Μελέτη της επίδρασης της rhTSH στον πολλαπλασιασμό κυττάρων θυρεοειδούς που υπερεκφράζουν τον υποδοχέα της TSH
Ο θυρεοειδής αδένας είναι ένα από τα σημαντικότερα όργανα του ανθρώπου στη ρύθμιση του μεταβολισμού, μέσω της έκκρισης των ορμονών Τ3 και Τ4 που έχουν ποικίλες βιοχημικές δράσεις. Παράλληλα, ο ίδιος όντας ρυθμιζόμενος από την υπόφυση μέσω της θυρεοτρόπου ορμόνης που διεγείρει την εκκριτική του δραστ...
| Κύριος συγγραφέας: | |
|---|---|
| Άλλοι συγγραφείς: | |
| Γλώσσα: | Greek |
| Έκδοση: |
2023
|
| Θέματα: | |
| Διαθέσιμο Online: | https://hdl.handle.net/10889/24903 |
| id |
nemertes-10889-24903 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| institution |
UPatras |
| collection |
Nemertes |
| language |
Greek |
| topic |
Καρκίνος Θυρεοειδής αδένας Θηλώδες καρκίνωμα του θυρεοειδούς Θυρεοτροπίνη Υποδοχείς Κυτταρικές σειρές Ενδοκρινολογία Βιολογία κυττάρου Βιολογία του καρκίνου Μοριακή βιολογία Cancer Thyroid gland Papillary thyroid carcinoma Thyrotropin TSH rhTSH Cell lines Tet on advanced Lentivirus Thyrotropin receptors TSHR Endocrinology Cancer biology Cell biology Molecular biology |
| spellingShingle |
Καρκίνος Θυρεοειδής αδένας Θηλώδες καρκίνωμα του θυρεοειδούς Θυρεοτροπίνη Υποδοχείς Κυτταρικές σειρές Ενδοκρινολογία Βιολογία κυττάρου Βιολογία του καρκίνου Μοριακή βιολογία Cancer Thyroid gland Papillary thyroid carcinoma Thyrotropin TSH rhTSH Cell lines Tet on advanced Lentivirus Thyrotropin receptors TSHR Endocrinology Cancer biology Cell biology Molecular biology Καλαμπούνιας, Γεώργιος Μελέτη της επίδρασης της rhTSH στον πολλαπλασιασμό κυττάρων θυρεοειδούς που υπερεκφράζουν τον υποδοχέα της TSH |
| description |
Ο θυρεοειδής αδένας είναι ένα από τα σημαντικότερα όργανα του ανθρώπου στη ρύθμιση του μεταβολισμού, μέσω της έκκρισης των ορμονών Τ3 και Τ4 που έχουν ποικίλες βιοχημικές δράσεις. Παράλληλα, ο ίδιος όντας ρυθμιζόμενος από την υπόφυση μέσω της θυρεοτρόπου ορμόνης που διεγείρει την εκκριτική του δραστηριότητα, βρίσκεται διαρκώς σε μία ισορροπία μιτογόνων και αντιμιτογόνων σημάτων που ρυθμίζουν τη δραστηριότητα των κυττάρων του, την επιβίωσή τους και τον πολλαπλασιασμό τους. Η εμφάνιση καρκίνου στο θυρεοειδή αδένα είναι μία σπάνια μορφή καρκίνου -αναλογιζόμενοι τα ποσοστά καρκίνων του προστάτη και του πνεύμονα-, ωστόσο, παραμένει η πιο συχνή μορφή καρκινώματος του ενδοκρινικού συστήματος και η αντιμετώπισή του είναι πολύπλευρη, αποτελούμενη από αφαίρεση του αδένα ή τμήματος του, χορήγηση ραδιενεργού ιωδίου και τέλος καταστολή της θυρεοτρόπου ορμόνης που επάγει την επιβίωση και τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων του.
