| Περίληψη: | Σύμφωνα με τον Παγκόσμιο Οργανισμό Υγείας, σημαντικές επιδημίες και εξάρσεις της ηπατίτιδας Ε έχουν καταγραφεί τα τελευταία χρόνια, με 20 εκατομμύρια λοιμώξεις ετησίως. Η μόλυνση με τον ιό της Ηπατίτιδας Ε είναι η πιο κοινή αιτία εμφάνισης οξείας μορφής φλεγμονής του ήπατος σε ολόκληρο τον κόσμο. Η οξεία ηπατίτιδα μπορεί να εξελιχθεί σε χρόνια ηπατίτιδα, κίρρωση και ηπατική ανεπάρκεια. Η μετάδοση του ιού στις αναπτυσσόμενες χώρες γίνεται μέσω της κοπρανοστοματικής οδού λόγω των κακών συνθηκών υγιεινής ενώ στις αναπτυγμένες χώρες ο ιός μεταδίδεται κυρίως μέσω της τροφής λόγω της κατανάλωσης άψητου κρέατος από μολυσμένα ζώα. Απουσία, εγκεκριμένης θεραπευτικής φαρμακευτικής αγωγής, η θεραπεία της μόλυνσης για τον ιό HEV περιλαμβάνει την εφαρμογή ριμπαβιρίνης, με σκοπό την αναστολή της δράσης της εξαρτώμενης από το RNA, RNA πολυμεράσης, με πολλά υποσχόμενα αποτελέσματα σε ασθενείς με οξεία και με χρόνια ηπατίτιδα Ε καθώς και μυκοφαινολικό οξύ με ευρεία αντιιϊκή δράση, για την αναστολή της
σύνθεσης της γουανίνης. Στην παρούσα μεταπτυχιακή εργασία πραγματοποιήθηκε η διερεύνηση πολυπεπτιδίων της επικράτειας της μεθυλομεταφοράσης του ιού της ηπατίτιδας Ε ως προς τη δομική ακεραιότητά τους και την λειτουργικότητά τους. Οι μεθυλομεταφοράσες είναι ένζυμα, τα οποία καταλύουν τη μεταφορά μιας μεθυλικής ομάδας από το SAM σε μια μεγάλη ποικιλία υποστρωμάτων όπως DNA, RNA, πρωτεΐνες, μικρά μόρια και λιπίδια. Ο τομέας της μεθυλομεταφοράσης του ιού HEV περιλαμβάνει μια περιοχή από 60 έως 240 αμινοξικά κατάλοιπα, εδράζεται στο αμινοτελικό άκρο του ανοιχτού πλαισίου ανάγνωσης 1 του ιού και ανήκει εξελικτικά και δομικά στην υπερ-οικογένεια «Rossmann Fold Methylotransferase». Οι μεθυλομεταφοράσες αυτής της κατηγορίας υιοθετούν στον χώρο την πτυχή Rossmann, η οποία χαρακτηρίζεται από μια αρχιτεκτονική «β-α-β» με παράλληλους β κλώνους και παρεμβαλλόμενες α έλικες. Καταλύουν τον σχηματισμό του καλύμματος του RNA, το οποίο είναι ζωτικής σημασίας για τη μολυσματικότητά των ιών. Η μεθυλομεταφοράση του ιού HEV είναι ένας ισχυρός ανταγωνιστής των ιντερφερονών τύπου Ι, οι οποίες είναι η πρώτη γραμμή άμυνας του ξενιστή κατά της ιογενούς λοίμωξης.
Παρατίθενται πειράματα εύρεσης κατάλληλων συνθηκών έκφρασης, παρασκευής και απομόνωσης πολυπεπτιδίων της επικράτειας της μεθυλομεταφοράσης. Πιο συγκεκριμένα διερευνώνται ποικίλλου μεγέθους ανασυνδυασμένα πολυπεπτίδια της μεθυλομεταφοράσης του ιού της Ηπατίτιδας Ε ως προς την διαλυτότητα και τη σταθερότητα τους σε διάφορες συνθήκες και σε πληθώρα διαλυμάτων, για την επίτευξη NMR δομικής μελέτης και την αποσαφήνιση των λειτουργικών ιδιοτήτων της μεθυλομεταφοράση
|
|---|
