Χαρακτηρισμός της γλυκολιποπρωτεΐνης (G.L.P.) του Slime τριών πρότυπων στελεχών Pseudomonas aeruginosa και συγκριτική μελέτη αυτής ως προς τις ομοιότητες ή τις διαφορές με το λιποπολυσακχαρίτη (L.P.S.) του μικροοργανισμού
Από 3 πρότυπα στελέχη Pseudomonas aeruginosa το Smooth στέλεχος PAC-IR και τα Rough στελέχη PAC-557 και PAC-605, που δώρησε ευγενώς στο Εργαστήριο Μικροβιολογίας του Πανεπιστημίου Πατρών η Dr. ΡΜ Meadow του University Co 1 lege, London παρελήφθησαν με ειδική μεθοδολογία ο λιποπολυσακχαρίτης L.P...
| Κύριος συγγραφέας: | |
|---|---|
| Άλλοι συγγραφείς: | |
| Μορφή: | Thesis |
| Γλώσσα: | Greek |
| Έκδοση: |
2015
|
| Θέματα: | |
| Διαθέσιμο Online: | http://hdl.handle.net/10889/8834 |
| id |
nemertes-10889-8834 |
|---|---|
| record_format |
dspace |
| institution |
UPatras |
| collection |
Nemertes |
| language |
Greek |
| topic |
Πολυσακχαρίτες Λοιμώξεις Pseudomonas aeruginosa Infections Bacteria 579.323 |
| spellingShingle |
Πολυσακχαρίτες Λοιμώξεις Pseudomonas aeruginosa Infections Bacteria 579.323 Χριστοφίδου-Πλιάκα, Μυρτώ Χαρακτηρισμός της γλυκολιποπρωτεΐνης (G.L.P.) του Slime τριών πρότυπων στελεχών Pseudomonas aeruginosa και συγκριτική μελέτη αυτής ως προς τις ομοιότητες ή τις διαφορές με το λιποπολυσακχαρίτη (L.P.S.) του μικροοργανισμού |
| description |
Από 3 πρότυπα στελέχη Pseudomonas aeruginosa το Smooth
στέλεχος PAC-IR και τα Rough στελέχη PAC-557 και PAC-605,
που δώρησε ευγενώς στο Εργαστήριο Μικροβιολογίας του
Πανεπιστημίου Πατρών η Dr. ΡΜ Meadow του University
Co 1 lege, London παρελήφθησαν με ειδική μεθοδολογία ο
λιποπολυσακχαρίτης L.P.S, η εξωκυττάρια ουσία (Slime) και
οι εξωτερικές μεμβράνες.
Έγιναν ηλεκτροφορήσεις με αποδιατακτικούς παράγοντες
(SDS-PAGE) και χρώση των πηκτωμάτων για πρωτεΐνες με
Coomassie blue, και για L.P.S με AgNÖ3.
Οι ηλεκτροφορητικές εικόνες του Slime, του L.P.S και
των εξωτερικών μεμβρανών διαφέρουν μεταξύ τους και στα 3
στελέχη.
Ανάλυση των ουδετέρων σακχάρων έδειξε ότι και τα 3
Slime περί έχουν με ποσοτικές διαφορές 6 σάκχαρα, τη
ραμνόζη, τη φουκόζη, τη ξυλόζη, τη μαννόζη και τη
γαλακτόζη. Αντίθετα μαννόζη και γαλακτόζη δεν περιέχονται
στο Smooth L.P.S, ενώ οι Rough L.P.Ss περί έχουν μόνο
ραμνόζη και γλυκόζη.
Ανάλυση του λιπιδικού στοιχείου των 3 Slime και των 3
L.P.Ss έδειξε ότι ποιοτικά περιέχουν 5 ίδια λιπαρά οξέα.
Δωδεκανοικό οξύ (~Cii), 20Η-δωδεκανοικό (-Ci?),
δεκατετρανικό οξύ (~Ci 4), δεκαεξανικό οξύ (~Cit),
δεκαοκτανικό οξύ (-Ci s) και τα ισομερή του. Μετά από χρωματογραφία μοριακής διήθησης στα 3 Slime
ο πολυσακχαρίτης που παραλαμβάνεται από την υδατανθρακική
κορυφή δεν περιέχει L πρωτεΐνη και είναι μοριακού βάρους
40.000-100.000 daltons.
