Συμβολή στην προεμφυτευτική χρωμοσωμική διάγνωση ανευπλοειδίων και φύλου με την μεθοδολογία του συγκριτικού γονιδιωματικού υβριδισμού (CGH)
Η προεμφυτευτική γενετική διάγνωση (PGD) είναι ένα σύνολο τεχνικών οι οποίες εισήχθηκαν σχετικά πρόσφατα στο χώρο των τεχνικών υποβοηθούμενης αναπαραγωγής με στόχο την διάγνωση γενετικών και χρωμοσωμικών ανωμαλιών σε προέμβρυα στα οποία η παρουσία χρωμοσωμικών ανευπλοειδιών είναι υπευθυνη για αποτ...
Κύριος συγγραφέας: | |
---|---|
Άλλοι συγγραφείς: | |
Γλώσσα: | Greek |
Έκδοση: |
2007
|
Θέματα: | |
Διαθέσιμο Online: | http://nemertes.lis.upatras.gr/jspui/handle/10889/489 |
id |
nemertes-10889-489 |
---|---|
record_format |
dspace |
spelling |
nemertes-10889-4892022-09-05T09:40:26Z Συμβολή στην προεμφυτευτική χρωμοσωμική διάγνωση ανευπλοειδίων και φύλου με την μεθοδολογία του συγκριτικού γονιδιωματικού υβριδισμού (CGH) Κεραμύδα, Μαρία Σπάθας, Διονύσιος Σπάθας, Διονύσιος Βαράκης, Ιωάννης Λυγερού, Ζωή 571.86 Η προεμφυτευτική γενετική διάγνωση (PGD) είναι ένα σύνολο τεχνικών οι οποίες εισήχθηκαν σχετικά πρόσφατα στο χώρο των τεχνικών υποβοηθούμενης αναπαραγωγής με στόχο την διάγνωση γενετικών και χρωμοσωμικών ανωμαλιών σε προέμβρυα στα οποία η παρουσία χρωμοσωμικών ανευπλοειδιών είναι υπευθυνη για αποτυχία εμφύτευσης, αποτυχία ολοκλήρωσης της κύησης ή γέννηση παιδιού με διανοητική ή σωματική ασθένεια. Ο συγκριτικός γονιδιωματικός υβριδισμός (CGH) είναι μια τεχνική η οποία αναλύει πλήρως την αριθμητική χρωμοσωμική σύσταση κυττάρων και πρόσφατα έχει αναπτυχθεί στο χώρο των τεχνικών προεμφυτευτικής γενετικής διάγνωσης με σημαντικά πλεονεκτήματα σε σχέση με τον φθορίζοντα υβριδισμό in situ (FISH) που είναι η πιο διαδεδομένη τεχνική ανίχνευσης χρωμοσωμικών ανευπλοειδιών επί του παρόντος. Στην παρούσα εργασία αναπτύχθηκε και τυποποιήθηκε η μεθοδολογία της CGH έτσι ώστε να μπορεί να χρησιμοποιηθεί αξιόπιστα για τους σκοπούς της προεμφυτευτικής χρωμοσωμικής διάγνωσης. Αρχικά για την τυποποίηση των σταδίων της μεθοδολογίας χρησιμοποιήθηκαν γνωστά δείγματα φυσιολογικού λεμφοκυτταρικού DNA , ΧΧ και ΧΥ καθώς και δείγματα λεμφοκυτταρικού DNA με γνωστές ανευπλοειδίες (18+,ΧΥ) και (9p+,XY). Μετά τον καθορισμό των διαφόρων πειραματικών παραμέτρων προχωρήσαμε στη χρωμοσωμική ανάλυση βλαστομεριδιακού DNA που αποτελεί και το στόχο της εργασίας η οποία έδειξε με ακρίβεια το φύλο του εμβρύου και τον αριθμό των χρωμοσωμάτων που είχαν ελεγχθεί με τεχνικές PCR και FISH. Παράλληλα τυποποιήθηκε και η μεθοδολογία απομόνωσης των βλαστομεριδίων από τα διαθέσιμα προέμβρυα. Τα αποτελέσματα των πειραμάτων CGH έδειξαν ότι η τεχνική αν και ιδιαίτερα σύνθετη μπορεί να χρησιμοποιηθεί για τον αριθμητικό προσδιορισμό όλων των χρωμοσωμάτων ενός βλαστομεριδίου και επομένως να συμβάλει ουσιαστικά στην μελέτη της χρωμοσωμικής σύστασης των προεμβρύων που προκύπτουν με τεχνικές υποβοηθούμενης αναπαραγωγής. - 2007-08-10T08:33:19Z 2007-08-10T08:33:19Z 2006 2007-08-10T08:33:19Z http://nemertes.lis.upatras.gr/jspui/handle/10889/489 gr Η ΒΥΠ διαθέτει αντίτυπο της διατριβής σε έντυπη μορφή στο βιβλιοστάσιο διδακτορικών διατριβών που βρίσκεται στο ισόγειο του κτιρίου της. application/pdf |
institution |
UPatras |
collection |
Nemertes |
language |
Greek |
topic |
571.86 |
spellingShingle |
571.86 Κεραμύδα, Μαρία Συμβολή στην προεμφυτευτική χρωμοσωμική διάγνωση ανευπλοειδίων και φύλου με την μεθοδολογία του συγκριτικού γονιδιωματικού υβριδισμού (CGH) |
description |
Η προεμφυτευτική γενετική διάγνωση (PGD) είναι ένα σύνολο τεχνικών οι οποίες εισήχθηκαν σχετικά πρόσφατα στο χώρο των τεχνικών υποβοηθούμενης αναπαραγωγής με στόχο την διάγνωση γενετικών και χρωμοσωμικών ανωμαλιών σε προέμβρυα στα οποία η παρουσία χρωμοσωμικών ανευπλοειδιών είναι υπευθυνη για αποτυχία εμφύτευσης, αποτυχία ολοκλήρωσης της κύησης ή γέννηση παιδιού με διανοητική ή σωματική ασθένεια.
