Συγκριτική, in vivo και in vitro, ανάλυση της λειτουργίας των νευρικών βλαστικών κυττάρων του ενήλικου εγκεφάλου εργαστηριακών μυών και τρωκτικών του γένους Microtus

Τα Νευρικά Βλαστικά και Προγονικά Κύτταρα (ΝΒΠΚ) εντοπίζονται στον εγκέφαλο των ε-νήλικων θηλαστικών σε εξειδικευμένες νευρογεννητικές ζώνες ή φωλιές, ενισχύοντας την όσφρηση, τη μνήμη και τη μάθηση καθώς και την επαναμυελίνωση των νευρώνων έπειτα από τραυματισμό. Πρόσφατα ερευνητικά δεδομένα υποδει...

Πλήρης περιγραφή

Λεπτομέρειες βιβλιογραφικής εγγραφής
Κύριος συγγραφέας: Ανδρουτσοπούλου, Θεοδοσία-Παναγιώτα
Άλλοι συγγραφείς: Androutsopoulou, Theodosia-Panagiota
Γλώσσα:Greek
Έκδοση: 2023
Θέματα:
Διαθέσιμο Online:https://hdl.handle.net/10889/25060
id nemertes-10889-25060
record_format dspace
institution UPatras
collection Nemertes
language Greek
topic Ενήλικη νευρογένεση
Υποεπενδυματική ζώνη
Νευρικά βλαστικά κύτταρα
Άγρια τρωκτικά
Adult neurogenesis
Subependymal zone
Neural stem cells
Wild rodents
spellingShingle Ενήλικη νευρογένεση
Υποεπενδυματική ζώνη
Νευρικά βλαστικά κύτταρα
Άγρια τρωκτικά
Adult neurogenesis
Subependymal zone
Neural stem cells
Wild rodents
Ανδρουτσοπούλου, Θεοδοσία-Παναγιώτα
Συγκριτική, in vivo και in vitro, ανάλυση της λειτουργίας των νευρικών βλαστικών κυττάρων του ενήλικου εγκεφάλου εργαστηριακών μυών και τρωκτικών του γένους Microtus
description Τα Νευρικά Βλαστικά και Προγονικά Κύτταρα (ΝΒΠΚ) εντοπίζονται στον εγκέφαλο των ε-νήλικων θηλαστικών σε εξειδικευμένες νευρογεννητικές ζώνες ή φωλιές, ενισχύοντας την όσφρηση, τη μνήμη και τη μάθηση καθώς και την επαναμυελίνωση των νευρώνων έπειτα από τραυματισμό. Πρόσφατα ερευνητικά δεδομένα υποδεικνύουν πως η λειτουργία των κυττάρων αυτών επηρεάζεται από πληθώρα εξωγενών παραγόντων, όπως η άσκηση, το στρες και οι περιβαλλοντικές συνθήκες. Στην παρούσα εργασία ερευνούμε την υπόθεση τα ΝΒΠΚ των εργαστηριακών μυών να παραμέ-νουν σε ανενεργή κατάσταση, καθώς η διαβίωσή τους πραγματοποιείται σε αυστηρά ελεγχόμενες συνθήκες. Για τη διερεύνηση της υπόθεσης, αξιοποιούνται εργαστηριακοί μύες καθώς και άγρια τρωκτικά του είδους Microtus thomasi, τα οποία είναι προσαρμοσμένα στην υπόγεια διαβίωση. Με ανοσοϊστοχημικές χρώσεις αναλύονται δείγματα εγκεφαλικού ιστού εντοπίζοντας εξειδικευμένους δείκτες υπεύθυνους για τον κυτταρικό πολλαπλασιασμό (PCNA, Ki67) καθώς και την ταυτότητα των νευρικών βλαστικών και προγονικών κυττάρων (SOX2, DCX, GFAP), δίνοντας έμφαση στην Υποεπενδυματική Ζώνη των πλάγιων τοιχωμάτων των πλάγιων κοιλιών του εγκεφάλου. Επιπλέον, από τα ίδια πειραματικά ζώα, καλλιεργούνται τα ΝΒΠΚ σε in vitro συνθήκες, αμέσως μετά την α-πομόνωσή τους από τον εγκεφαλικό ιστό καθώς και έπειτα από δύο ανακαλλιέργειες, αξιολογώντας παρόμοιους δείκτες. Παρόλο που η δομή και η σύσταση της Υποεπενδυματικής Ζώνης δεν εμφανί-ζει σημαντικές διαφορές ανάμεσα στις δύο πειραματικές ομάδες, η πυκνότητα και η δραστηριότητα των ΝΒΠΚ των Microtus thomasi εμφανίζεται δραματικά μειωμένη σε σχέση με τα εργαστηριακά ζώα. Επίσης, η προσπάθεια καλλιέργειας των ΝΒΠΚ των Microtus thomasi ολοκληρώθηκε με επι-τυχία, σημειώνοντας λειτουργικές και μορφολογικές διαφορές. Οι ιστολογικές αναλύσεις σε συν-δυασμό με τα δεδομένα των κυτταροκαλλιεργειών, τονίζουν την σπουδαιότητα του μικροπεριβάλ-λοντος της φωλιάς, με όλους τους παράγοντες αύξησης και επιβίωσης. Τα πειραματικά μας δεδομένα υποδεικνύουν την επιρροή των εξωτερικών, περιβαλλοντικών παραμέτρων στην νευρογεννητική φωλιά των ΝΒΠΚ και μολονότι η έμφυτη ή η δυναμική φύση των παρατηρηθείσων διαφορών πα-ραμένει ζήτημα δύσκολο να απαντηθεί, τίθεται επί τάπητος η προσέγγισή του με ανάλογο τύπο ανα-λύσεων.