Η καταστολή της θυρεοτρόπου ορμόνης γίνεται με χορήγηση λεβοθυροξίνης και παρότι απαραίτητη για την αντιμετώπιση του καρκίνου οδηγεί σε υποκλινικό υπερθυρεοειδισμό. Η θεραπεία αυτή έχει πολλά ανεπιθύμητα συμπτώματα που εκτείνονται από παθήσεις του μυοσκελετικού συστήματος μέχρι καρδιαγγειακά νοσήματα. Λαμβάνοντας υπόψη τις παραπάνω επιπλοκές, φαίνεται ότι η υπάρχουσα θεραπεία δεν αποτελεί την ιδανική λύση για την καταστολή της ορμόνης και συνάμα του πολλαπλασιασμού των θυρεοειδικών κυττάρων, γεννώντας παράλληλα το ερώτημα εάν η θυρεοτροπίνη έχει πράγματι ογκογόνο δράση ή εάν αυτή η λειτουργία αποκτάται συνεργιστικά με άλλους αυξητικούς παράγοντες.
Στα πλαίσια επομένως της παραπάνω ιδέας, διερευνάται η επίδραση που έχει η ορμόνη στον πολλαπλασιασμό θυρεοειδικών κυττάρων, τόσο σε καρκινικά κύτταρα προερχόμενα από θηλώδες καρκίνωμα του θυρεοειδούς -που είναι η συχνότερη μορφή καρκίνου- όσο και σε φυσιολογικά κύτταρα. Διερευνώντας το ρόλο της θυρεοτροπίνης στη μίτωση και με σκοπό να πολλαπλασιαστεί το πιθανό μιτογόνο σήμα, στην παρούσα μελέτη έγινε υπερέκφραση του υποδοχέα της ορμόνης στα προαναφερθέντα κύτταρα με χρήση του συστήματος επαγόμενης έκφρασης Tet-On Advanced. Το εργαλείο αυτό μεταφέρει επιθυμητά γονίδια μέσα σε κύτταρα αξιοποιώντας τη λειτουργία των λεντιιών. Έπειτα, η ρύθμιση του γονιδίου μπορεί να ελεγχθεί εξωγενώς με τη χρήση του αντιβιοτικού δοξυκυκλίνη, καθώς το ένθετο γονίδιο είναι τοποθετημένο σε μία περιοχή με χαρακτηριστικά οπερονίου και εκμεταλλευόμενοι τη δράση του αντιβιοτικού ως επαγωγέα προκαλούμε την έκφραση του.
Τα πειραματικά δεδομένα, προερχόμενα από τις εφαρμοσθείσες συνθήκες καλλιέργειας των κυττάρων, δεν κατέδειξαν άμεση σύνδεση μεταξύ της παρουσίας της θυρεοτρόπου ορμόνης ως μοναδικό αυξητικό παράγοντα και του κυτταρικού πολλαπλασιασμού, επαληθεύοντας προηγούμενες μελέτες του εργαστηρίου και καταδεικνύοντας πώς η θυρεοτροπίνη δεν αποτελεί επαρκή συνθήκη για την επαγωγή της μίτωσης. |
| author2 |
Kalampounias, Georgios |
| author_facet |
Kalampounias, Georgios Καλαμπούνιας, Γεώργιος |
| author |
Καλαμπούνιας, Γεώργιος |
| author_sort |
Καλαμπούνιας, Γεώργιος |
| title |
Μελέτη της επίδρασης της rhTSH στον πολλαπλασιασμό κυττάρων θυρεοειδούς που υπερεκφράζουν τον υποδοχέα της TSH |
| title_short |
Μελέτη της επίδρασης της rhTSH στον πολλαπλασιασμό κυττάρων θυρεοειδούς που υπερεκφράζουν τον υποδοχέα της TSH |
| title_full |
Μελέτη της επίδρασης της rhTSH στον πολλαπλασιασμό κυττάρων θυρεοειδούς που υπερεκφράζουν τον υποδοχέα της TSH |
| title_fullStr |
Μελέτη της επίδρασης της rhTSH στον πολλαπλασιασμό κυττάρων θυρεοειδούς που υπερεκφράζουν τον υποδοχέα της TSH |
| title_full_unstemmed |
Μελέτη της επίδρασης της rhTSH στον πολλαπλασιασμό κυττάρων θυρεοειδούς που υπερεκφράζουν τον υποδοχέα της TSH |
| title_sort |
μελέτη της επίδρασης της rhtsh στον πολλαπλασιασμό κυττάρων θυρεοειδούς που υπερεκφράζουν τον υποδοχέα της tsh |
| publishDate |
2023 |
| url |
https://hdl.handle.net/10889/24903 |
| work_keys_str_mv |
AT kalampouniasgeōrgios meletētēsepidrasēstēsrhtshstonpollaplasiasmokyttarōnthyreoeidouspouyperekphrazountonypodocheatēstsh AT kalampouniasgeōrgios studyingtheproliferativeeffectsofrhtshonthyroidcellsthatoverexpressthetshreceptor |
