Συσχέτιση της σεργλυκίνης με το μονοπάτι της απόκρισης στη μη αναδίπλωση των πρωτεϊνών σε κύτταρα γλοιοβλαστώματος
Η σεργλυκίνη είναι η μοναδική έως τώρα χαρακτηρισμένη ενδοκυττάρια πρωτεογλυκάνη. Ενδοκυτταρικά συμμετέχει στην οργάνωση των εκκριτικών κοκκίων και κυστιδίων, συσσωρεύοντας τα συστατικά τους, και εκκρίνεται στον εξωκυττάριο χώρο μαζί με τα συνοδά της μόρια όπως είναι οι χημειοκίνες, οι κυτταροκίν...
| Κύριος συγγραφέας: | |
|---|---|
| Άλλοι συγγραφείς: | |
| Γλώσσα: | Greek |
| Έκδοση: |
2023
|
| Θέματα: | |
| Διαθέσιμο Online: | https://hdl.handle.net/10889/25134 |
| id |
nemertes-10889-25134 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| institution |
UPatras |
| collection |
Nemertes |
| language |
Greek |
| topic |
Γλοιοβλάστωμα Σεργλυκίνη Εξωκυττάριος χώρος LN-18 κύτταρα Στρες ενδοπλασματικού δικτύου Απόκριση μη ορθά αναδιπλωμένων πρωτεϊνών Glioblastoma Serglycin Extracellular matrix LN-18 cells Endoplasmic reticulum stress Unfolded protein response |
| spellingShingle |
Γλοιοβλάστωμα Σεργλυκίνη Εξωκυττάριος χώρος LN-18 κύτταρα Στρες ενδοπλασματικού δικτύου Απόκριση μη ορθά αναδιπλωμένων πρωτεϊνών Glioblastoma Serglycin Extracellular matrix LN-18 cells Endoplasmic reticulum stress Unfolded protein response Σταματογιαννοπούλου, Θεοδώρα Συσχέτιση της σεργλυκίνης με το μονοπάτι της απόκρισης στη μη αναδίπλωση των πρωτεϊνών σε κύτταρα γλοιοβλαστώματος |
| description |
Η σεργλυκίνη είναι η μοναδική έως τώρα χαρακτηρισμένη ενδοκυττάρια
πρωτεογλυκάνη. Ενδοκυτταρικά συμμετέχει στην οργάνωση των εκκριτικών κοκκίων
και κυστιδίων, συσσωρεύοντας τα συστατικά τους, και εκκρίνεται στον εξωκυττάριο
χώρο μαζί με τα συνοδά της μόρια όπως είναι οι χημειοκίνες, οι κυτταροκίνες, οι
αυξητικοί παράγοντες και πρωτεολυτικά ένζυμα, ρυθμίζοντας τη βιοδιαθεσιμότητά τους
και τη δράση τους. Η απελευθέρωσή τους, σε συνδυασμό με την αλληλεπίδραση της
σεργλυκίνης με συστατικά του εξωκυττάριου χώρου ή με υποδοχείς κυτταρικής
επιφάνειας, επηρεάζουν τελικά πληθώρα κυτταρικών λειτουργιών όπως είναι ο
πολλαπλασιασμός, η μετανάστευση και η διήθηση των κυττάρων.
Έχει δειχθεί πως η σεργλυκίνη εκφράζεται σε πολλά είδη κακοηθειών,
συμπεριλαμβανομένου του γλοιοβλαστώματος, που είναι ο πιο θανατηφόρος όγκος του
Κεντρικού Νευρικού Συστήματος. Παλαιότερες μελέτες του εργαστηρίου έχουν δείξει
πως η καταστολή του γονιδίου της σεργλυκίνης στα LN-18 κύτταρα του
γλοιοβλαστώματος οδήγησε τα κύτταρα να αποκτήσουν ένα λιγότερο επιθετικό
φαινότυπο με μειωμένο πολλαπλασιαστικό, μεταναστευτικό και διηθητικό δυναμικό.
