Ο ρυθμός πολλαπλασιασμού στην εξωτερική κοκκώδη στιβάδα καθορίζει το σχηματισμό των λοβών της παρεγκεφαλίδας εμβρύου όρνιθας
Η παρεγκεφαλίδα των πτηνών, μια μορφολογικά μοναδική δομή του εγκεφάλου, αποτελείται από 10 λοβούς (μερικοί από τους οποίους φέρουν δευτερογενείς υποδιαιρέσεις), οι οποίοι σχηματίζονται κατά τα ενδιάμεσα εμβρυϊκά αναπτυξιακά στάδια. Ο πολλαπλασιασμός και η μετανάστευση των κυττάρων της εξωτερική...
| Κύριος συγγραφέας: | |
|---|---|
| Άλλοι συγγραφείς: | |
| Μορφή: | Thesis |
| Γλώσσα: | Greek |
| Έκδοση: |
2010
|
| Θέματα: | |
| Διαθέσιμο Online: | http://nemertes.lis.upatras.gr/jspui/handle/10889/3938 |
| id |
nemertes-10889-3938 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| institution |
UPatras |
| collection |
Nemertes |
| language |
Greek |
| topic |
Κοκκώδης στιβάδα Παρεγκεφαλίδα Granule layer Cerebellum 573.818 139 |
| spellingShingle |
Κοκκώδης στιβάδα Παρεγκεφαλίδα Granule layer Cerebellum 573.818 139 Κομματά, Βασιλική Ο ρυθμός πολλαπλασιασμού στην εξωτερική κοκκώδη στιβάδα καθορίζει το σχηματισμό των λοβών της παρεγκεφαλίδας εμβρύου όρνιθας |
| description |
Η παρεγκεφαλίδα των πτηνών, μια μορφολογικά μοναδική δομή του
εγκεφάλου, αποτελείται από 10 λοβούς (μερικοί από τους οποίους φέρουν
δευτερογενείς υποδιαιρέσεις), οι οποίοι σχηματίζονται κατά τα ενδιάμεσα
εμβρυϊκά αναπτυξιακά στάδια. Ο πολλαπλασιασμός και η μετανάστευση των
κυττάρων της εξωτερικής κοκκώδους στιβάδας είναι το κύριο γεγονός κατά
την διαδικασία ανάπτυξης των παρεγκεφαλιδικών λοβών. Σκοπός της
παρούσας μελέτης είναι η διερεύνηση του μηχανισμού σχηματισμού των
λοβών στην αναπτυσσόμενη παρεγκεφαλίδα. Για τον προσδιορισμό του
ρυθμού του πολλαπλασιασμού των πρόγονων κοκκωδών κύτταρων,
εφαρμόσθηκε η ανοσοϊστοχημική μέθοδος της 5-βρωμο-2-δεοξυουριδίνης
(BrdU). Η BrdU, που ενσωματώνεται στο DNA κατά την S-φάσης του
κυτταρικού κύκλου, ενέθηκε in ovo (100μg/gr βάρους αυγού σε φυσιολογικό
ορό) στις εμβρυικές μέρες E10, E13, E15 και E17, και μετά από
διαφορετικούς χρόνους επιβίωσης, τα έμβρυα θυσιάστηκαν (1, 2 και 3 ώρες
μετά την ένεση), μονιμοποιήθηκαν με ενδοκάρδια έγχυση, και αφαιρέθηκε ο
εγκέφαλος, έγινε κρυο-προστασία, μετά –μονιμοποίηση και φύλαξη του
εγκεφάλου στους -80°C. Την E10 ημέρα, παρατηρήθηκε πλήρως
ανεπτυγμένη πρωτογενής σχισμή, ενώ από την E13 ημέρα, όλοι οι λοβοί της
παρεγκεφαλίδας έχουν σχηματιστεί και μέχρι την E17 μέρα όλες οι
υποδιαιρέσεις τους είναι εμφανείς. Με πειράματα απλής και διπλής
ανοσοϊστοχημείας, σε διατομές 20μm, προσδιορίσθηκε ο αριθμός των
μιτωτικά ενεργών κυττάρων στην S-φάση (BrdU σήμανση), ο αριθμός των
αποπτωτικών κυττάρων (σήμανση κασπάσης 3). Έγινε χαρτογράφηση των
προτύπων πολλαπλασιασμού και απόπτωσης (με τη χρήση camera lucida)
και υπολογίστηκε σε συγκεκριμένους λοβούς ο αριθμός των προγονικών
κοκκωδών κυττάρων σε διαφορετικούς χρόνους επιβίωσης. Μόνο μικρός
αριθμός αποπτωτικών κυττάρων παρατηρήθηκε στη μελλοντική εσωτερική
κοκκώδη στιβάδα, τον τελικό προορισμό των κυττάρων της εξωτερικής
κοκκώδους στιβάδας, και συνεπώς η απόπτωση δεν παίζει καθοριστικό ρόλο
