Συγκριτική, in vivo και in vitro, ανάλυση της λειτουργίας των νευρικών βλαστικών κυττάρων του ενήλικου εγκεφάλου εργαστηριακών μυών και τρωκτικών του γένους Microtus
Τα Νευρικά Βλαστικά και Προγονικά Κύτταρα (ΝΒΠΚ) εντοπίζονται στον εγκέφαλο των ε-νήλικων θηλαστικών σε εξειδικευμένες νευρογεννητικές ζώνες ή φωλιές, ενισχύοντας την όσφρηση, τη μνήμη και τη μάθηση καθώς και την επαναμυελίνωση των νευρώνων έπειτα από τραυματισμό. Πρόσφατα ερευνητικά δεδομένα υποδει...
Κύριος συγγραφέας: | |
---|---|
Άλλοι συγγραφείς: | |
Γλώσσα: | Greek |
Έκδοση: |
2023
|
Θέματα: | |
Διαθέσιμο Online: | https://hdl.handle.net/10889/25060 |
id |
nemertes-10889-25060 |
---|---|
record_format |
dspace |
institution |
UPatras |
collection |
Nemertes |
language |
Greek |
topic |
Ενήλικη νευρογένεση Υποεπενδυματική ζώνη Νευρικά βλαστικά κύτταρα Άγρια τρωκτικά Adult neurogenesis Subependymal zone Neural stem cells Wild rodents |
spellingShingle |
Ενήλικη νευρογένεση Υποεπενδυματική ζώνη Νευρικά βλαστικά κύτταρα Άγρια τρωκτικά Adult neurogenesis Subependymal zone Neural stem cells Wild rodents Ανδρουτσοπούλου, Θεοδοσία-Παναγιώτα Συγκριτική, in vivo και in vitro, ανάλυση της λειτουργίας των νευρικών βλαστικών κυττάρων του ενήλικου εγκεφάλου εργαστηριακών μυών και τρωκτικών του γένους Microtus |
description |
Τα Νευρικά Βλαστικά και Προγονικά Κύτταρα (ΝΒΠΚ) εντοπίζονται στον εγκέφαλο των ε-νήλικων θηλαστικών σε εξειδικευμένες νευρογεννητικές ζώνες ή φωλιές, ενισχύοντας την όσφρηση, τη μνήμη και τη μάθηση καθώς και την επαναμυελίνωση των νευρώνων έπειτα από τραυματισμό. Πρόσφατα ερευνητικά δεδομένα υποδεικνύουν πως η λειτουργία των κυττάρων αυτών επηρεάζεται από πληθώρα εξωγενών παραγόντων, όπως η άσκηση, το στρες και οι περιβαλλοντικές συνθήκες. Στην παρούσα εργασία ερευνούμε την υπόθεση τα ΝΒΠΚ των εργαστηριακών μυών να παραμέ-νουν σε ανενεργή κατάσταση, καθώς η διαβίωσή τους πραγματοποιείται σε αυστηρά ελεγχόμενες συνθήκες. Για τη διερεύνηση της υπόθεσης, αξιοποιούνται εργαστηριακοί μύες καθώς και άγρια τρωκτικά του είδους Microtus thomasi, τα οποία είναι προσαρμοσμένα στην υπόγεια διαβίωση. Με ανοσοϊστοχημικές χρώσεις αναλύονται δείγματα εγκεφαλικού ιστού εντοπίζοντας εξειδικευμένους δείκτες υπεύθυνους για τον κυτταρικό πολλαπλασιασμό (PCNA, Ki67) καθώς και την ταυτότητα των νευρικών βλαστικών και προγονικών κυττάρων (SOX2, DCX, GFAP), δίνοντας έμφαση στην Υποεπενδυματική Ζώνη των πλάγιων τοιχωμάτων των πλάγιων κοιλιών του εγκεφάλου. Επιπλέον, από τα ίδια πειραματικά ζώα, καλλιεργούνται τα ΝΒΠΚ σε in vitro συνθήκες, αμέσως μετά την α-πομόνωσή τους από τον εγκεφαλικό ιστό καθώς και έπειτα από δύο ανακαλλιέργειες, αξιολογώντας παρόμοιους δείκτες. Παρόλο που η δομή και η σύσταση της Υποεπενδυματικής Ζώνης δεν εμφανί-ζει σημαντικές διαφορές ανάμεσα στις δύο πειραματικές ομάδες, η πυκνότητα και η δραστηριότητα των ΝΒΠΚ των Microtus thomasi εμφανίζεται δραματικά μειωμένη σε σχέση με τα εργαστηριακά ζώα. Επίσης, η προσπάθεια καλλιέργειας των ΝΒΠΚ των Microtus thomasi ολοκληρώθηκε με επι-τυχία, σημειώνοντας λειτουργικές και μορφολογικές διαφορές. Οι ιστολογικές αναλύσεις σε συν-δυασμό με τα δεδομένα των κυτταροκαλλιεργειών, τονίζουν την σπουδαιότητα του μικροπεριβάλ-λοντος της φωλιάς, με όλους τους παράγοντες αύξησης και επιβίωσης. Τα πειραματικά μας δεδομένα υποδεικνύουν την επιρροή των εξωτερικών, περιβαλλοντικών παραμέτρων στην νευρογεννητική φωλιά των ΝΒΠΚ και μολονότι η έμφυτη ή η δυναμική φύση των παρατηρηθείσων διαφορών πα-ραμένει ζήτημα δύσκολο να απαντηθεί, τίθεται επί τάπητος η προσέγγισή του με ανάλογο τύπο ανα-λύσεων. |
