| Περίληψη: | Η προεμφυτευτική γενετική διάγνωση (PGD) είναι ένα σύνολο τεχνικών οι οποίες εισήχθηκαν σχετικά πρόσφατα στο χώρο των τεχνικών υποβοηθούμενης αναπαραγωγής με στόχο την διάγνωση γενετικών και χρωμοσωμικών ανωμαλιών σε προέμβρυα στα οποία η παρουσία χρωμοσωμικών ανευπλοειδιών είναι υπευθυνη για αποτυχία εμφύτευσης, αποτυχία ολοκλήρωσης της κύησης ή γέννηση παιδιού με διανοητική ή σωματική ασθένεια.
Ο συγκριτικός γονιδιωματικός υβριδισμός (CGH) είναι μια τεχνική η οποία αναλύει πλήρως την αριθμητική χρωμοσωμική σύσταση κυττάρων και πρόσφατα έχει αναπτυχθεί στο χώρο των τεχνικών προεμφυτευτικής γενετικής διάγνωσης με σημαντικά πλεονεκτήματα σε σχέση με τον φθορίζοντα υβριδισμό in situ (FISH) που είναι η πιο διαδεδομένη τεχνική ανίχνευσης χρωμοσωμικών ανευπλοειδιών επί του παρόντος.
Στην παρούσα εργασία αναπτύχθηκε και τυποποιήθηκε η μεθοδολογία της CGH έτσι ώστε να μπορεί να χρησιμοποιηθεί αξιόπιστα για τους σκοπούς της προεμφυτευτικής χρωμοσωμικής διάγνωσης. Αρχικά για την τυποποίηση των σταδίων της μεθοδολογίας χρησιμοποιήθηκαν γνωστά δείγματα φυσιολογικού λεμφοκυτταρικού DNA , ΧΧ και ΧΥ καθώς και δείγματα λεμφοκυτταρικού DNA με γνωστές ανευπλοειδίες (18+,ΧΥ) και (9p+,XY). Μετά τον καθορισμό των διαφόρων πειραματικών παραμέτρων προχωρήσαμε στη χρωμοσωμική ανάλυση βλαστομεριδιακού DNA που αποτελεί και το στόχο της εργασίας η οποία έδειξε με ακρίβεια το φύλο του εμβρύου και τον αριθμό των χρωμοσωμάτων που είχαν ελεγχθεί με τεχνικές PCR και FISH. Παράλληλα τυποποιήθηκε και η μεθοδολογία απομόνωσης των βλαστομεριδίων από τα διαθέσιμα προέμβρυα.
Τα αποτελέσματα των πειραμάτων CGH έδειξαν ότι η τεχνική αν και ιδιαίτερα σύνθετη μπορεί να χρησιμοποιηθεί για τον αριθμητικό προσδιορισμό όλων των χρωμοσωμάτων ενός βλαστομεριδίου και επομένως να συμβάλει ουσιαστικά στην μελέτη της χρωμοσωμικής σύστασης των προεμβρύων που προκύπτουν με τεχνικές υποβοηθούμενης αναπαραγωγής.
|
|---|