στον σχηματισμό των λοβών. |
| author2 |
Δερμών, Αικατερίνη |
| author_facet |
Δερμών, Αικατερίνη Κομματά, Βασιλική |
| format |
Thesis |
| author |
Κομματά, Βασιλική |
| author_sort |
Κομματά, Βασιλική |
| title |
Ο ρυθμός πολλαπλασιασμού στην εξωτερική κοκκώδη στιβάδα καθορίζει το σχηματισμό των λοβών της παρεγκεφαλίδας εμβρύου όρνιθας |
| title_short |
Ο ρυθμός πολλαπλασιασμού στην εξωτερική κοκκώδη στιβάδα καθορίζει το σχηματισμό των λοβών της παρεγκεφαλίδας εμβρύου όρνιθας |
| title_full |
Ο ρυθμός πολλαπλασιασμού στην εξωτερική κοκκώδη στιβάδα καθορίζει το σχηματισμό των λοβών της παρεγκεφαλίδας εμβρύου όρνιθας |
| title_fullStr |
Ο ρυθμός πολλαπλασιασμού στην εξωτερική κοκκώδη στιβάδα καθορίζει το σχηματισμό των λοβών της παρεγκεφαλίδας εμβρύου όρνιθας |
| title_full_unstemmed |
Ο ρυθμός πολλαπλασιασμού στην εξωτερική κοκκώδη στιβάδα καθορίζει το σχηματισμό των λοβών της παρεγκεφαλίδας εμβρύου όρνιθας |
| title_sort |
ο ρυθμός πολλαπλασιασμού στην εξωτερική κοκκώδη στιβάδα καθορίζει το σχηματισμό των λοβών της παρεγκεφαλίδας εμβρύου όρνιθας |
| publishDate |
2010 |
| url |
http://nemertes.lis.upatras.gr/jspui/handle/10889/3938 |
| work_keys_str_mv |
AT kommatabasilikē orythmospollaplasiasmoustēnexōterikēkokkōdēstibadakathorizeitoschēmatismotōnlobōntēsparenkephalidasembryouornithas |
| _version_ |
1771297312913489920 |
| spelling |
nemertes-10889-39382022-09-05T20:15:15Z Ο ρυθμός πολλαπλασιασμού στην εξωτερική κοκκώδη στιβάδα καθορίζει το σχηματισμό των λοβών της παρεγκεφαλίδας εμβρύου όρνιθας Κομματά, Βασιλική Δερμών, Αικατερίνη Ζάγκρης, Νικόλαος Στεφάνου, Γεωργία Δερμών, Αικατερίνη Kommata, Vasiliki Κοκκώδης στιβάδα Παρεγκεφαλίδα Granule layer Cerebellum 573.818 139 Η παρεγκεφαλίδα των πτηνών, μια μορφολογικά μοναδική δομή του εγκεφάλου, αποτελείται από 10 λοβούς (μερικοί από τους οποίους φέρουν δευτερογενείς υποδιαιρέσεις), οι οποίοι σχηματίζονται κατά τα ενδιάμεσα εμβρυϊκά αναπτυξιακά στάδια. Ο πολλαπλασιασμός και η μετανάστευση των κυττάρων της εξωτερικής κοκκώδους στιβάδας είναι το κύριο γεγονός κατά την διαδικασία ανάπτυξης των παρεγκεφαλιδικών λοβών. Σκοπός της παρούσας μελέτης είναι η διερεύνηση του μηχανισμού σχηματισμού των λοβών στην αναπτυσσόμενη παρεγκεφαλίδα. Για τον προσδιορισμό του ρυθμού του πολλαπλασιασμού των πρόγονων κοκκωδών κύτταρων, εφαρμόσθηκε η ανοσοϊστοχημική μέθοδος της 5-βρωμο-2-δεοξυουριδίνης (BrdU). Η BrdU, που ενσωματώνεται στο DNA κατά την S-φάσης του κυτταρικού κύκλου, ενέθηκε in ovo (100μg/gr βάρους αυγού σε φυσιολογικό ορό) στις εμβρυικές μέρες E10, E13, E15 και E17, και μετά από διαφορετικούς χρόνους επιβίωσης, τα έμβρυα θυσιάστηκαν (1, 2 και 3 ώρες μετά την ένεση), μονιμοποιήθηκαν με ενδοκάρδια έγχυση, και αφαιρέθηκε ο εγκέφαλος, έγινε κρυο-προστασία, μετά –μονιμοποίηση και φύλαξη του εγκεφάλου στους -80°C. Την E10 ημέρα, παρατηρήθηκε πλήρως ανεπτυγμένη πρωτογενής σχισμή, ενώ από την E13 ημέρα, όλοι οι λοβοί της παρεγκεφαλίδας έχουν σχηματιστεί και μέχρι την E17 μέρα όλες οι υποδιαιρέσεις τους είναι