Τα αποτελέσματα αυτά αποδεικνύουν ότι η παραγωγή του
Slime είναι κοινή ιδιότητα Smooth και Rough στελεχών
Ρ.aeruginosa και ότι το υδατανθρακικό στοιχείο του Slime
είναι αυτοτελής ουσία, ελεύθερη πρωτεϊνών, που δεν
αποτελείται από τις πλευρικές αλυσίδες του L.P.S. |
| author2 |
Δημητρακόπουλος, Γεώργιος |
| author_facet |
Δημητρακόπουλος, Γεώργιος Χριστοφίδου-Πλιάκα, Μυρτώ |
| format |
Thesis |
| author |
Χριστοφίδου-Πλιάκα, Μυρτώ |
| author_sort |
Χριστοφίδου-Πλιάκα, Μυρτώ |
| title |
Χαρακτηρισμός της γλυκολιποπρωτεΐνης (G.L.P.) του Slime τριών πρότυπων στελεχών Pseudomonas aeruginosa και συγκριτική μελέτη αυτής ως προς τις ομοιότητες ή τις διαφορές με το λιποπολυσακχαρίτη (L.P.S.) του μικροοργανισμού |
| title_short |
Χαρακτηρισμός της γλυκολιποπρωτεΐνης (G.L.P.) του Slime τριών πρότυπων στελεχών Pseudomonas aeruginosa και συγκριτική μελέτη αυτής ως προς τις ομοιότητες ή τις διαφορές με το λιποπολυσακχαρίτη (L.P.S.) του μικροοργανισμού |
| title_full |
Χαρακτηρισμός της γλυκολιποπρωτεΐνης (G.L.P.) του Slime τριών πρότυπων στελεχών Pseudomonas aeruginosa και συγκριτική μελέτη αυτής ως προς τις ομοιότητες ή τις διαφορές με το λιποπολυσακχαρίτη (L.P.S.) του μικροοργανισμού |
| title_fullStr |
Χαρακτηρισμός της γλυκολιποπρωτεΐνης (G.L.P.) του Slime τριών πρότυπων στελεχών Pseudomonas aeruginosa και συγκριτική μελέτη αυτής ως προς τις ομοιότητες ή τις διαφορές με το λιποπολυσακχαρίτη (L.P.S.) του μικροοργανισμού |
| title_full_unstemmed |
Χαρακτηρισμός της γλυκολιποπρωτεΐνης (G.L.P.) του Slime τριών πρότυπων στελεχών Pseudomonas aeruginosa και συγκριτική μελέτη αυτής ως προς τις ομοιότητες ή τις διαφορές με το λιποπολυσακχαρίτη (L.P.S.) του μικροοργανισμού |
| title_sort |
χαρακτηρισμός της γλυκολιποπρωτεΐνης (g.l.p.) του slime τριών πρότυπων στελεχών pseudomonas aeruginosa και συγκριτική μελέτη αυτής ως προς τις ομοιότητες ή τις διαφορές με το λιποπολυσακχαρίτη (l.p.s.) του μικροοργανισμού |
| publishDate |
2015 |
| url |
http://hdl.handle.net/10889/8834 |
| work_keys_str_mv |
AT christophidoupliakamyrtō charaktērismostēsglykolipoprōteïnēsglptouslimetriōnprotypōnstelechōnpseudomonasaeruginosakaisynkritikēmeletēautēsōsprostisomoiotētesētisdiaphoresmetolipopolysakcharitēlpstoumikroorganismou |
| _version_ |
1771297180067299328 |
| spelling |
nemertes-10889-88342022-09-05T06:57:06Z Χαρακτηρισμός της γλυκολιποπρωτεΐνης (G.L.P.) του Slime τριών πρότυπων στελεχών Pseudomonas aeruginosa και συγκριτική μελέτη αυτής ως προς τις ομοιότητες ή τις διαφορές με το λιποπολυσακχαρίτη (L.P.S.) του μικροοργανισμού Χριστοφίδου-Πλιάκα, Μυρτώ Δημητρακόπουλος, Γεώργιος Μανιάτης, Γεώργιος Μίντζας, Αναστάσιος Βαγενάκης, Απόστολος Μαραγκουδάκης, Μιχαήλ Christofidou-Pliaka, Myrto Πολυσακχαρίτες Λοιμώξεις Pseudomonas aeruginosa Infections Bacteria 579.323 Από 3 πρότυπα στελέχη Pseudomonas aeruginosa το Smooth στέλεχος PAC-IR και τα Rough στελέχη PAC-557 και PAC-605, που δώρησε ευγενώς στο Εργαστήριο Μικροβιολογίας του Πανεπιστημίου Πατρών η Dr. ΡΜ Meadow του University Co 1 lege, London παρελήφθησαν με ειδική μεθοδολογία ο λιποπολυσακχαρίτης L.P.S, η εξωκυττάρια ουσία (Slime) και οι εξωτερικές μεμβράνες. Έγιναν ηλεκτροφορήσεις με αποδιατακτικούς παράγοντες (SDS-PAGE) και χρώση των