Αυτοματοποιημένη μικροσκοπική ανάλυση βιομορίων κυτταρικού κύκλου

Σημαντικά εργαλεία στην βιολογική έρευνα αποτελούν τα μικροσκόπια. Οι διάφορες τεχνολογίες που έχουν αναπτυχθεί ανά τα χρόνια δίνουν την δυνατότητα εξαγωγής βιολογικής γνώσης, αξιοποιώντας διάφορες ιδιότητες του φωτός και των βιομορίων. Μια ιδιαίτερη οικογένεια φωτονικών μικροσκοπίων αποτελούν τα μι...

Πλήρης περιγραφή

Λεπτομέρειες βιβλιογραφικής εγγραφής
Κύριος συγγραφέας: Πρέζα, Ουρανία
Άλλοι συγγραφείς: Preza, Ourania
Γλώσσα:Greek
Έκδοση: 2022
Θέματα:
Διαθέσιμο Online:https://hdl.handle.net/10889/23741
id nemertes-10889-23741
record_format dspace
institution UPatras
collection Nemertes
language Greek
topic Μικροσκοπία
Ανάλυση εικόνας
Αυτοματοποίηση
Κυτταρικός κύκλος
Microscopy
Image analysis
Automation
Cell cycle
spellingShingle Μικροσκοπία
Ανάλυση εικόνας
Αυτοματοποίηση
Κυτταρικός κύκλος
Microscopy
Image analysis
Automation
Cell cycle
Πρέζα, Ουρανία
Αυτοματοποιημένη μικροσκοπική ανάλυση βιομορίων κυτταρικού κύκλου
description Σημαντικά εργαλεία στην βιολογική έρευνα αποτελούν τα μικροσκόπια. Οι διάφορες τεχνολογίες που έχουν αναπτυχθεί ανά τα χρόνια δίνουν την δυνατότητα εξαγωγής βιολογικής γνώσης, αξιοποιώντας διάφορες ιδιότητες του φωτός και των βιομορίων. Μια ιδιαίτερη οικογένεια φωτονικών μικροσκοπίων αποτελούν τα μικροσκόπια φθορισμού. Στα μικροσκόπια αυτά αξιοποιείται η ιδιότητα συγκεκριμένων μορίων να φθορίζουν σε συγκεκριμένα μήκη κύματος ύστερα από διέγερση. Επισημαίνοντας πρωτεΐνες με φθορίζοντα μόρια, καθίσταται δυνατός ο χωροχρονικός εντοπισμός των πρωτεϊνών ενδιαφέροντος. Με την είσοδο των πειραμάτων υψηλής απόδοσης (HCS) δόθηκε η δυνατότητα εκτέλεσης πολυπαραμετρικών πειραμάτων. Η αποθήκευση και ανάλυση του όγκου δεδομένων που προκύπτουν από τέτοιου είδους πειράματα, αποτελεί πρόκληση. Η ανάλυση γίνεται συχνά από εξειδικευμένους ερευνητές λόγω της πολυπλοκότητας των δεδομένων. Για την επεξεργασία των εικόνων απαιτούνται αλγόριθμοι που είναι προσαρμόσιμοι στην ποικιλομορφία των δειγμάτων που μελετώνται. Στην παρούσα εργασία παρουσιάζονται μια σειρά από αυτοματοποιημένα εργαλεία ανάλυσης μορίων επιδιόρθωσης του DNA σε κύτταρα που υφίστανται απορρύθμιση της αδειοδότησης της αντιγραφής. Πιο συγκεκριμένα, αναπτύχθηκαν εργαλεία για την αναγνώριση πυρήνων και υπο-πυρηνικών δομών, χωρικής συσχέτισης των δομών μεταξύ τους και μέτρηση της έντασης φθορισμού τους. Αξιοποιήθηκαν εικόνες από διαφορετικά μικροσκόπια, δύο (xy) και τριών (xyz) διαστάσεων, πολλαπλών χρωματικών καναλιών (R,G,B). Τα εργαλεία αναπτύχθηκαν με σκοπό την χρήση τους από μη εξειδικευμένους ερευνητές, δίνοντάς τους την δυνατότητα ελέγχου/εποπτείας όλης της πειραματικής διαδικασίας από την προετοιμασία των δειγμάτων ως την εξαγωγή βιολογικής γνώσης. Για τον λόγο αυτό, σε όλες τις ροές εργασίας υπάρχει παράθυρο αλληλεπίδρασης του χρήστη με τις παραμέτρους ανάλυσης, χωρίς να υπάρχει άμεση τροποποίηση του κώδικα.
author2 Preza, Ourania
author_facet Preza, Ourania
Πρέζα, Ουρανία
author Πρέζα, Ουρανία
author_sort Πρέζα, Ουρανία
title Αυτοματοποιημένη μικροσκοπική ανάλυση βιομορίων κυτταρικού κύκλου
title_short Αυτοματοποιημένη μικροσκοπική ανάλυση βιομορίων κυτταρικού κύκλου
title_full Αυτοματοποιημένη μικροσκοπική ανάλυση βιομορίων κυτταρικού κύκλου
title_fullStr Αυτοματοποιημένη μικροσκοπική ανάλυση βιομορίων κυτταρικού κύκλου
title_full_unstemmed Αυτοματοποιημένη μικροσκοπική ανάλυση βιομορίων κυτταρικού κύκλου
title_sort αυτοματοποιημένη μικροσκοπική ανάλυση βιομορίων κυτταρικού κύκλου
publishDate 2022
url https://hdl.handle.net/10889/23741
work_keys_str_mv AT prezaourania automatopoiēmenēmikroskopikēanalysēbiomoriōnkyttarikoukyklou
AT prezaourania automatedmicroscopicanalysisofcellcyclemolecules
_version_ 1771297163030036480
