In vitro μελέτη της επίδρασης της νικοτίνης στα επίπεδα του υποδοχέα ACE2

• Κύριος συγγραφέας: Πετρούτσου, Κωνσταντίνα
• Άλλοι συγγραφείς: Petroutsou, Konstantina
• Γλώσσα: Greek
• Έκδοση: 2022
• Θέματα: Νικοτίνη; Κορονοϊοί; Ηλεκτρονικά τσιγάρα; Nicotine; ACE2; SARS-CoV-2

Η νικοτίνη αποτελεί μια ευρέως χρησιμοποιούμενη ουσία, καθώς αποτελεί συστατικό των τσιγάρων και του ατμού των ηλεκτρονικών τσιγάρων. Είναι σημαντικό να μελετηθεί η επίδραση της νικοτίνης στα επίπεδα έκφρασης τόσο του μεμβρανικού, όσο και του διαλυτού υποδοχέα ACE2, δεδομένου του ότι ο SARS-CoV-2 χρειάζεται τον ACE2 για να εισέλθει στα κύτταρα του αναπνευστικού επιθηλίου. O ACE2 ανιχνεύεται στη μεμβράνη διαφόρων κυτταρικών τύπων, συμπεριλαμβανομένων των κυττάρων του αναπνευστικού επιθηλίου, τα οποία εκφράζουν, επίσης, τον νικοτινικό υποδοχέα της ακετυλοχολίνης (nAChR). Στην παρούσα εργασία, αρχικά προσδιορίστηκε με τη μέθοδο qRT-PCR, η παρουσία του α7 nAChR στα κύτταρα Α549 μέσω της μεταγραφής του γονιδίου CHRNA7, το οποίο κωδικοποιεί την α7 υπομονάδα του υποδοχέα. Στη συνέχεια, πραγματοποιήθηκε επίδραση με διαφορετικές συγκεντρώσεις διαλύματος νικοτίνης και ενός α7 ανταγωνιστή νικοτίνης, της α-μπουγκαροτοξίνης, σε διαφορετικούς χρόνους, σε κύτταρα Α549, τα οποία φέρουν χαρακτηριστικά κυψελιδικών επιθηλιακών κυττάρων. Με χρήση της μεθόδου ELISA, έγινε έλεγχος της έκφρασης του μεμβρανικού ACE2 που βρίσκεται στην κυτταρική επιφάνεια των Α549 κυττάρων και του διαλυτού ACE2 που βρίσκεται στο υπερκείμενο της κυτταροκαλλιέργειας Α549. Τα αποτελέσματα που προέκυψαν, δε δείχνουν μια σαφή συσχέτιση μεταξύ των επιπέδων έκφρασης του μεμβρανικού ACE2 στην επιφάνεια των Α549 κυττάρων και των χορηγούμενων συγκεντρώσεων νικοτίνης. Ακόμη, έκφραση του διαλυτού ACE2 δεν προέκυψε σε κανένα από τα πειράματα που πραγματοποιήθηκαν. Τέλος, πραγματοποιήθηκαν πειράματα με εφαρμογή του πρωτοκόλλου Health Canada Intense με επίδραση ατμού ηλεκτρονικού τσιγάρου, με υγρό αναπλήρωσης που περιείχε νικοτίνη, σε καλλιέργεια ALI που προσομοιάζει τις συνθήκες του επιθηλίου των αεραγωγών. Σε αυτά τα πειράματα δεν ανιχνεύθηκε έκφραση καμίας μορφής του ACE2.