author2 |
Androutsopoulou, Theodosia-Panagiota |
author_facet |
Androutsopoulou, Theodosia-Panagiota Ανδρουτσοπούλου, Θεοδοσία-Παναγιώτα |
author |
Ανδρουτσοπούλου, Θεοδοσία-Παναγιώτα |
author_sort |
Ανδρουτσοπούλου, Θεοδοσία-Παναγιώτα |
title |
Συγκριτική, in vivo και in vitro, ανάλυση της λειτουργίας των νευρικών βλαστικών κυττάρων του ενήλικου εγκεφάλου εργαστηριακών μυών και τρωκτικών του γένους Microtus |
title_short |
Συγκριτική, in vivo και in vitro, ανάλυση της λειτουργίας των νευρικών βλαστικών κυττάρων του ενήλικου εγκεφάλου εργαστηριακών μυών και τρωκτικών του γένους Microtus |
title_full |
Συγκριτική, in vivo και in vitro, ανάλυση της λειτουργίας των νευρικών βλαστικών κυττάρων του ενήλικου εγκεφάλου εργαστηριακών μυών και τρωκτικών του γένους Microtus |
title_fullStr |
Συγκριτική, in vivo και in vitro, ανάλυση της λειτουργίας των νευρικών βλαστικών κυττάρων του ενήλικου εγκεφάλου εργαστηριακών μυών και τρωκτικών του γένους Microtus |
title_full_unstemmed |
Συγκριτική, in vivo και in vitro, ανάλυση της λειτουργίας των νευρικών βλαστικών κυττάρων του ενήλικου εγκεφάλου εργαστηριακών μυών και τρωκτικών του γένους Microtus |
title_sort |
συγκριτική, in vivo και in vitro, ανάλυση της λειτουργίας των νευρικών βλαστικών κυττάρων του ενήλικου εγκεφάλου εργαστηριακών μυών και τρωκτικών του γένους microtus |
publishDate |
2023 |
url |
https://hdl.handle.net/10889/25060 |
work_keys_str_mv |
AT androutsopouloutheodosiapanagiōta synkritikēinvivokaiinvitroanalysētēsleitourgiastōnneurikōnblastikōnkyttarōntouenēlikouenkephalouergastēriakōnmyōnkaitrōktikōntougenousmicrotus AT androutsopouloutheodosiapanagiōta invivoandinvitrocomparativeanalysisoftheneuralstemcellsfunctionbetweenlabmiceandrodentsofthegenusmicrotus |
_version_ |
1771297254095716352 |
spelling |
nemertes-10889-250602023-06-14T03:56:00Z Συγκριτική, in vivo και in vitro, ανάλυση της λειτουργίας των νευρικών βλαστικών κυττάρων του ενήλικου εγκεφάλου εργαστηριακών μυών και τρωκτικών του γένους Microtus In vivo and in vitro comparative analysis of the neural stem cells function between lab mice and rodents of the genus Microtus Ανδρουτσοπούλου, Θεοδοσία-Παναγιώτα Androutsopoulou, Theodosia-Panagiota Ενήλικη νευρογένεση Υποεπενδυματική ζώνη Νευρικά βλαστικά κύτταρα Άγρια τρωκτικά Adult neurogenesis Subependymal zone Neural stem cells Wild rodents Τα Νευρικά Βλαστικά και Προγονικά Κύτταρα (ΝΒΠΚ) εντοπίζονται στον εγκέφαλο των ε-νήλικων θηλαστικών σε εξειδικευμένες νευρογεννητικές ζώνες ή φωλιές, ενισχύοντας την όσφρηση, τη μνήμη και τη μάθηση καθώς και την επαναμυελίνωση των νευρώνων έπειτα από τραυματισμό. Πρόσφατα ερευνητικά δεδομένα υποδεικνύουν πως η λειτουργία των κυττάρων αυτών επηρεάζεται από πληθώρα εξωγενών παραγόντων, όπως η άσκηση, το στρες και οι περιβαλλοντικές συνθήκες. Στην παρούσα εργασία ερευνούμε την υπόθεση τα ΝΒΠΚ των εργαστηριακών μυών να παραμέ-νουν σε ανενεργή κατάσταση, καθώς η διαβίωσή τους πραγματοποιείται σε αυστηρά ελεγχόμενες συνθήκες. Για τη διερεύνηση της υπόθεσης, αξιοποιούνται εργαστηριακοί μύες καθώς και άγρια