Αξιολόγηση της μεθόδου του περιβαλλοντικού γενετικού υλικού (eDNA) για την εκτίμηση του κρισίμως κινδυνεύοντος χαρόφυτου Chara hispida f. corfuensis σε μια ανατολική λιμνοθάλασσα (Καϊάφας)
Η εκτίμηση της βιοποικιλότητας των εσωτερικών υδάτων χρησιμοποιώντας την καινοτόμο μέθοδο του eDNA προσφέρει ένα νέο ισχυρό εργαλείο τόσο στην απευθείας ανίχνευση ειδών από δείγματα νερού, όσο και στην έρευνα της ποιότητας των υδάτων. Τα υδάτινα μακρόφυτα χρησιμοποιούνται ευρέως ως βιοδείκτες της π...
Κύριος συγγραφέας: | |
---|---|
Άλλοι συγγραφείς: | |
Γλώσσα: | Greek |
Έκδοση: |
2022
|
Θέματα: | |
Διαθέσιμο Online: | http://hdl.handle.net/10889/16229 |
id |
nemertes-10889-16229 |
---|---|
record_format |
dspace |
institution |
UPatras |
collection |
Nemertes |
language |
Greek |
topic |
Βιοποικιλότητα Υδάτινα μακρόφυτα eDNA Charophyte |
spellingShingle |
Βιοποικιλότητα Υδάτινα μακρόφυτα eDNA Charophyte Κωνσταντινίδης, Κωστής Αξιολόγηση της μεθόδου του περιβαλλοντικού γενετικού υλικού (eDNA) για την εκτίμηση του κρισίμως κινδυνεύοντος χαρόφυτου Chara hispida f. corfuensis σε μια ανατολική λιμνοθάλασσα (Καϊάφας) |
description |
Η εκτίμηση της βιοποικιλότητας των εσωτερικών υδάτων χρησιμοποιώντας την καινοτόμο μέθοδο του eDNA προσφέρει ένα νέο ισχυρό εργαλείο τόσο στην απευθείας ανίχνευση ειδών από δείγματα νερού, όσο και στην έρευνα της ποιότητας των υδάτων. Τα υδάτινα μακρόφυτα χρησιμοποιούνται ευρέως ως βιοδείκτες της ποιότητας των υδάτων και της οικολογικής ακεραιότητας των υδάτινων οικοσυστημάτων (λίμνες, ποτάμια, λιμνοθάλασσες). Το χαρόφυτο Chara hispida f. corfuensis είναι ένα βυθισμένο φυτό με υψηλή σπουδαιότητα διατήρησης, καθώς κατατάσσεται ως κρισίμως κινδυνεύον σύμφωνα με την IUCN. Σχηματίσει εκτεταμένους υποβρύχιους λειμώνες, ωστόσο στη λιμνοθάλασσα του Καϊάφα, οι εισροές από τις γεωργικές καλλιέργειες, η αύξηση του θρεπτικού φορτίου στην υδάτινη στήλη, καθώς και άλλες ανθρωπογενείς πιέσεις, έχουν επιφέρει μείωση στον πληθυσμό του είδους. Στην παρούσα εργασία παρουσιάζεται μια μέθοδος παρακολούθησης που βασίζεται στο eDNA, χωρίς να διαταράσσεται το φυσικό ενδιαίτημα του είδους, όπως συμβαίνει με τις συμβατικές μεθόδους βιοπαρακολούθησης του. Αρχικά πραγματοποιήθηκε συλλογή επιφανειακού δείγματος νερού και φυτικού υλικού των υδρόβιων μακρόφυτων Potamogeton pectinatus, Najas marina, Chara hispida f. corfuensis από τέσσερεις παρόχθιους σταθμούς στη λιμνοθάλασσα του Καϊάφα. Σχεδιάστηκαν ειδο- ειδικοί εκκινητές (matK) για το υπό μελέτη χαρόφυτο. Στη συνέχεια τα δείγματα υποβλήθηκαν σε διήθηση με φίλτρα νιτρικής κυτταρίνης για την εξαγωγή του περιβαλλοντικού DNA (eDNA). Το υλικό αυτό χρησιμοποιήθηκε στην PCR αξιοποιώντας τόσο ειδο- ειδικούς εκκινητές που ανιχνεύουν το γονίδιο (matK) barcode του Chara hispida f. corfuensis, όσο και γενικευμένους εκκινητές για το ίδιο γονίδιο, αλλά και το γονίδιο ITS που ανιχνεύουν μια πληθώρα φυτικών ειδών. Τα αποτελέσματα έδειξαν επιτυχή ενίσχυση μόνο στα ζεύγη των γενικευμένων εκκινητών, δείχνοντας ότι στους συγκεκριμένους σταθμούς δεν συναντάται το κινδυνεύον είδος Chara hispida f. corfuensis. |