Επιπλέον φαίνεται πως η σεργλυκίνη συμμετέχει στο μονοπάτι απόκρισης μη ορθά
αναδιπλωμένων πρωτεϊνών (UPR), μια διαδικασία μέσω της οποίας αποκαθίσταται η
κυτταρική ομοιόσταση και προάγεται η κυτταρική επιβίωση. Το μονοπάτι αυτό
ενεργοποιείται ως απόκριση σε καταστάσεις κατά τις οποίες διάφοροι παράγοντες
διαταράσσουν το περιβάλλον του ενδοπλασματικού δικτύου. Τα καρκινικά κύτταρα
έχουν ανάγκη για μεγάλη παραγωγή πρωτεϊνών οι οποίες ενδέχεται να μην αναδιπλωθούν
σωστά στο ενδοπλασματικό δίκτυο, κι έτσι προκαλείται η συσσώρευση μη ορθά
αναδιπλωμένων πρωτεϊνών στο διαμέρισμα αυτό προκαλώντας στρες στο
ενδοπλασματικό δίκτυο.
Στόχος της παρούσας εργασίας είναι η μελέτη της επίδρασης της καταστολής του
γονιδίου της σεργλυκίνης στα LN-18 κύτταρα του γλοιοβλαστώματος στην έκφραση
μορίων του UPR που σχετίζονται με σημαντικές βιολογικές δράσεις των
νεοπλασματικών κυττάρων. Τόσο τα LN-18 κύτταρα του γλοιοβλαστώματος (LN 18shSCR) όσο και τα LN-18 κύτταρα στα οποία έχει κατασταλεί η έκφραση της
σεργλυκίνης (LN-18shSRGN) επωάστηκαν με Tunicamycin, έναν αναστολέα της Ν-
xiv
γλυκοζυλίωσης, που επάγει το στρες του ενδοπλασματικού δικτύου και στη συνέχεια
αναλύθηκε η έκφραση γονιδίων στα σηματοδοτικά μονοπάτια των υποδοχέων IRE1,
ATF6, και PERK που σχετίζονται με την απόκριση στην επαγωγή του στρες του
ενδοπλασματικού δικτύου.
Τα δεδομένα της έρευνας μας έδειξαν ότι η καταστολή της σεργλυκίνης
ελαττώνει τα επίπεδα γονιδιακής και πρωτεϊνικής έκφρασης των μορίων του UPR και τη
δυνατότητα των τριών σηματοδοτικών μονοπατιών να ενεργοποιηθούν έπειτα από
επαγωγή του στρες του ενδοπλασματικού δικτύου με την χρήση Τunicamycin. Επιπλέον,
τα κύτταρα που εκφράζουν τη σεργλυκίνη LN-18shSCR εμφανίζουν μεγαλύτερη
ανθεκτικότητα έναντι της Τunicamycin που επάγει το στρες του ενδοπλαματικού
δικτύου, σε σχέση με τα κύτταρα στα οποία έχει κατασταλεί η σεργλυκίνη LN-18shSRGN. |
| author2 |
Stamatogiannopoulou, Theodora |
| author_facet |
Stamatogiannopoulou, Theodora Σταματογιαννοπούλου, Θεοδώρα |
| author |
Σταματογιαννοπούλου, Θεοδώρα |
| author_sort |
Σταματογιαννοπούλου, Θεοδώρα |
| title |
Συσχέτιση της σεργλυκίνης με το μονοπάτι της απόκρισης στη μη αναδίπλωση των πρωτεϊνών σε κύτταρα γλοιοβλαστώματος |
| title_short |
Συσχέτιση της σεργλυκίνης με το μονοπάτι της απόκρισης στη μη αναδίπλωση των πρωτεϊνών σε κύτταρα γλοιοβλαστώματος |
| title_full |
Συσχέτιση της σεργλυκίνης με το μονοπάτι της απόκρισης στη μη αναδίπλωση των πρωτεϊνών σε κύτταρα γλοιοβλαστώματος |
| title_fullStr |
Συσχέτιση της σεργλυκίνης με το μονοπάτι της απόκρισης στη μη αναδίπλωση των πρωτεϊνών σε κύτταρα γλοιοβλαστώματος |
| title_full_unstemmed |
Συσχέτιση της σεργλυκίνης με το μονοπάτι της απόκρισης στη μη αναδίπλωση των πρωτεϊνών σε κύτταρα γλοιοβλαστώματος |
| title_sort |
συσχέτιση της σεργλυκίνης με το μονοπάτι της απόκρισης στη μη αναδίπλωση των πρωτεϊνών σε κύτταρα γλοιοβλαστώματος |
| publishDate |
2023 |
| url |
https://hdl.handle.net/10889/25134 |
| work_keys_str_mv |
AT stamatogiannopouloutheodōra syschetisētēsserglykinēsmetomonopatitēsapokrisēsstēmēanadiplōsētōnprōteïnōnsekyttaragloioblastōmatos AT stamatogiannopouloutheodōra correlationofserglycinwithunfoldedproteinresponsepathwayinglioblastomacells |