| _version_ |
1771297271237836800 |
| spelling |
nemertes-10889-249032023-06-08T09:00:54Z Μελέτη της επίδρασης της rhTSH στον πολλαπλασιασμό κυττάρων θυρεοειδούς που υπερεκφράζουν τον υποδοχέα της TSH Studying the proliferative effects of rhTSH on thyroid cells that over-express the TSH receptor Καλαμπούνιας, Γεώργιος Kalampounias, Georgios Καρκίνος Θυρεοειδής αδένας Θηλώδες καρκίνωμα του θυρεοειδούς Θυρεοτροπίνη Υποδοχείς Κυτταρικές σειρές Ενδοκρινολογία Βιολογία κυττάρου Βιολογία του καρκίνου Μοριακή βιολογία Cancer Thyroid gland Papillary thyroid carcinoma Thyrotropin TSH rhTSH Cell lines Tet on advanced Lentivirus Thyrotropin receptors TSHR Endocrinology Cancer biology Cell biology Molecular biology Ο θυρεοειδής αδένας είναι ένα από τα σημαντικότερα όργανα του ανθρώπου στη ρύθμιση του μεταβολισμού, μέσω της έκκρισης των ορμονών Τ3 και Τ4 που έχουν ποικίλες βιοχημικές δράσεις. Παράλληλα, ο ίδιος όντας ρυθμιζόμενος από την υπόφυση μέσω της θυρεοτρόπου ορμόνης που διεγείρει την εκκριτική του δραστηριότητα, βρίσκεται διαρκώς σε μία ισορροπία μιτογόνων και αντιμιτογόνων σημάτων που ρυθμίζουν τη δραστηριότητα των κυττάρων του, την επιβίωσή τους και τον πολλαπλασιασμό τους. Η εμφάνιση καρκίνου στο θυρεοειδή αδένα είναι μία σπάνια μορφή καρκίνου -αναλογιζόμενοι τα ποσοστά καρκίνων του προστάτη και του πνεύμονα-, ωστόσο, παραμένει η πιο συχνή μορφή καρκινώματος του ενδοκρινικού συστήματος και η αντιμετώπισή του είναι πολύπλευρη, αποτελούμενη από αφαίρεση του αδένα ή τμήματος του, χορήγηση ραδιενεργού ιωδίου και τέλος καταστολή της θυρεοτρόπου ορμόνης που επάγει την επιβίωση και τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων του. Η καταστολή της θυρεοτρόπου ορμόνης γίνεται με χορήγηση λεβοθυροξίνης και παρότι απαραίτητη για την αντιμετώπιση του καρκίνου οδηγεί σε υποκλινικό υπερθυρεοειδισμό. Η θεραπεία αυτή έχει πολλά ανεπιθύμητα συμπτώματα που εκτείνονται από παθήσεις του μυοσκελετικού συστήματος μέχρι καρδιαγγειακά νοσήματα. Λαμβάνοντας υπόψη τις παραπάνω επιπλοκές, φαίνεται ότι η υπάρχουσα θεραπεία δεν αποτελεί την ιδανική λύση για την καταστολή της ορμόνης και συνάμα του πολλαπλασιασμού των θυρεοειδικών κυττάρων, γεννώντας παράλληλα το ερώτημα εάν η θυρεοτροπίνη έχει πράγματι ογκογόνο δράση ή εάν αυτή η λειτουργία αποκτάται συνεργιστικά με άλλους αυξητικούς παράγοντες. Στα πλαίσια επομένως της παραπάνω ιδέας, διερευνάται η επίδραση που έχει η ορμόνη στον πολλαπλασιασμό θυρεοειδικών κυττάρων, τόσο σε καρκινικά κύτταρα προερχόμενα από θηλώδες καρκίνωμα του θυρεοειδούς -που είναι η συχνότερη μορφή καρκίνου- όσο και σε φυσιολογικά κύτταρα. Διερευνώντας το ρόλο της θυρεοτροπίνης στη μίτωση και με σκοπό να πολλαπλασιαστεί το πιθανό μιτογόνο σήμα, στην παρούσα μελέτη έγινε υπερέκφραση του υποδοχέα της ορμόνης στα προαναφερθέντα κύτταρα με χρήση του συστήματος επαγόμενης έκφρασης Tet-On Advanced. Το εργαλείο αυτό μεταφέρει επιθυμητά γονίδια μέσα σε κύτταρα αξιοποιώντας τη λειτουργία των λεντιιών. Έπειτα, η ρύθμιση του γονιδίου μπορεί να ελεγχθεί εξωγενώς με τη χρήση του αντιβιοτικού δοξυκυκλίνη, καθώς το ένθετο γονίδιο είναι τοποθετημένο σε μία περιοχή με χαρακτηριστικά οπερονίου