαθούς όγκου και στην ανάπτυξη ΚΥΜ, τα κύτταρα αυτά ενέθηκαν υποδόρια και ενδοϋπεζωκοτικά σε αντίστοιχους ποντικούς. Παρατηρήθηκε ενεργοποίηση των υπομονάδων του κανονικού και κυρίως του εναλλακτικού μονοπατιού, καθώς επίσης και των κινασών του NF-κB στο ΚΥΜ. Οι δύο υπό μελέτη κινάσες αποδεικνύονται σημαντικές στη λειτουργία των κυτταρικών σειρών ΚΥΜ, με την IKKα να διαδραματίζει σημαντικότερο ρόλο. Απαραίτητη φαίνεται η δράση τους τόσο στην ανάπτυξη του πρωτοπαθούς όγκου όσο και στην δημιουργία και εξέλιξη του ΚΥΜ. Το γεγονός αυτό καθιστά τις κινάσες πιθανούς θεραπευτικούς στόχους.
|
|---|
