Ανάλυση αυτοφυών πληθυσμών φασκόμηλου ως προς τους δευτερογενείς μεταβολίτες με χρήση χρωματογραφικών και φασματοσκοπικών τεχνικών και μελέτη της βιοδραστικότητάς τους
Στην παρούσα διπλωματική εργασία παρουσιάζεται η μεταβολομική ανάλυση πέντε αυτοφυών πληθυσμών φασκόμηλου και πιο συγκεκριμένα, δύο πληθυσμών Salvia fruticosa Mill. (Φούρνοι Κορσεών και Ροδινή Αχαΐας), δύο πληθυσμών Salvia pomifera L. subsp. pomifera (Δυτική Κρήτη) και ενός πληθυσμού Salvia pomifera...
Κύριος συγγραφέας: | |
---|---|
Άλλοι συγγραφείς: | |
Γλώσσα: | Greek |
Έκδοση: |
2021
|
Θέματα: | |
Διαθέσιμο Online: | http://hdl.handle.net/10889/14807 |
id |
nemertes-10889-14807 |
---|---|
record_format |
dspace |
institution |
UPatras |
collection |
Nemertes |
language |
Greek |
topic |
Φασκόμηλο Μεταβολομική ανάλυση Μη ενζυμική γλυκοζυλίωση Sage Salvia fruticosa Salvia pomifera Metabolomic analysis Glycation |
spellingShingle |
Φασκόμηλο Μεταβολομική ανάλυση Μη ενζυμική γλυκοζυλίωση Sage Salvia fruticosa Salvia pomifera Metabolomic analysis Glycation Γκιώνη, Μαρία Ανάλυση αυτοφυών πληθυσμών φασκόμηλου ως προς τους δευτερογενείς μεταβολίτες με χρήση χρωματογραφικών και φασματοσκοπικών τεχνικών και μελέτη της βιοδραστικότητάς τους |
description |
Στην παρούσα διπλωματική εργασία παρουσιάζεται η μεταβολομική ανάλυση πέντε αυτοφυών πληθυσμών φασκόμηλου και πιο συγκεκριμένα, δύο πληθυσμών Salvia fruticosa Mill. (Φούρνοι Κορσεών και Ροδινή Αχαΐας), δύο πληθυσμών Salvia pomifera L. subsp. pomifera (Δυτική Κρήτη) και ενός πληθυσμού Salvia pomifera subsp. calycina (Sm.) Hayek (Πάρνηθα, Αττική). Η δρόγη, τα ξηρά φύλλα, υποβλήθηκε σε εκχύλιση με υπερήχους αρχικά με πετρελαϊκό αιθέρα και έπειτα με 70 % μεθανόλη σε νερό. Πραγματοποιήθηκε ποιοτική και επί τοις εκατό % ποσοτική ανάλυση των πτητικών συστατικών του άπολου εκχυλίσματος με χρήση αέριας χρωματογραφίας συζευγμένης με φασματομετρία μάζας (GC-MS). Πραγματοποιήθηκε ποιοτική ανάλυση των πολικών εκχυλισμάτων και ποσοτικός προσδιορισμός των ενώσεων ροσμαρινικό και καρνοσικό οξύ με χρήση πρότυπων ενώσεων με την τεχνική της υγρής χρωματογραφίας υπερυψηλής απόδοσης με ανιχνευτή συστοιχίας διόδων συζευγμένης με φασματομετρία μάζας (UPLC-DAD-MS). Τέλος, αναπτύχθηκε μια φθορισμομετρική μέθοδος για τη διερεύνηση της ικανότητας αναστολής της αντίδρασης της μη ενζυμικής γλυκοζυλίωσης από τα υδρο-αλκοολικά εκχυλίσματα. Το σύστημα της δοκιμασίας αυτής μελετήθηκε με χρήση της τεχνικής της μικροσκοπίας Raman (micro-Raman).