και εκμεταλλευόμενοι τη δράση του αντιβιοτικού ως επαγωγέα προκαλούμε την έκφραση του. Τα πειραματικά δεδομένα, προερχόμενα από τις εφαρμοσθείσες συνθήκες καλλιέργειας των κυττάρων, δεν κατέδειξαν άμεση σύνδεση μεταξύ της παρουσίας της θυρεοτρόπου ορμόνης ως μοναδικό αυξητικό παράγοντα και του κυτταρικού πολλαπλασιασμού, επαληθεύοντας προηγούμενες μελέτες του εργαστηρίου και καταδεικνύοντας πώς η θυρεοτροπίνη δεν αποτελεί επαρκή συνθήκη για την επαγωγή της μίτωσης. The thyroid gland is one of the most important human organs in metabolism regulation, though the excretion of the hormones T3 and T4, which display plenty of biochemical effects. At the same time, the thyroid is regulated by the pituitary gland, which releases the hormone TSH that induces secretory activity, and the whole gland is at the equilibrium of mitogenic and antimitogenic signals, which regulate its cells activity, survival, and proliferation. The occurrence of thyroid cancer is generally rare- considering the percentages of pulmonary and prostate cancer-, however, it remains the most common case of endocrinal cancer, demanding a multilayer therapeutic approach consisting of partial or total thyroid gland removal, administration of radioactive iodine and suppression of the TSH release. The suppression of thyrotropin is possible by administrating levothyroxine and even though it is necessary to localize and mitigate the cancer effects, it causes homoclinic hyperthyroidism. This approach is followed by many side effects ranging from musculoskeletal problems to cardiovascular diseases. In view of these effects, the current therapeutic methods are not the ideal solution for the suppression of the hormone and of the thyroid cell proliferation, raising the question of whether the thyrotropin is actually the molecule inducing mitosis and cancer or whether this function is mediated by other growth factors, working synergistically with TSH. In the context of this idea, we investigated the role of thyrotropin in cell proliferation both at cells from papillary thyroid carcinoma tumors -this kind of cancer is the most common form of thyroid carcinoma- and normal thyroid cells. Additionally, by trying to analyze the exact role of TSH in this process and in order to multiply the mitogenic signal, we increased the expression and synthesis of the TSH receptor protein using the Tet-On Advanced system. This is a biotechnology tool designed to transfer genes inside cells, using the mechanisms of lentiviruses. The regulation of the gene can be directed externally with the administration of the antibiotic doxycyclin. This is possible because the inserted gene is positioned in a locus containing an operon, whose operation we exploit by adding doxycyclin in order to produce the protein coded by our gene. The data from our laboratory experiments, at least with our cell culture techniques and methods, do not indicate a direct correlation between the presence of TSH as the sole growth factor and cell proliferation, a result that is corroborated by older laboratory studies. 2023-04-10T07:33:41Z 2023-04-10T07:33:41Z 2021-09-29 https://hdl.handle.net/10889/24903 el application/pdf |