spelling nemertes-10889-237412022-11-08T04:35:16Z Αυτοματοποιημένη μικροσκοπική ανάλυση βιομορίων κυτταρικού κύκλου Automated microscopic analysis of cell cycle molecules Πρέζα, Ουρανία Preza, Ourania Μικροσκοπία Ανάλυση εικόνας Αυτοματοποίηση Κυτταρικός κύκλος Microscopy Image analysis Automation Cell cycle Σημαντικά εργαλεία στην βιολογική έρευνα αποτελούν τα μικροσκόπια. Οι διάφορες τεχνολογίες που έχουν αναπτυχθεί ανά τα χρόνια δίνουν την δυνατότητα εξαγωγής βιολογικής γνώσης, αξιοποιώντας διάφορες ιδιότητες του φωτός και των βιομορίων. Μια ιδιαίτερη οικογένεια φωτονικών μικροσκοπίων αποτελούν τα μικροσκόπια φθορισμού. Στα μικροσκόπια αυτά αξιοποιείται η ιδιότητα συγκεκριμένων μορίων να φθορίζουν σε συγκεκριμένα μήκη κύματος ύστερα από διέγερση. Επισημαίνοντας πρωτεΐνες με φθορίζοντα μόρια, καθίσταται δυνατός ο χωροχρονικός εντοπισμός των πρωτεϊνών ενδιαφέροντος. Με την είσοδο των πειραμάτων υψηλής απόδοσης (HCS) δόθηκε η δυνατότητα εκτέλεσης πολυπαραμετρικών πειραμάτων. Η αποθήκευση και ανάλυση του όγκου δεδομένων που προκύπτουν από τέτοιου είδους πειράματα, αποτελεί πρόκληση. Η ανάλυση γίνεται συχνά από εξειδικευμένους ερευνητές λόγω της πολυπλοκότητας των δεδομένων. Για την επεξεργασία των εικόνων απαιτούνται αλγόριθμοι που είναι προσαρμόσιμοι στην ποικιλομορφία των δειγμάτων που μελετώνται. Στην παρούσα εργασία παρουσιάζονται μια σειρά από αυτοματοποιημένα εργαλεία ανάλυσης μορίων επιδιόρθωσης του DNA σε κύτταρα που υφίστανται απορρύθμιση της αδειοδότησης της αντιγραφής. Πιο συγκεκριμένα, αναπτύχθηκαν εργαλεία για την αναγνώριση πυρήνων και υπο-πυρηνικών δομών, χωρικής συσχέτισης των δομών μεταξύ τους και μέτρηση της έντασης φθορισμού τους. Αξιοποιήθηκαν εικόνες από διαφορετικά μικροσκόπια, δύο (xy) και τριών (xyz) διαστάσεων, πολλαπλών χρωματικών καναλιών (R,G,B). Τα εργαλεία αναπτύχθηκαν με σκοπό την χρήση τους από μη εξειδικευμένους ερευνητές, δίνοντάς τους την δυνατότητα ελέγχου/εποπτείας όλης της πειραματικής διαδικασίας από την προετοιμασία των δειγμάτων ως την εξαγωγή βιολογικής γνώσης. Για τον λόγο αυτό, σε όλες τις ροές εργασίας υπάρχει παράθυρο αλληλεπίδρασης του χρήστη με τις παραμέτρους ανάλυσης, χωρίς να υπάρχει άμεση τροποποίηση του κώδικα. Microscopes constitute an integral tool in biological research. The various technologies that have been developed over the years make possible the extraction of knowledge by making use of several properties of light and biomolecules. A particular family of photonic microscopes are fluorescent microscopes. These microscopes make use of the property of particular molecules to fluoresce on certain wavelength after stimulation. Protein tagging with fluorescent molecules allows the spatio-temporal tracking of the proteins of interest. With the advent of High Content Screening (HCS) technology, conduction of multi-parameter experiments has been made possible. Storing and analyzing the datasets that occur from HCS is challenging. Analysis of such experiments is often performed by specialists due to data complexity. Image processing requires algorithms adaptable to the variability of the samples. In this study, a series of automated tools are introduced in regards to the analysis of DNA repair molecules in cells undergoing deregulation of replication. Specifically, there have been developed tools for nuclear and sub-nuclear segmentation, spatial correlation among the structures and the measurement of their fluorescence. Analysis was performed on 2D (xy), 3D (xyz) multi-channel (R,G,B) images, from different microscopes. The tools were developed with the aim of being used by non-specialists, giving the opportunity to the biology researchers to control/oversee the whole experimental procedure, from the sample preparation to the extraction of biological knowledge. For this reason, there is a user interface for every pipeline in order for the user to import the analysis parameters without interfering directly with the code. 2022-11-07T10:08:37Z 2022-11-07T10:08:37Z 2022-10-11 https://hdl.handle.net/10889/23741 el Attribution 3.0 United States http://creativecommons.org/licenses/by/3.0/us/ application/pdf