author2 |
Konstantinidis, Kostis |
author_facet |
Konstantinidis, Kostis Κωνσταντινίδης, Κωστής |
author |
Κωνσταντινίδης, Κωστής |
author_sort |
Κωνσταντινίδης, Κωστής |
title |
Αξιολόγηση της μεθόδου του περιβαλλοντικού γενετικού υλικού (eDNA) για την εκτίμηση του κρισίμως κινδυνεύοντος χαρόφυτου Chara hispida f. corfuensis σε μια ανατολική λιμνοθάλασσα (Καϊάφας) |
title_short |
Αξιολόγηση της μεθόδου του περιβαλλοντικού γενετικού υλικού (eDNA) για την εκτίμηση του κρισίμως κινδυνεύοντος χαρόφυτου Chara hispida f. corfuensis σε μια ανατολική λιμνοθάλασσα (Καϊάφας) |
title_full |
Αξιολόγηση της μεθόδου του περιβαλλοντικού γενετικού υλικού (eDNA) για την εκτίμηση του κρισίμως κινδυνεύοντος χαρόφυτου Chara hispida f. corfuensis σε μια ανατολική λιμνοθάλασσα (Καϊάφας) |
title_fullStr |
Αξιολόγηση της μεθόδου του περιβαλλοντικού γενετικού υλικού (eDNA) για την εκτίμηση του κρισίμως κινδυνεύοντος χαρόφυτου Chara hispida f. corfuensis σε μια ανατολική λιμνοθάλασσα (Καϊάφας) |
title_full_unstemmed |
Αξιολόγηση της μεθόδου του περιβαλλοντικού γενετικού υλικού (eDNA) για την εκτίμηση του κρισίμως κινδυνεύοντος χαρόφυτου Chara hispida f. corfuensis σε μια ανατολική λιμνοθάλασσα (Καϊάφας) |
title_sort |
αξιολόγηση της μεθόδου του περιβαλλοντικού γενετικού υλικού (edna) για την εκτίμηση του κρισίμως κινδυνεύοντος χαρόφυτου chara hispida f. corfuensis σε μια ανατολική λιμνοθάλασσα (καϊάφας) |
publishDate |
2022 |
url |
http://hdl.handle.net/10889/16229 |
work_keys_str_mv |
AT kōnstantinidēskōstēs axiologēsētēsmethodoutouperiballontikougenetikouylikouednagiatēnektimēsētoukrisimōskindyneuontoscharophytoucharahispidafcorfuensissemiaanatolikēlimnothalassakaïaphas AT kōnstantinidēskōstēs evaluationoftheenvirinmentaldnaednamethodtoestimatethedistributionofthecriticallyendangeredcharophytecharahispidafcorfuensisinaneasternmediterraneanlagoonkaiafas |
_version_ |
1771297304495521792 |
spelling |
nemertes-10889-162292022-09-05T20:19:59Z Αξιολόγηση της μεθόδου του περιβαλλοντικού γενετικού υλικού (eDNA) για την εκτίμηση του κρισίμως κινδυνεύοντος χαρόφυτου Chara hispida f. corfuensis σε μια ανατολική λιμνοθάλασσα (Καϊάφας) Evaluation of the envirinmental DNA (eDNA) method to estimate the distribution of the critically endangered charophyte Chara hispida f. corfuensis in an eastern mediterranean lagoon (Kaiafas) Κωνσταντινίδης, Κωστής Konstantinidis, Kostis Βιοποικιλότητα Υδάτινα μακρόφυτα eDNA Charophyte Η εκτίμηση της βιοποικιλότητας των εσωτερικών υδάτων χρησιμοποιώντας την καινοτόμο μέθοδο του eDNA προσφέρει ένα νέο ισχυρό εργαλείο τόσο στην απευθείας ανίχνευση ειδών από δείγματα νερού, όσο και στην έρευνα της ποιότητας των υδάτων. Τα υδάτινα μακρόφυτα χρησιμοποιούνται ευρέως ως βιοδείκτες της ποιότητας των υδάτων και της οικολογικής ακεραιότητας των υδάτινων οικοσυστημάτων (λίμνες, ποτάμια, λιμνοθάλασσες). Το χαρόφυτο Chara hispida f. corfuensis είναι ένα βυθισμένο φυτό με υψηλή σπουδαιότητα διατήρησης, καθώς κατατάσσεται ως κρισίμως κινδυνεύον σύμφωνα με