| _version_ |
1771297345153007616 |
| spelling |
nemertes-10889-251342023-06-22T03:58:38Z Συσχέτιση της σεργλυκίνης με το μονοπάτι της απόκρισης στη μη αναδίπλωση των πρωτεϊνών σε κύτταρα γλοιοβλαστώματος Correlation of serglycin with unfolded protein response pathway in glioblastoma cells Σταματογιαννοπούλου, Θεοδώρα Stamatogiannopoulou, Theodora Γλοιοβλάστωμα Σεργλυκίνη Εξωκυττάριος χώρος LN-18 κύτταρα Στρες ενδοπλασματικού δικτύου Απόκριση μη ορθά αναδιπλωμένων πρωτεϊνών Glioblastoma Serglycin Extracellular matrix LN-18 cells Endoplasmic reticulum stress Unfolded protein response Η σεργλυκίνη είναι η μοναδική έως τώρα χαρακτηρισμένη ενδοκυττάρια πρωτεογλυκάνη. Ενδοκυτταρικά συμμετέχει στην οργάνωση των εκκριτικών κοκκίων και κυστιδίων, συσσωρεύοντας τα συστατικά τους, και εκκρίνεται στον εξωκυττάριο χώρο μαζί με τα συνοδά της μόρια όπως είναι οι χημειοκίνες, οι κυτταροκίνες, οι αυξητικοί παράγοντες και πρωτεολυτικά ένζυμα, ρυθμίζοντας τη βιοδιαθεσιμότητά τους και τη δράση τους. Η απελευθέρωσή τους, σε συνδυασμό με την αλληλεπίδραση της σεργλυκίνης με συστατικά του εξωκυττάριου χώρου ή με υποδοχείς κυτταρικής επιφάνειας, επηρεάζουν τελικά πληθώρα κυτταρικών λειτουργιών όπως είναι ο πολλαπλασιασμός, η μετανάστευση και η διήθηση των κυττάρων. Έχει δειχθεί πως η σεργλυκίνη εκφράζεται σε πολλά είδη κακοηθειών, συμπεριλαμβανομένου του γλοιοβλαστώματος, που είναι ο πιο θανατηφόρος όγκος του Κεντρικού Νευρικού Συστήματος. Παλαιότερες μελέτες του εργαστηρίου έχουν δείξει πως η καταστολή του γονιδίου της σεργλυκίνης στα LN-18 κύτταρα του γλοιοβλαστώματος οδήγησε τα κύτταρα να αποκτήσουν ένα λιγότερο επιθετικό φαινότυπο με μειωμένο πολλαπλασιαστικό, μεταναστευτικό και διηθητικό δυναμικό. Επιπλέον φαίνεται πως η σεργλυκίνη συμμετέχει στο μονοπάτι απόκρισης μη ορθά αναδιπλωμένων πρωτεϊνών (UPR), μια διαδικασία μέσω της οποίας αποκαθίσταται η κυτταρική ομοιόσταση και προάγεται η κυτταρική επιβίωση. Το μονοπάτι αυτό ενεργοποιείται ως απόκριση σε καταστάσεις κατά τις οποίες διάφοροι παράγοντες διαταράσσουν το περιβάλλον του ενδοπλασματικού δικτύου. Τα καρκινικά κύτταρα έχουν ανάγκη για μεγάλη παραγωγή πρωτεϊνών οι οποίες ενδέχεται να μην αναδιπλωθούν σωστά στο ενδοπλασματικό δίκτυο, κι έτσι προκαλείται η συσσώρευση μη ορθά αναδιπλωμένων πρωτεϊνών στο διαμέρισμα αυτό προκαλώντας στρες στο ενδοπλασματικό δίκτυο. Στόχος της παρούσας εργασίας είναι η μελέτη της επίδρασης της καταστολής του γονιδίου της σεργλυκίνης στα LN-18 κύτταρα του γλοιοβλαστώματος στην έκφραση μορίων του UPR που σχετίζονται με σημαντικές βιολογικές δράσεις των νεοπλασματικών κυττάρων. Τόσο τα LN-18 κύτταρα του γλοιοβλαστώματος (LN 18shSCR) όσο και τα LN-18 κύτταρα στα οποία έχει κατασταλεί η έκφραση της σεργλυκίνης (LN-18shSRGN) επωάστηκαν με Tunicamycin, έναν αναστολέα της Ν- xiv γλυκοζυλίωσης, που επάγει το στρες του ενδοπλασματικού δικτύου και στη συνέχεια αναλύθηκε η έκφραση γονιδίων στα σηματοδοτικά μονοπάτια των υποδοχέων IRE1, ATF6, και PERK που σχετίζονται με την απόκριση στην επαγωγή του στρες του ενδοπλασματικού δικτύου. Τα δεδομένα της έρευνας μας έδειξαν ότι η καταστολή της σεργλυκίνης