author2 Androutsopoulou, Theodosia-Panagiota
author_facet Androutsopoulou, Theodosia-Panagiota
Ανδρουτσοπούλου, Θεοδοσία-Παναγιώτα
author Ανδρουτσοπούλου, Θεοδοσία-Παναγιώτα
author_sort Ανδρουτσοπούλου, Θεοδοσία-Παναγιώτα
title Συγκριτική, in vivo και in vitro, ανάλυση της λειτουργίας των νευρικών βλαστικών κυττάρων του ενήλικου εγκεφάλου εργαστηριακών μυών και τρωκτικών του γένους Microtus
title_short Συγκριτική, in vivo και in vitro, ανάλυση της λειτουργίας των νευρικών βλαστικών κυττάρων του ενήλικου εγκεφάλου εργαστηριακών μυών και τρωκτικών του γένους Microtus
title_full Συγκριτική, in vivo και in vitro, ανάλυση της λειτουργίας των νευρικών βλαστικών κυττάρων του ενήλικου εγκεφάλου εργαστηριακών μυών και τρωκτικών του γένους Microtus
title_fullStr Συγκριτική, in vivo και in vitro, ανάλυση της λειτουργίας των νευρικών βλαστικών κυττάρων του ενήλικου εγκεφάλου εργαστηριακών μυών και τρωκτικών του γένους Microtus
title_full_unstemmed Συγκριτική, in vivo και in vitro, ανάλυση της λειτουργίας των νευρικών βλαστικών κυττάρων του ενήλικου εγκεφάλου εργαστηριακών μυών και τρωκτικών του γένους Microtus
title_sort συγκριτική, in vivo και in vitro, ανάλυση της λειτουργίας των νευρικών βλαστικών κυττάρων του ενήλικου εγκεφάλου εργαστηριακών μυών και τρωκτικών του γένους microtus
publishDate 2023
url https://hdl.handle.net/10889/25060
work_keys_str_mv AT androutsopouloutheodosiapanagiōta synkritikēinvivokaiinvitroanalysētēsleitourgiastōnneurikōnblastikōnkyttarōntouenēlikouenkephalouergastēriakōnmyōnkaitrōktikōntougenousmicrotus
AT androutsopouloutheodosiapanagiōta invivoandinvitrocomparativeanalysisoftheneuralstemcellsfunctionbetweenlabmiceandrodentsofthegenusmicrotus
_version_ 1771297254095716352
spelling nemertes-10889-250602023-06-14T03:56:00Z Συγκριτική, in vivo και in vitro, ανάλυση της λειτουργίας των νευρικών βλαστικών κυττάρων του ενήλικου εγκεφάλου εργαστηριακών μυών και τρωκτικών του γένους Microtus In vivo and in vitro comparative analysis of the neural stem cells function between lab mice and rodents of the genus Microtus Ανδρουτσοπούλου, Θεοδοσία-Παναγιώτα Androutsopoulou, Theodosia-Panagiota Ενήλικη νευρογένεση Υποεπενδυματική ζώνη Νευρικά βλαστικά κύτταρα Άγρια τρωκτικά Adult neurogenesis Subependymal zone Neural stem cells Wild rodents Τα Νευρικά Βλαστικά και Προγονικά Κύτταρα (ΝΒΠΚ) εντοπίζονται στον εγκέφαλο των ε-νήλικων θηλαστικών σε εξειδικευμένες νευρογεννητικές ζώνες ή φωλιές, ενισχύοντας την όσφρηση, τη μνήμη και τη μάθηση καθώς και την επαναμυελίνωση των νευρώνων έπειτα από τραυματισμό. Πρόσφατα ερευνητικά δεδομένα υποδεικνύουν πως η λειτουργία των κυττάρων αυτών επηρεάζεται από πληθώρα εξωγενών παραγόντων, όπως η άσκηση, το στρες και οι περιβαλλοντικές συνθήκες. Στην παρούσα εργασία ερευνούμε την υπόθεση τα ΝΒΠΚ των εργαστηριακών μυών να παραμέ-νουν σε ανενεργή κατάσταση, καθώς η διαβίωσή τους πραγματοποιείται σε αυστηρά ελεγχόμενες συνθήκες. Για τη διερεύνηση της υπόθεσης, αξιοποιούνται εργαστηριακοί μύες καθώς και άγρια τρωκτικά του είδους Microtus thomasi, τα οποία είναι προσαρμοσμένα στην υπόγεια διαβίωση. Με ανοσοϊστοχημικές χρώσεις αναλύονται δείγματα εγκεφαλικού ιστού