Ανάπτυξη βιοαισθητήρων DNA για την ανίχνευση νοθείας σε γαλακτοκομικά προϊόντα

Η μεγάλη διατροφική αξία που έχουν το γάλα και γενικότερα τα γαλακτοκομικά προϊόντα, έχει ως αποτέλεσμα την αύξηση της κατανάλωσης γάλακτος παγκοσμίως και το γάλα να καταλαμβάνει ένα σημαντικό ποσοστό στη διατροφή ενός ανθρώπου. Ωστόσο, λόγω της ολοένα και αυξανόμενης ζήτησης για παραγωγή γάλακτος κ...

Πλήρης περιγραφή

Λεπτομέρειες βιβλιογραφικής εγγραφής
Κύριος συγγραφέας: Μπουγάδη, Ελένη
Άλλοι συγγραφείς: Καλογιάννη, Δέσποινα
Μορφή: Thesis
Γλώσσα:Greek
Έκδοση: 2020
Θέματα:
Διαθέσιμο Online:http://hdl.handle.net/10889/13449
Περιγραφή
Περίληψη:Η μεγάλη διατροφική αξία που έχουν το γάλα και γενικότερα τα γαλακτοκομικά προϊόντα, έχει ως αποτέλεσμα την αύξηση της κατανάλωσης γάλακτος παγκοσμίως και το γάλα να καταλαμβάνει ένα σημαντικό ποσοστό στη διατροφή ενός ανθρώπου. Ωστόσο, λόγω της ολοένα και αυξανόμενης ζήτησης για παραγωγή γάλακτος και λόγω των ανταγωνιστικών συνθηκών που επικρατούν μεταξύ διάφορων μονάδων παραγωγής γαλακτοκομικών προϊόντων, τα γαλακτοκομικά προϊόντα είναι συχνά στόχος νοθείας, κυρίως για οικονομικούς λόγους, με συνέπεια να αμφισβητείται η ποιότητά τους. Για το λόγο αυτό, μέχρι σήμερα, αναπτύσσεται και εφαρμόζεται μια ποικιλία τεχνικών για την ανίχνευση της νοθείας στα γαλακτοκομικά προϊόντα. Στην παρούσα διπλωματική εργασία, αναπτύσσονται βιοαισθητήρες τύπου ταινίας, οι οποίοι χρησιμοποιούνται ως μέσο για την ανίχνευση των διαφόρων ειδών γάλακτος. Πιο συγκεκριμένα, οι βιοαισθητήρες τύπου ταινίας, χρησιμοποιούνται για την ανίχνευση DNA αμνού, αίγας και βοείου σε πρόβειο, γίδινο και αγελαδινό γιαούρτι αντίστοιχα ενώ ακόμη, χρησιμοποιούνται για την ανίχνευση DNA βοείου σε διμερή μίγματα αγελαδινού-γίδινου και αγελαδινού-πρόβειου γιαουρτιού. Ως ιχνηθέτες χρησιμοποιούνται τα έγχρωμα νανοσωματίδια χρυσού. Οι βιοαισθητήρες τύπου ταινίας που αναπτύσσονται, αποτελούν μια οικονομική, ταχεία και ευαίσθητη μέθοδο ανίχνευσης και συγχρόνως, επιτρέπουν την ανίχνευση νοθείας δια γυμνού οφθαλμού. Αρχικά, το DNA αμνού, αίγας και βοείου αλλά και τα μίγματα DNA βοείου-αμνού και βοείου-αίγας, που έχουν προκύψει από τη μίξη των DNA σε διαφορετικά ποσοστά, υποβάλλονται σε αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης (polumerase chain reaction) προκειμένου να πολλαπλασιαστούν. Η ανίχνευση επιτυγχάνεται λόγω της υβριδοποίησης των συμπληρωματικών βάσεων του DNA με βάση των κανόνα συμπληρωματικότητας των βάσεων και της συγγένειας της βιοτίνης με τη στρεπταβιδίνη του συζεύγματος νανοσωματιδίων χρυσού-στρεπταβιδίνης με βιοτινυλιωμένα μόρια. Με την ανάπτυξη βιοαισθητήρων τύπου ταινίας κατέστη δυνατή η ανίχνευση μόλις 1,56 fmol από τα προϊόντα PCR αίγας και βοείου και 3,125 fmol από το προϊόν PCR αμνού, ενώ ανιχνεύθηκε μόλις 0,01 % ποσοστό αγελαδινού γάλατος στα διμερή μίγματα αγελαδινού-γίδινου και αγελαδινού-πρόβειου γιαουρτιού.