ελαττώνει τα επίπεδα γονιδιακής και πρωτεϊνικής έκφρασης των μορίων του UPR και τη δυνατότητα των τριών σηματοδοτικών μονοπατιών να ενεργοποιηθούν έπειτα από επαγωγή του στρες του ενδοπλασματικού δικτύου με την χρήση Τunicamycin. Επιπλέον, τα κύτταρα που εκφράζουν τη σεργλυκίνη LN-18shSCR εμφανίζουν μεγαλύτερη ανθεκτικότητα έναντι της Τunicamycin που επάγει το στρες του ενδοπλαματικού δικτύου, σε σχέση με τα κύτταρα στα οποία έχει κατασταλεί η σεργλυκίνη LN-18shSRGN. Serglycin is the only intracellular proteoglycan characterized so far. Intracellularly, it participates in the organization of secretory granules and vesicles, accumulating their components, and is secreted into the extracellular space together with its accompanying molecules such as chemokines, cytokines, growth factors and proteolytic enzymes, regulating their bioavailability and effects. Their release, combined with the interaction of serglycin with components of the extracellular space or with cell surface receptors, ultimately affect a multitude of cellular functions such as cell proliferation, migration and invasion. Serglycin has been shown to be expressed in many types of malignancies, including glioblastoma, which is the most lethal tumor of the Central Nervous System. Previous studies of our laboratory reveal that serglycin’s suppression in LN-18 glioblastoma cells led them to acquire a less aggressive phenotype with reduced proliferative, migratory and invasive potential. In addition, serglycin appears to participate in the unfolded protein response (UPR) pathway, a process through which cellular homeostasis is restored and cell survival is promoted. This pathway is activated in response to situations in which various factors disturb the environment of the endoplasmic reticulum. Cancer cells need a high production of proteins that may not fold properly in the endoplasmic reticulum, thus triggering the accumulation of misfolded proteins in this compartment, causing endoplasmic reticulum stress. The aim of this thesis is to study the effect of serglycin gene suppression in LN-18 glioblastoma cells on the expression of UPR molecules related to important biological activities of neoplastic cells. Both glioblastoma LN-18 cells (LN-18shSCR) and serglycin-suppressed LN-18 cells (LN-18shSRGN) were incubated with Tunicamycin, an inhibitor of N-glycosylation, which induces ER stress. Τhen it was examined, gene expression in the signaling receptor pathways, IRE1, ATF6, and PERK, associated with ER stress induction and UPR. Our research data showed that serglycin’s suppression reduces gene and protein expression levels of UPR molecules and the ability of the three signaling pathways to be activated after induction of ER stress using Tunicamycin. In addition, LN-18shSCR serglycin-expressing cells impart stronger resistance against Tunicamycin, which induces ER stress, compared to LN-18shSRGN serglycin-suppressed cells. 2023-06-21T08:31:44Z 2023-06-21T08:31:44Z 2023-06-20 https://hdl.handle.net/10889/25134 el Attribution-NonCommercial-ShareAlike 3.0 United States http://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/3.0/us/ application/pdf |