πηκτωμάτων για πρωτεΐνες με Coomassie blue, και για L.P.S με AgNÖ3. Οι ηλεκτροφορητικές εικόνες του Slime, του L.P.S και των εξωτερικών μεμβρανών διαφέρουν μεταξύ τους και στα 3 στελέχη. Ανάλυση των ουδετέρων σακχάρων έδειξε ότι και τα 3 Slime περί έχουν με ποσοτικές διαφορές 6 σάκχαρα, τη ραμνόζη, τη φουκόζη, τη ξυλόζη, τη μαννόζη και τη γαλακτόζη. Αντίθετα μαννόζη και γαλακτόζη δεν περιέχονται στο Smooth L.P.S, ενώ οι Rough L.P.Ss περί έχουν μόνο ραμνόζη και γλυκόζη. Ανάλυση του λιπιδικού στοιχείου των 3 Slime και των 3 L.P.Ss έδειξε ότι ποιοτικά περιέχουν 5 ίδια λιπαρά οξέα. Δωδεκανοικό οξύ (~Cii), 20Η-δωδεκανοικό (-Ci?), δεκατετρανικό οξύ (~Ci 4), δεκαεξανικό οξύ (~Cit), δεκαοκτανικό οξύ (-Ci s) και τα ισομερή του. Μετά από χρωματογραφία μοριακής διήθησης στα 3 Slime ο πολυσακχαρίτης που παραλαμβάνεται από την υδατανθρακική κορυφή δεν περιέχει L πρωτεΐνη και είναι μοριακού βάρους 40.000-100.000 daltons. Τα αποτελέσματα αυτά αποδεικνύουν ότι η παραγωγή του Slime είναι κοινή ιδιότητα Smooth και Rough στελεχών Ρ.aeruginosa και ότι το υδατανθρακικό στοιχείο του Slime είναι αυτοτελής ουσία, ελεύθερη πρωτεϊνών, που δεν αποτελείται από τις πλευρικές αλυσίδες του L.P.S. Lipopolysaccharide (L.P.S), slime and outer membranes were obtained from a smooth, nonmucoid Pseudomonas aeruginosa strain, PAC-IR and its two rough mutants, PAC~ 557 and PAC-605 (Kindly provided by Dr. PM Meadow, University College, London). Electrophoretic analysis on SDS-polyacrylamide gels and staining with silver nitrate and Coomassie blue showed different profiles between L.P.S, Slime and outer membranes in all three strains. Comparative analysis of the saccharide moiety between L.P.S and Slime of each strain by H.P.L.C demonstrated that the saccharide moiety of slime has different composition from that of L.P.S. Six neutral sugars, rhamnose, fucose, xylose, mannose, galactose and glucose were identified in all three slimes though in different amounts. Mannose and galactose were not found in the smooth L.P.S, whereas only rhamnose and glucose were identified in the L.P.Ss of the rough strains. Comparative analysis of the lipid moiety between L.P.S and Slime in all three strains with Gas Chromatography and Mass Spectroscopy indicated that lipid moiety had no quaiitative differences concerning the lipid acids. Five lipid acids were identified in all three slimes and L.P.Ss dodecanoic acid (~Ci2)> 20H~dodecanoic acid (-C2?), tetradecanoic (-C14), exadecanoic (Ci(,), octadecanoic (- Cis) and its isomeric forms. After gel filtration of all three slimes the polysaccharide obtained from the carbohydrate peak fraction was found to be protein free. By gel filtration the mo 1 ecular size of the polysaccharide was estimated to be about 40000-100000 daltons. Whether the polysaccharide moiety is a glycolipid is not clear at the present. This problem is currently under investigation. Our results suggest that slime production is a common property shared by both Smooth and Hough Ρ.aeruginosa strains. The saccharide moiety of slime does not represent the side chains of L.P.S and it is protein free. 2015-09-23T08:00:52Z 2015-09-23T08:00:52Z 1989 Thesis http://hdl.handle.net/10889/8834 gr 0 application/pdf |