Τα αποτελέσματα ανέδειξαν τη διαφοροποίηση μεταξύ των εξεταζόμενων φυτικών taxa. Τα άπολα εκχυλίσματα των S. fruticosa είχαν υψηλή συγκέντρωση ευκαλυπτόλης (34,8-39,0 %) ενώ τα εκχυλίσματα των S. pomifera περιείχαν υψηλά ποσοστά α-θυϊόνης (19,7-41,0 %) και β-θυϊόνης (6,0-39,1 %). Από την ανάλυση UPLC-DAD-MS προέκυψαν 12 ενώσεις παρούσες σε όλους τους πληθυσμούς, 12 ενώσεις παρούσες στους πληθυσμούς S. pomifera και 33 που ήταν παρούσες στους πληθυσμούς S. fruticosa. Το ροσμαρινικό οξύ στα δείγματα S. pomifera κυμάνθηκε μεταξύ 3,79 και 12,55 mg/g, ενώ το καρνοσικό οξύ δεν ανιχνεύτηκε. Οι πληθυσμοί S. fruticosa περιείχαν ροσμαρινικό οξύ σε συγκεντρώσεις 7,22 και 11,01 mg/g και καρνοσικό οξύ 6,70 και 5,98 mg/g, αντίστοιχα. Όλα τα υδρο-αλκοολικά εκχυλίσματα, το ροσμαρινικό και το καρνοσικό οξύ ανέστειλαν ισχυρά την αντίδραση της μη ενζυμικής γλυκοζυλίωσης. Με χρήση micro-Raman διαπιστώθηκε η αποδιάταξη της βόειας αλβουμίνης ορού μετά από την αντίδραση με τη 2-δεοξυ-D-ριβόζη. |
author2 |
Gkioni, Maria |
author_facet |
Gkioni, Maria Γκιώνη, Μαρία |
author |
Γκιώνη, Μαρία |
author_sort |
Γκιώνη, Μαρία |
title |
Ανάλυση αυτοφυών πληθυσμών φασκόμηλου ως προς τους δευτερογενείς μεταβολίτες με χρήση χρωματογραφικών και φασματοσκοπικών τεχνικών και μελέτη της βιοδραστικότητάς τους |
title_short |
Ανάλυση αυτοφυών πληθυσμών φασκόμηλου ως προς τους δευτερογενείς μεταβολίτες με χρήση χρωματογραφικών και φασματοσκοπικών τεχνικών και μελέτη της βιοδραστικότητάς τους |
title_full |
Ανάλυση αυτοφυών πληθυσμών φασκόμηλου ως προς τους δευτερογενείς μεταβολίτες με χρήση χρωματογραφικών και φασματοσκοπικών τεχνικών και μελέτη της βιοδραστικότητάς τους |
title_fullStr |
Ανάλυση αυτοφυών πληθυσμών φασκόμηλου ως προς τους δευτερογενείς μεταβολίτες με χρήση χρωματογραφικών και φασματοσκοπικών τεχνικών και μελέτη της βιοδραστικότητάς τους |
title_full_unstemmed |
Ανάλυση αυτοφυών πληθυσμών φασκόμηλου ως προς τους δευτερογενείς μεταβολίτες με χρήση χρωματογραφικών και φασματοσκοπικών τεχνικών και μελέτη της βιοδραστικότητάς τους |
title_sort |
ανάλυση αυτοφυών πληθυσμών φασκόμηλου ως προς τους δευτερογενείς μεταβολίτες με χρήση χρωματογραφικών και φασματοσκοπικών τεχνικών και μελέτη της βιοδραστικότητάς τους |
publishDate |
2021 |
url |
http://hdl.handle.net/10889/14807 |
work_keys_str_mv |
AT nkiōnēmaria analysēautophyōnplēthysmōnphaskomēlouōsprostousdeuterogeneismetabolitesmechrēsēchrōmatographikōnkaiphasmatoskopikōntechnikōnkaimeletētēsbiodrastikotētastous AT nkiōnēmaria analysisofsecondarymetabolitesinwildsagepopulationswithchromatographicandspectroscopictechniquesandinvestigationoftheirbioactivity |
_version_ |
1771297166596243456 |
spelling |
nemertes-10889-148072022-09-05T06:57:28Z Ανάλυση αυτοφυών πληθυσμών φασκόμηλου ως προς τους δευτερογενείς μεταβολίτες με χρήση χρωματογραφικών και φασματοσκοπικών τεχνικών και μελέτη της βιοδραστικότητάς τους Analysis of secondary metabolites in wild sage populations with chromatographic and spectroscopic techniques and investigation of their bioactivity Γκιώνη, Μαρία Gkioni, Maria Φασκόμηλο Μεταβολομική ανάλυση Μη ενζυμική γλυκοζυλίωση Sage Salvia fruticosa Salvia pomifera Metabolomic analysis Glycation Στην παρούσα διπλωματική εργασία παρουσιάζεται η μεταβολομική ανάλυση πέντε αυτοφυών πληθυσμών φασκόμηλου και πιο συγκεκριμένα, δύο πληθυσμών Salvia fruticosa Mill. (Φούρνοι Κορσεών και Ροδινή Αχαΐας), δύο πληθυσμών Salvia pomifera L. subsp. pomifera (Δυτική Κρήτη) και ενός πληθυσμού Salvia pomifera subsp. calycina (Sm.) Hayek (Πάρνηθα, Αττική). Η δρόγη, τα ξηρά φύλλα, υποβλήθηκε σε εκχύλιση με υπερήχους αρχικά με πετρελαϊκό αιθέρα και έπειτα με 70 % μεθανόλη σε νερό. Πραγματοποιήθηκε ποιοτική και επί τοις εκατό % ποσοτική ανάλυση των πτητικών συστατικών του άπολου εκχυλίσματος με χρήση αέριας χρωματογραφίας