εμφανείς. Με πειράματα απλής και διπλής ανοσοϊστοχημείας, σε διατομές 20μm, προσδιορίσθηκε ο αριθμός των μιτωτικά ενεργών κυττάρων στην S-φάση (BrdU σήμανση), ο αριθμός των αποπτωτικών κυττάρων (σήμανση κασπάσης 3). Έγινε χαρτογράφηση των προτύπων πολλαπλασιασμού και απόπτωσης (με τη χρήση camera lucida) και υπολογίστηκε σε συγκεκριμένους λοβούς ο αριθμός των προγονικών κοκκωδών κυττάρων σε διαφορετικούς χρόνους επιβίωσης. Μόνο μικρός αριθμός αποπτωτικών κυττάρων παρατηρήθηκε στη μελλοντική εσωτερική κοκκώδη στιβάδα, τον τελικό προορισμό των κυττάρων της εξωτερικής κοκκώδους στιβάδας, και συνεπώς η απόπτωση δεν παίζει καθοριστικό ρόλο στον σχηματισμό των λοβών. The cerebellum (Cb), a highly conserved structure of the vertebrate brain, is a morphologically unique laminated structure made up of a set of folia separated by fissures. The avian cerebellum consists of ten folia, (some of them are subdivided in secondary folia) which are mainly developed during mid and late embryonic stages. External granule cell proliferation is the major event that coincides with the fissure formation. The present study aimed to address the question of the mechanisms that underlie the cerebellar fissure development. For this, the proliferation pattern in the external granule cell layer of the developing embryonic chick cerebellum was mapped, by means of 5-bromo-2’-deoxyurinine (BrdU) immunohistochemistry. BrdU, an S-phase marker was injected in ovo, (100μg/gr egg weight in physiological saline) at the embryonic days E10, E13, E15 and E17 and embryos were allowed to survive for different survival times. The embryos were fixed, cryo-protected and adjacent cerebellar sections were processed for BrdU labelling to determine proliferating cells, for caspase 3 labelling to determine the pattern of apoptotic cells and for double immunofluorescence to characterize the phenotype of BrdU+ cells. Cell proliferation and apoptotic patterns were determined throughout the individual lobules, by image analysis and camera lucida mapping. At day E10, mid-sagittal sections of cerebellum showed that primitive fissure is formed, with well infolded the fissure prima. From day E13, all primary folia were present and by E17 day all subdivisions were developed. While mitotic activity characterized all external granule cell layer folia, low numbers of cells undergoing apoptosis were found mainly in the future granule cell layer, the site of the final destination of external granule cells. Estimation of the density of BrdU+ granule cell precursors revealed that differences determined in the proliferation rate between the fissure’s wall and floor, but not in the apoptotic cell death, may account for the formation of fissures and folia. 2010-12-07T12:33:21Z 2010-12-07T12:33:21Z 2010-07-15 2010-12-07T12:33:21Z Thesis http://nemertes.lis.upatras.gr/jspui/handle/10889/3938 gr Η ΒΚΠ διαθέτει αντίτυπο της διατριβής σε έντυπη μορφή στο βιβλιοστάσιο διδακτορικών διατριβών που βρίσκεται στο ισόγειο του κτιρίου της. 0 application/pdf |