την IUCN. Σχηματίσει εκτεταμένους υποβρύχιους λειμώνες, ωστόσο στη λιμνοθάλασσα του Καϊάφα, οι εισροές από τις γεωργικές καλλιέργειες, η αύξηση του θρεπτικού φορτίου στην υδάτινη στήλη, καθώς και άλλες ανθρωπογενείς πιέσεις, έχουν επιφέρει μείωση στον πληθυσμό του είδους. Στην παρούσα εργασία παρουσιάζεται μια μέθοδος παρακολούθησης που βασίζεται στο eDNA, χωρίς να διαταράσσεται το φυσικό ενδιαίτημα του είδους, όπως συμβαίνει με τις συμβατικές μεθόδους βιοπαρακολούθησης του. Αρχικά πραγματοποιήθηκε συλλογή επιφανειακού δείγματος νερού και φυτικού υλικού των υδρόβιων μακρόφυτων Potamogeton pectinatus, Najas marina, Chara hispida f. corfuensis από τέσσερεις παρόχθιους σταθμούς στη λιμνοθάλασσα του Καϊάφα. Σχεδιάστηκαν ειδο- ειδικοί εκκινητές (matK) για το υπό μελέτη χαρόφυτο. Στη συνέχεια τα δείγματα υποβλήθηκαν σε διήθηση με φίλτρα νιτρικής κυτταρίνης για την εξαγωγή του περιβαλλοντικού DNA (eDNA). Το υλικό αυτό χρησιμοποιήθηκε στην PCR αξιοποιώντας τόσο ειδο- ειδικούς εκκινητές που ανιχνεύουν το γονίδιο (matK) barcode του Chara hispida f. corfuensis, όσο και γενικευμένους εκκινητές για το ίδιο γονίδιο, αλλά και το γονίδιο ITS που ανιχνεύουν μια πληθώρα φυτικών ειδών. Τα αποτελέσματα έδειξαν επιτυχή ενίσχυση μόνο στα ζεύγη των γενικευμένων εκκινητών, δείχνοντας ότι στους συγκεκριμένους σταθμούς δεν συναντάται το κινδυνεύον είδος Chara hispida f. corfuensis. Recently, the innovative method of eDNA for the direct detection of species-specific DNA from water, has been applied in many monitoring surveys of aquatic species, throughout the world. Aquatic macrophytes are widely used as indicators of water quality and ecological integrity in all types of freshwater ecosystems (lakes, rivers, lagoons). Chara hispida f. corfuensis is a submerged plant of high conservation importance as it is classified as critically endangered according to IUCN. It used to form extensive and dense beds in the lagoon of Kaiafas, but continuous nutrient discharges from agricultures and other anthropogenic pressures have diminished its population. Here, we present a method based on eDNA to biomonitor this important species without disturbing its’ natural habitat, as it often happens during conventional survey methods. Water sample was collected from the surface of Kaiafas as also plant tissue from aquatic macrophytes Chara hispida f. corfuensis, Najas marina and Potamogeton pectinatus. Water samples were filtrated through cellulose nitrate filter membranes in order to capture eDNA. Then, eDNA was used as a template in PCR combining not only species- specific primers that amplifies the barcode- gene (matK) of Chara hispida f. corfuensis, but also universal primers that amplifies a more conservative region of gene matK and ITS. Results showed positive amplification only with universal primers, indicated that Chara hispida f. corfuensis is not present in the particular habitat of the water sampling station. 2022-06-10T05:15:45Z 2022-06-10T05:15:45Z 2022-03-20 http://hdl.handle.net/10889/16229 gr application/pdf |