συζευγμένης με φασματομετρία μάζας (GC-MS). Πραγματοποιήθηκε ποιοτική ανάλυση των πολικών εκχυλισμάτων και ποσοτικός προσδιορισμός των ενώσεων ροσμαρινικό και καρνοσικό οξύ με χρήση πρότυπων ενώσεων με την τεχνική της υγρής χρωματογραφίας υπερυψηλής απόδοσης με ανιχνευτή συστοιχίας διόδων συζευγμένης με φασματομετρία μάζας (UPLC-DAD-MS). Τέλος, αναπτύχθηκε μια φθορισμομετρική μέθοδος για τη διερεύνηση της ικανότητας αναστολής της αντίδρασης της μη ενζυμικής γλυκοζυλίωσης από τα υδρο-αλκοολικά εκχυλίσματα. Το σύστημα της δοκιμασίας αυτής μελετήθηκε με χρήση της τεχνικής της μικροσκοπίας Raman (micro-Raman). Τα αποτελέσματα ανέδειξαν τη διαφοροποίηση μεταξύ των εξεταζόμενων φυτικών taxa. Τα άπολα εκχυλίσματα των S. fruticosa είχαν υψηλή συγκέντρωση ευκαλυπτόλης (34,8-39,0 %) ενώ τα εκχυλίσματα των S. pomifera περιείχαν υψηλά ποσοστά α-θυϊόνης (19,7-41,0 %) και β-θυϊόνης (6,0-39,1 %). Από την ανάλυση UPLC-DAD-MS προέκυψαν 12 ενώσεις παρούσες σε όλους τους πληθυσμούς, 12 ενώσεις παρούσες στους πληθυσμούς S. pomifera και 33 που ήταν παρούσες στους πληθυσμούς S. fruticosa. Το ροσμαρινικό οξύ στα δείγματα S. pomifera κυμάνθηκε μεταξύ 3,79 και 12,55 mg/g, ενώ το καρνοσικό οξύ δεν ανιχνεύτηκε. Οι πληθυσμοί S. fruticosa περιείχαν ροσμαρινικό οξύ σε συγκεντρώσεις 7,22 και 11,01 mg/g και καρνοσικό οξύ 6,70 και 5,98 mg/g, αντίστοιχα. Όλα τα υδρο-αλκοολικά εκχυλίσματα, το ροσμαρινικό και το καρνοσικό οξύ ανέστειλαν ισχυρά την αντίδραση της μη ενζυμικής γλυκοζυλίωσης. Με χρήση micro-Raman διαπιστώθηκε η αποδιάταξη της βόειας αλβουμίνης ορού μετά από την αντίδραση με τη 2-δεοξυ-D-ριβόζη. In this master thesis, we analyzed metabolomically two populations of Salvia fruticosa (Fournoi Korseon, Rodini Achaia), two populations of Salvia pomifera L. subsp. pomifera (West Crete) and one population of Salvia pomifera subsp. calycina (sm.) Hayek (Parnitha, Attica). Their dry leaves were subjected to ultrasound-assisted extraction using petroleum ether and subsequently 70% (aq.) methanol. The qualitative and % quantitative determination of the volatile constituents of the non-polar extract were carried out with gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS), while the polar extracts were analyzed by ultra-high performance liquid chromatography–diode array detector–tandem mass spectrometry (UPLC-DAD-MS). Quantification of rosmarinic acid and carnosic acid was performed in (aq.) methanolic extracts with external standards. Furthermore, we investigated the ability of the (aq.) methanolic extracts on the inhibition of the reaction of glycation in a developed system of bovine serum albumin (BSA) and 2-deoxy-D-ribose with a fluorometric method. The model system was studied with micro-Raman spectroscopy. The differences between the plant taxa were distinct. The non-polar extracts of S. fruticosa populations had high concentrations of 1,8-cineole (34.8-39.0%) while S. pomifera ones had greater amount of a-thujone (19.7-41.0%) and b-thujone (6.0-39.1%). UPLC-DAD-MS demonstrated that 12 compounds were present in every population, 12 compounds were present in every S. pomifera population and 33 compounds were present in every S. fruticosa population. Carnosic acid was determined only in S. fruticosa (6.70 and 5.98 mg/g) while rosmarinic acid concentration in these populations found at 7.22 and 11.01 mg/g. Rosmarinic acid ranged from 3.79 to 12.55 mg/g in S. pomifera populations and the lowest values were noted in S. pomifera L. subsp. pomifera. All (aq.) methanolic extracts, rosmarinic and carnosic acid showed strong inhibitory activity against glycation of BSA. Studies with micro-Raman showed the unfolding of BSA during reaction with 2-deoxy-D-ribose. 2021-05-31T08:23:49Z 2021-05-31T08:23:49Z 2020-05-13 http://hdl.handle.net/10889/14807 gr application/pdf |