Ο συγκριτικός γονιδιωματικός υβριδισμός (CGH) είναι μια τεχνική η οποία αναλύει πλήρως την αριθμητική χρωμοσωμική σύσταση κυττάρων και πρόσφατα έχει αναπτυχθεί στο χώρο των τεχνικών προεμφυτευτικής γενετικής διάγνωσης με σημαντικά πλεονεκτήματα σε σχέση με τον φθορίζοντα υβριδισμό in situ (FISH) που είναι η πιο διαδεδομένη τεχνική ανίχνευσης χρωμοσωμικών ανευπλοειδιών επί του παρόντος.
Στην παρούσα εργασία αναπτύχθηκε και τυποποιήθηκε η μεθοδολογία της CGH έτσι ώστε να μπορεί να χρησιμοποιηθεί αξιόπιστα για τους σκοπούς της προεμφυτευτικής χρωμοσωμικής διάγνωσης. Αρχικά για την τυποποίηση των σταδίων της μεθοδολογίας χρησιμοποιήθηκαν γνωστά δείγματα φυσιολογικού λεμφοκυτταρικού DNA , ΧΧ και ΧΥ καθώς και δείγματα λεμφοκυτταρικού DNA με γνωστές ανευπλοειδίες (18+,ΧΥ) και (9p+,XY). Μετά τον καθορισμό των διαφόρων πειραματικών παραμέτρων προχωρήσαμε στη χρωμοσωμική ανάλυση βλαστομεριδιακού DNA που αποτελεί και το στόχο της εργασίας η οποία έδειξε με ακρίβεια το φύλο του εμβρύου και τον αριθμό των χρωμοσωμάτων που είχαν ελεγχθεί με τεχνικές PCR και FISH. Παράλληλα τυποποιήθηκε και η μεθοδολογία απομόνωσης των βλαστομεριδίων από τα διαθέσιμα προέμβρυα.
Τα αποτελέσματα των πειραμάτων CGH έδειξαν ότι η τεχνική αν και ιδιαίτερα σύνθετη μπορεί να χρησιμοποιηθεί για τον αριθμητικό προσδιορισμό όλων των χρωμοσωμάτων ενός βλαστομεριδίου και επομένως να συμβάλει ουσιαστικά στην μελέτη της χρωμοσωμικής σύστασης των προεμβρύων που προκύπτουν με τεχνικές υποβοηθούμενης αναπαραγωγής. |
author2 |
Σπάθας, Διονύσιος |
author_facet |
Σπάθας, Διονύσιος Κεραμύδα, Μαρία |
author |
Κεραμύδα, Μαρία |
author_sort |
Κεραμύδα, Μαρία |
title |
Συμβολή στην προεμφυτευτική χρωμοσωμική διάγνωση ανευπλοειδίων και φύλου με την μεθοδολογία του συγκριτικού γονιδιωματικού υβριδισμού (CGH) |
title_short |
Συμβολή στην προεμφυτευτική χρωμοσωμική διάγνωση ανευπλοειδίων και φύλου με την μεθοδολογία του συγκριτικού γονιδιωματικού υβριδισμού (CGH) |
title_full |
Συμβολή στην προεμφυτευτική χρωμοσωμική διάγνωση ανευπλοειδίων και φύλου με την μεθοδολογία του συγκριτικού γονιδιωματικού υβριδισμού (CGH) |
title_fullStr |
Συμβολή στην προεμφυτευτική χρωμοσωμική διάγνωση ανευπλοειδίων και φύλου με την μεθοδολογία του συγκριτικού γονιδιωματικού υβριδισμού (CGH) |
title_full_unstemmed |
Συμβολή στην προεμφυτευτική χρωμοσωμική διάγνωση ανευπλοειδίων και φύλου με την μεθοδολογία του συγκριτικού γονιδιωματικού υβριδισμού (CGH) |
title_sort |
συμβολή στην προεμφυτευτική χρωμοσωμική διάγνωση ανευπλοειδίων και φύλου με την μεθοδολογία του συγκριτικού γονιδιωματικού υβριδισμού (cgh) |
publishDate |
2007 |
url |
http://nemertes.lis.upatras.gr/jspui/handle/10889/489 |
work_keys_str_mv |
AT keramydamaria symbolēstēnproemphyteutikēchrōmosōmikēdiagnōsēaneuploeidiōnkaiphyloumetēnmethodologiatousynkritikougonidiōmatikouybridismoucgh |
_version_ |
1771297189401722880 |