Μελέτη των κυκλοφορούντων καρκινικών κυττάρων και των εξωσωμάτων ασθενών με μικροκυτταρικό καρκίνο του πνεύμονα

• Κύριος συγγραφέας: Παπακωνσταντίνου, Δημήτριος
• Άλλοι συγγραφείς: Papakonstantinou, Dimitrios
• Γλώσσα: Greek
• Έκδοση: 2023
• Θέματα: Καρκίνος πνεύμονα; Υγρή βιοψία; Εξωσώματα; Κυκλοφορούντα καρκινικά κύτταρα; Βιοδείκτες; Lung cancer; Liquid biopsy; Exosomes; Circulating tumor cells; Biomarkers

Ο μικροκυτταρικός καρκίνος του πνεύμονα (SCLC) αποτελεί τη βασική αιτία θανάτων από καρκίνο παγκοσμίως και χαρακτηρίζεται από δυσμενή πρόγνωση και αυξημένη θνησιμότητα. Λόγω του περιορισμένου αριθμού αλλά και αποτελεσματικότητας των ήδη υπαρχόντων θεραπειών, υπάρχει ανάγκη για ανάπτυξη νέων μεθόδων για τη βελτίωση της πρόγνωσης, την πιο έγκαιρη διάγνωση και την αποτελεσματικότερη ανταπόκριση στη θεραπεία. Η υγρή βιοψία αποτελεί μια μη-επεμβατική τεχνική για την ανίχνευση καρκινικών βιοδεικτών στα σωματικά υγρά και περιλαμβάνει την ανάλυση κυκλοφορούντων καρκινικών κυττάρων (CTCs), νουκλεϊκών οξέων και εξωκυττάριων κυστιδίων (εξωσώματα). Οι βιοδείκτες JUNB (μεταγραφικός παράγοντας) και CXCR4 (υποδοχέας χημειοκινών) έχει δειχθεί ότι διαδραματίζουν ρόλο στην επιβίωση ασθενών με καρκίνο του μαστού. Σκοπός της παρούσας διπλωματικής εργασίας είναι η αξιολόγηση αυτών των βιοδεικτών στα εξωσώματα, καθώς και η συσχέτιση με την έκφρασή τους στα CTCs. Στη μελέτη συμμετείχαν 52 ασθενείς με SCLC, τα CTCs των οποίων απομονώθηκαν με διαφορική φυγοκέντρηση φικόλλης και στη συνέχεια πραγματοποιήθηκε ανοσοφθορισμός με αντισώματα έναντι κυτταροκερατίνων 8,18,19 (CK-δείκτες καρκινικών κυττάρων στο αίμα), JUNB και CXCR4. Οι αντικειμενοφόρες πλάκες αναλύθηκαν στο αυτοματοποιημένο μικροσκόπιο VyCAP (πλατφόρμα ανίχνευσής CTCs). Εξωσώματα από το πλάσμα των ίδιων ασθενών και 10 υγιών, απομονώθηκαν με το EXO-Prep kit και χαρακτηρίστηκαν με ηλεκτρονική μικροσκοπία διέλευσης και ανοσοαποτύπωση Western blot. Οι SCLC ασθενείς με πρωτεϊνική υπερέκφραση τόσο JUNB όσο και CXCR4 στα εξωσώματά τους, εμφάνισαν στατιστικά σημαντική διαφορά σε σχέση με την ίδια έκφραση στους υγιείς (PJUNB = 0.001 & PCXCR4 = 0.01). Επιπλέον, υπερέκφραση τόσο του JUNB (C-statistic = 0.94) όσο και του CXCR4 (C-statistic = 0.89) στα εξωσώματα των ασθενών, παρουσίασε πολύ υψηλή διακριτική ικανότητα ανάμεσα σε ασθενείς και υγιείς. Τέλος, η πρωτεϊνική υπερέκφραση CXCR4 στα εξωσώματα, συσχετίστηκε με την παρουσία CTCs (r = 0.442, p = 0.001), CXCR4+ CTCs (r = 0.424, p = 0.002) και CK+/JUNB+/CXCR4+ CTCs (r = 0.366, p = 0.008). Το πρωτότυπο αυτό πρωτόκολλο αποσκοπεί στη βελτίωση της πρόγνωσης και διάγνωσης του SCLC, αλλά και στο να αποτελέσει τη βάση για τη διερεύνηση ήδη υπαρχόντων και νέων βιοδεικτών ΄στο πλαίσιο της υγρής βιοψίας.