εντοπίζοντας εξειδικευμένους δείκτες υπεύθυνους για τον κυτταρικό πολλαπλασιασμό (PCNA, Ki67) καθώς και την ταυτότητα των νευρικών βλαστικών και προγονικών κυττάρων (SOX2, DCX, GFAP), δίνοντας έμφαση στην Υποεπενδυματική Ζώνη των πλάγιων τοιχωμάτων των πλάγιων κοιλιών του εγκεφάλου. Επιπλέον, από τα ίδια πειραματικά ζώα, καλλιεργούνται τα ΝΒΠΚ σε in vitro συνθήκες, αμέσως μετά την α-πομόνωσή τους από τον εγκεφαλικό ιστό καθώς και έπειτα από δύο ανακαλλιέργειες, αξιολογώντας παρόμοιους δείκτες. Παρόλο που η δομή και η σύσταση της Υποεπενδυματικής Ζώνης δεν εμφανί-ζει σημαντικές διαφορές ανάμεσα στις δύο πειραματικές ομάδες, η πυκνότητα και η δραστηριότητα των ΝΒΠΚ των Microtus thomasi εμφανίζεται δραματικά μειωμένη σε σχέση με τα εργαστηριακά ζώα. Επίσης, η προσπάθεια καλλιέργειας των ΝΒΠΚ των Microtus thomasi ολοκληρώθηκε με επι-τυχία, σημειώνοντας λειτουργικές και μορφολογικές διαφορές. Οι ιστολογικές αναλύσεις σε συν-δυασμό με τα δεδομένα των κυτταροκαλλιεργειών, τονίζουν την σπουδαιότητα του μικροπεριβάλ-λοντος της φωλιάς, με όλους τους παράγοντες αύξησης και επιβίωσης. Τα πειραματικά μας δεδομένα υποδεικνύουν την επιρροή των εξωτερικών, περιβαλλοντικών παραμέτρων στην νευρογεννητική φωλιά των ΝΒΠΚ και μολονότι η έμφυτη ή η δυναμική φύση των παρατηρηθείσων διαφορών πα-ραμένει ζήτημα δύσκολο να απαντηθεί, τίθεται επί τάπητος η προσέγγισή του με ανάλογο τύπο ανα-λύσεων. Postnatal brain Neural Stem and Progenitor Cells (pbNSPCs) cluster within stem cell niches con-tributing to odour recognition, learning, memory, and myelination, with their activity being modi-fied by exercise, stress, and environmental enrichment. Here, we investigate the hypothesis that lab-mouse NSPCs might remain in a “tamed”, hypoactive status, due to their maintenance in very con-trolled conditions. Lab mice and Microtus thomasi animals are utilized, the latter being a fossorial species. Brain samples are analyzed by immunohistochemical staining, for markers specific for cell proliferation (PCNA, Ki67) and neural progenitor identity (SOX2, DCX and GFAP), focusing on the Subependymal Zone (SEZ). Furthermore, we culture NSPCs from the same animals and we as-sess similar markers immediately after isolation but also after two passages. Even though Subepen-dymal Zone structure and constitution do not exhibit great differences between the two animal spe-cies, the Microtus thomasi pbNSPCs density and activity, based on our sample, tend to be dramati-cally decreased when compared to Lab mice. We have also confirmed the ability to culture NSPCs from wild animals and we describe differences both in terms of morphology and behavior. Both in vitro and histological data combined emphasize the crucial role of the neurogenic niche microenvi-ronment and its survival and growth factors. Our data indicate that the activity of pools of postnatal brain NSPCs are affected by external “lifestyle” stimuli. Whether such differences are hard-wired in NSPCs or are continuously maintained remains open but can be addressed by this type of analysis. 2023-06-13T05:54:42Z 2023-06-13T05:54:42Z 2023-06-12 https://hdl.handle.net/10889/25060 el application/pdf