τρωκτικά του είδους Microtus thomasi, τα οποία είναι προσαρμοσμένα στην υπόγεια διαβίωση. Με ανοσοϊστοχημικές χρώσεις αναλύονται δείγματα εγκεφαλικού ιστού εντοπίζοντας εξειδικευμένους δείκτες υπεύθυνους για τον κυτταρικό πολλαπλασιασμό (PCNA, Ki67) καθώς και την ταυτότητα των νευρικών βλαστικών και προγονικών κυττάρων (SOX2, DCX, GFAP), δίνοντας έμφαση στην Υποεπενδυματική Ζώνη των πλάγιων τοιχωμάτων των πλάγιων κοιλιών του εγκεφάλου. Επιπλέον, από τα ίδια πειραματικά ζώα, καλλιεργούνται τα ΝΒΠΚ σε in vitro συνθήκες, αμέσως μετά την α-πομόνωσή τους από τον εγκεφαλικό ιστό καθώς και έπειτα από δύο ανακαλλιέργειες, αξιολογώντας παρόμοιους δείκτες. Παρόλο που η δομή και η σύσταση της Υποεπενδυματικής Ζώνης δεν εμφανί-ζει σημαντικές διαφορές ανάμεσα στις δύο πειραματικές ομάδες, η πυκνότητα και η δραστηριότητα των ΝΒΠΚ των Microtus thomasi εμφανίζεται δραματικά μειωμένη σε σχέση με τα εργαστηριακά ζώα. Επίσης, η προσπάθεια καλλιέργειας των ΝΒΠΚ των Microtus thomasi ολοκληρώθηκε με επι-τυχία, σημειώνοντας λειτουργικές και μορφολογικές διαφορές. Οι ιστολογικές αναλύσεις σε συν-δυασμό με τα δεδομένα των κυτταροκαλλιεργειών, τονίζουν την σπουδαιότητα του μικροπεριβάλ-λοντος της φωλιάς, με όλους τους παράγοντες αύξησης και επιβίωσης. Τα πειραματικά μας δεδομένα υποδεικνύουν την επιρροή των εξωτερικών, περιβαλλοντικών παραμέτρων στην νευρογεννητική φωλιά των ΝΒΠΚ και μολονότι η έμφυτη ή η δυναμική φύση των παρατηρηθείσων διαφορών πα-ραμένει ζήτημα δύσκολο να απαντηθεί, τίθεται επί τάπητος η προσέγγισή του με ανάλογο τύπο ανα-λύσεων. Postnatal brain Neural Stem and Progenitor Cells (pbNSPCs) cluster within stem cell niches con-tributing to odour recognition, learning, memory, and myelination, with their activity being modi-fied by exercise, stress, and environmental enrichment. Here, we investigate the hypothesis that lab-mouse NSPCs might remain in a “tamed”, hypoactive status, due to their maintenance in very con-trolled conditions. Lab mice and Microtus thomasi animals are utilized, the latter being a fossorial species. Brain samples are analyzed by immunohistochemical staining, for markers specific for cell proliferation (PCNA, Ki67) and neural progenitor identity (SOX2, DCX and GFAP), focusing on the Subependymal Zone (SEZ). Furthermore, we culture NSPCs from the same animals and we as-sess similar markers immediately after isolation but also after two passages. Even though Subepen-dymal Zone structure and constitution do not exhibit great differences between the two animal spe-cies, the Microtus thomasi pbNSPCs density and activity, based on our sample, tend to be dramati-cally decreased when compared to Lab mice. We have also confirmed the ability to culture NSPCs from wild animals and we describe differences both in terms of morphology and behavior. Both in vitro and histological data combined emphasize the crucial role of the neurogenic niche microenvi-ronment and its survival and growth factors. Our data indicate that the activity of pools of postnatal brain NSPCs are affected by external “lifestyle” stimuli. Whether such differences are hard-wired in NSPCs or are continuously maintained remains open but can be addressed by this type of analysis. 2023-06-13T05:54:42Z 2023-06-13T05:54:42Z 2023-06-12 https://hdl.handle.net/10889/25060 el application/pdf |